成都市健康人群流脑A群和C群抗体水平监测及A+C群流脑疫苗免疫效果分析

[目的]本文调查了成都市部分健康人群A群和C群流脑的抗体水平,同时研究了2～15岁人群对A+C群流脑多糖疫苗接种1个月后的抗体免疫反应。[方法]采用ELISA法检测不同人群血清中的A群和C群流脑抗体。[结果]健康人群A群的抗体GMT及阳性率为5.76、69.05%,C群的抗体GMT及阳性率为1.942、5.36%。A+C群流脑多糖疫苗免疫后1个月,A群的抗体GMT及阳性率上升为15.10、100.00%,C群的抗体GMT及阳性率上升为18.57、97.92%。A群的MFC及免疫成功率为3.26、52.78%,C群的MFC及免疫成功率为6.53、79.86%。[讨论]健康人群的A群抗体水平高于C群,A+C群流脑多糖疫苗的C群免疫效果优于A群。有必要对成人进行流脑疫苗免疫。

A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗稳定性研究

为确定A +C群脑膜炎球菌多糖疫苗有效期 ,对该疫苗在不同储藏温度下的稳定性进行了系统研究。将C群多糖抗原放置在 37℃ ,A +C群多糖疫苗分别放置在 2～ 8℃、37℃和 5 6℃ ,定期取样 ,用琼脂糖CL - 4B凝胶柱层析后 ,测定Kd值在 0 .5以前的多糖回收率。结果表明 ,C群多糖抗原在 37℃保存 9周 ,A +C群多糖疫苗于 2～ 8℃保存 4年、37℃保存 88周、5 6℃保存 10个月 ,多糖抗原或多糖疫苗的Kd值小于 0 .4 ,多糖回收率大于 75 % ,符合规程要求 ;因而A +C群脑膜炎球菌多糖疫苗的有效期可定为在 2～ 8℃储藏条件下 3年

冻干A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗安全性和免疫原性观察

为了评价冻干A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗(MPV)的安全性和免疫原性,按随机、盲法的原则,评价疫苗免疫后不良反应发生率、抗体阳转率及抗体几何平均滴度(GMT)。将606名健康观察者分为2～5岁、6～12岁、13～17岁、18～60岁四个年龄组,结果显示,该疫苗全身反应发生率2.64%,局部反应发生率1.32%,四个年龄组疫苗免疫后杀菌抗体阳性率分别为100%、100%、99.3%和100%,免疫后A群杀菌抗体GMT分别为1:250.47、1:190.61、1:144.22和1:205.79,免疫后C群杀菌抗体GMT分别为1:273.33、1:551.18、1:788.26和1:809.81,冻干A+C群多糖疫苗在≥2岁人群中具有良好的安全性和免疫原性,建议推广使用A+C群MPV。

C群脑膜炎球菌多糖纯化方法的改进

将C群脑膜炎球菌粗多糖的纯化改进为用1:1容量冷酚提取的生产工艺。结果表明,改进后的方法去除蛋白质效果同样能够达到《中国药典》2005版(三部)的要求,总体结果优于改进前。同时能扩大处理量而降低了生产成本,适合规模化生产。

A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗的制备及其接种人体后的血清学效果

在现行的A群脑膜炎球菌多糖原液制造工艺的基础上 ,经部分改进后进行C群脑膜炎球菌多糖原液的生产。 3批中试A +C群脑膜炎球菌多糖疫苗经全面检定后 ,各项指标均符合WHO《生物制品规程》的要求。该疫苗在接种人体后 ,5～ 13岁儿童组 ,抗A群及抗C群脑膜炎球菌的血清杀菌抗体 4倍增长率为 96 5 9%和 92 15 % ;≤2岁儿童组 ,抗A群及抗C群脑膜炎球菌的血清杀菌抗体 4倍增长率为 6 8 6 0 %和 6 9 77%。 2组儿童接种后 1个月的抗A群及抗C群膜炎球菌血清杀菌抗体几何平均滴度 (GMT )与接种前均有显著性差异 (P <0 0 0 1)

薄膜过滤法在A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗无菌检查中的应用

采用薄膜过滤法对A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗的无菌检查方法进行验证。结果表明,薄膜过滤法具有取样量大,操作简便,污染几率小,能确保检验结果的准确性、有效性和重现性,该方法适用于A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗的无菌检查方法。

不同的甲醛杀菌浓度对A群、C群脑膜炎球菌荚膜多糖内毒素含量的影响

目的研究不同的甲醛杀菌浓度对A群、C群脑膜炎球菌荚膜多糖内毒素含量的影响。方法将A群脑膜炎球菌发酵液分成A、B两组,A组采用体积分数为2.5%甲醛杀菌,B组采用体积分数为2.0%甲醛杀菌。将C群脑膜炎球菌发酵液分成C、D两组,C组采用体积分数为2.5%甲醛杀菌,D组采用体积分数为2.0%甲醛杀菌。分别纯化获得荚膜多糖,用动态浊度法测定荚膜多糖中内毒素的含量。结果 A、C两组荚膜多糖中内毒素含量显著低于B、D两组荚膜多糖中的内毒素含量(P<0.05)。结论使用不同浓度的甲醛杀菌,对A群、C群脑膜炎球菌荚膜多糖内毒素的含量有显著影响。较高浓度的甲醛利于菌体细胞的固定,从而防止细菌自溶释放内毒素,因而高浓度的甲醛能够减少其内毒素的含量,提高了产品质量。

A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗及b型流感嗜血杆菌结合疫苗中丙酮残留量检测方法的建立与验证

目的建立A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗和b型流感嗜血杆菌结合疫苗中丙酮残留量的检测方法并加以验证。方法参照《中华人民共和国药典》三部（2010年版）中＂毛细管柱顶空进样等温法＂,优化色谱条件,建立A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗和b型流感嗜血杆菌结合疫苗中丙酮残留量的检测方法并对该方法进行验证及初步应用。结果色谱条件为顶空平衡温度70℃,顶空平衡时间40 min,汽化室温度200℃,柱箱温度40℃,检测器温度250℃,进样量为1.0 m L,载气（高纯氮气）流量1.3 m L/min,尾吹气（高纯氮气）流量5 m L/min,分流比1∶1。丙酮质量分数在2×10^-6-5×10^-5范围内具有良好的线性关系（r〉0.99）。丙酮的平均回收率及相对标准偏差（RSD）分别为86.05%-105.11%及2.1%-9.5%,检测限为2×10^-6,定量限为3×10^-6。结论本方法的线性、特异性、准确性、重复性等均符合规定,方法准确、稳定,可用于A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗和b型流感嗜血杆菌结合疫苗中丙酮残留量的检测。

某新上市国产冻干A+C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗免疫原性及安全性观察

目的评价某新上市国产冻干A＋C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗接种婴幼儿的安全性和免疫原性。方法采用随机、盲法、对照的方法,选择900名6~23月龄健康儿童,其中6~11月龄300人,12~23月龄600人,每个年龄组按1∶1比例随机分到试验组和对照组。实验组接种某新上市疫苗,对照组接种罗益（无锡）生物制药有限公司生产的同类疫苗。每人接种2剂疫苗,间隔1个月,评价试验组和对照组疫苗免疫后不良反应发生率、抗体阳转率及抗体几何平均滴度（GMT）。结果免疫后两个年龄段A、C群抗体阳转（4倍增长）率均〉95%,试验组与对照组的阳转率差异无统计学意义。12~23月龄接种1剂、2剂疫苗后抗体阳转率差异无统计学意义;6~11月龄段,试验组A群抗体水平高于对照组;两个年龄段试验组的C群抗体水平均低于对照组,但均处于较高水平（〉1∶128）。实验组与对照组全身及局部不良反应率差异无统计学意义,未观察到与试验疫苗相关的严重不良事件。结论某新上市国产冻干A＋C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗在6~23月龄的儿童中具有良好安全性和免疫原性。

A+C群脑脊髓膜炎球菌多糖菌苗生产工艺与内毒素含量研究

A群及C群流脑多糖抗原用 10 0 0 0 0×g离心或不经超速离心处理 ,经用鲎试验法测定内毒素含量 ,2种工艺生产的A群及C群流脑多糖抗原的内毒素含量均很低。用未经超速离心处理的A群及C群流脑多糖抗原制成的A +C群流脑多糖菌苗 ,经鲎试验法测定 ,内毒素含量也很低 ;经家兔升温法进行热原质试验 ,家兔体温未明显升高。证明A +C群流脑多糖菌苗生产工艺不经 10 0 0 0 0×g离心去除内毒素步骤是可行的。所制备的流脑多糖抗原内毒素含量符合要求。

A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗接种反应与血清学观察

目的观察国产A+C脑膜炎多糖疫苗(A+C疫苗)的接种反应和免疫原性。方法以A+C疫苗为观察苗、伤寒Vi多糖疫苗(Vi疫苗)为对照苗,采样用整群随机对照的临床试验方法,确定观察人群和对照人群。在已接种的两组人群中,采取整群分层抽样的方法抽取接种反应观察对象,并进行连续3天随访以观察接种反应。采集部分A+C疫苗接种对象免前、免后血标本,检测血清抗体IgG4倍增长情况。结果共随访接种反应观察对象1239人,其中接种流脑A+C疫苗的771人、接种伤寒Vi疫苗的468人。A+C疫苗接种后第1天局部反应发生率为15.06%,第2天的为0.13%,第3天的为0;接种后第1天全身反应的发生率为1.16%,第2天为0.39%和第3天为0.13%。除接种后第1天A+C疫苗的局部反应发生率要明显高于Vi疫苗的外,接种后2天、3天的局部反应和第1、2、3天全身反应的发生率,A+C疫苗和Vi疫苗无显著性差异。共采集A+C疫苗接种对象免前、免后血标本各100份,抗C群脑膜炎球菌抗体4倍增长率达到94%,抗A群脑膜炎球菌抗体仅达到62%。结论A+C疫苗和伤寒Vi多糖疫苗一样,接种反应轻微,安全性好;抗C群脑膜炎球菌抗体免疫应答良好。接种前人群血清抗A群脑膜炎球菌抗体平均浓度比抗C群的高2.6倍,抗A群脑膜炎球菌抗体4倍增长率低可能与本底抗A群脑膜炎球菌抗体水平高有关。

C群流脑多糖菌苗唾液酸含量测定试验

C群脑膜炎球菌多糖菌苗是我们近年开发的一种新制品 ,其中唾液酸 (SA)是该制品的有效成份之一。为了严格控制该制品的质量 ,经反复试验 ,对比各种试验条件 ,选择出较为理想的测定SA方法———改良法。该法与Svennerholm氏法比较 ,其标准曲线变异系数 (cv % )为 0 0 3% ,低于Svennerholm氏法 (0 31% ) ;其回收率平均为10 0 6 2 %。与中检所方法比较 ,无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,对 4批样品进行 6次重复性试验 ,结果表明 ,该法重复性好 ,操作简便 ,结果可靠 ,实验周期短 ,适于同类制品的SA含量测定。

动态浊度法检测C群脑膜炎球菌多糖原液细菌内毒素含量

采用动态浊度法对多批C群脑膜炎球菌多糖原液进行细菌内毒素含量检测,同时设供试品干扰试验,并与凝胶限量法进行对比分析。从而建立了C群脑膜炎球菌多糖原液细菌内毒素定量检测方法和质量控制指标。

CDAP活化制备C群脑膜炎球菌结合疫苗原液的稳定性试验

目的：评价以1－氰基－4－二甲氨基－吡啶四氟硼酸（ CDAP ）活化制备的C群脑膜炎球菌结合疫苗原液的稳定性。方法以变通的现有工艺为基础，选取C群脑膜炎球菌结合疫苗原液连续3批样品，分别放置于（37＆#177;2）℃、（25＆#177;2）℃，和2～8℃三种温度下，根据稳定性试验原则定期取样并进行主要指标的检测，评估原液的稳定性。结果 C群脑膜炎球菌结合疫苗原液于2～8℃保存18个月，（25＆#177;2）℃保存20周，37℃保存7天，各项检测指标均符合质量标准的要求。结论在2～8℃之下，施行变通的工艺， C群脑膜炎球菌结合疫苗原液可稳定存放18个月。

干烤法测定C群脑膜炎球菌多糖原液固体总量的不确定度评定

目的建立干烤法测定C群脑膜炎球菌多糖原液固体总量的不确定度分析方法。方法分析C群脑膜炎球菌多糖原液固体总量测定过程中引入的不确定度,并对各个不确定度的分量进行评估。结果由各分量不确定度计算合成不确定度,最终给出测定结果在95%置信区间的扩展不确定度。结论 C群脑膜炎球菌多糖原液固体总量测量不确定度主要由取样及干燥过程引入,在试验中须严格控制以减小不确定度。

A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗在广东省2~6岁儿童的免疫原性和免疫持久性研究

目的评价A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗(Group A and group C meningococcal polysaccharide vaccine,MPV-AC)在广东省2~6岁儿童接种后的免疫原性和免疫持久性。方法选择广东省高州市529例2~6岁儿童作为研究对象,接种1剂次MPV-AC。分别采集免疫前、免疫后1个月、免疫后2年血清。采用血清杀菌力试验检测血清抗体水平,评价其免疫原性和免疫持久性。结果受试者免疫后1个月A群、C群抗体阳转率分别为89.60%和90.93%;受试者免疫前、免疫后1个月和免疫后2年A群抗体阳性率分别为15.69%、90.36%和19.55%,C群抗体阳性率分别为5.48%、92.25%、20.54%。受试者免疫后1个月A群、C群抗体几何平均滴度(GMT)与免疫前比差异有统计学意义(t=43.583,P<0.001;t=52.732,P<0.001),免疫后2年A群、C群抗体GMT与免疫前比差异有统计学意义(t=2.470,P值=0.014;t=7.126,P<0.001)。结论MPV-AC在2~6岁儿童中接种具有良好的免疫原性,在免疫后1个月能达到较好的保护效果,免疫后2年A群、C群抗体下降明显。

C群流行性脑膜炎多糖疫苗纯化工艺的优化研究

目的对C群流行性脑膜炎多糖疫苗纯化工艺中的部分技术参数进行优化。方法采用L16(45)正交试验法试验,以纯化工艺中的1/10饱和中性醋酸钠溶液量(A)、冷酚的温度(B)、加冷酚的量(C)、冷酚提取的次数(D)为影响因素,以精多糖相对于CTAB-复合多糖的收率为指标,对C群流脑多糖疫苗纯化工艺条件进行遴选,并对优化工艺条件下所得的精多糖进行检定。结果收率高且各项指标合格的生产工艺条件最佳组合为A3B1C1D3。结论通过此纯化工艺的参数优化可得到较高的收率,且所得C群流脑多糖抗原的各项指标均符合国家标准。

细菌内毒素对A群C群脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖蛋白质含量测定结果的影响

目的 探究Lowry法测定A群C群脑膜炎奈瑟菌(简称脑膜炎球菌)多糖原液蛋白质含量时,细菌内毒素对Lowry法的干扰情况。方法 根据《中华人民共和国药典》2015版(三部)规定的方法,测定含不同浓度的细菌内毒素的A群C群脑膜炎球菌多糖原液的蛋白质含量,对检测结果进行分析。以细菌内毒素为干扰物质,设计3种方法进行验证,对验证结果进行离散系数,即CV值分析,确定干扰限值。结果 当细菌内毒素含量较高时,A群C群脑膜炎球菌多糖原液的蛋白质含量明显增高,该结果可能为假阳性。验证试验结果显示,当溶液中细菌内毒素浓度达到0.313EU/mL时,会对检测结果产生干扰,浓度越高,干扰程度越高。结论 为获得准确的检测结果,当细菌内毒素浓度达到干扰限值时,应先消除干扰,再测定蛋白质含量。

人群接种A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗后安全性和免疫原性研究

目的以分组对照法观察A＋C群脑膜炎球菌多糖疫苗对6～24月龄幼儿和5～13岁儿童接种后的安全性和免疫原性。方法观察组共428名儿童，分为2个年龄段接种A＋C群脑膜炎球菌多糖疫苗，接种剂量为每人100μg；阳性对照组103人接种A群脑膜炎球菌多糖疫苗，接种剂量为每人50μg；阴性对照组94人接种伤寒Vi多糖疫苗，接种剂量为每人30μg。各组于接种后6、24、48和72h测量体温并观察全身和局部反应，并于免疫前、后1个月分别收集血清标本，观察组2个年龄段儿童各不少于50名于免疫后6个月和1年再次收集血清标本，免疫前后收集到的血清采用体外杀菌力试验方法进行杀菌抗体水平的测定。结果疫苗接种后人体反应轻微，428名儿童仅有3名（0.7％）出现中、强发热反应，有4名（0.9％）出现局部红晕，48h后反应全部消失。5～13岁儿童组免疫后1个月抗A和C群脑膜炎球菌杀菌抗体4倍增长率分别为96.59％、92．15％，免疫后1年的4倍增长率仍保持在90．91％和90．08％。结论A＋C群脑膜炎球菌多糖疫苗接种后具有较好的安全性和免疫原性。

A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的安全性及免疫原性分析

目的:探讨并分析婴幼儿接种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的安全性及免疫原性。方法:选取115名接种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的婴幼儿作为研究对象,观察其接种疫苗后的表现,根据其出现全身或局部不良反应的情况评价该疫苗的安全性。在接种疫苗前及接种疫苗后30 d,检测并评价婴幼儿的免疫原性。结果:接种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗前,这115名婴幼儿A群流脑抗体的阳性率和C群流脑抗体的阳性率分别为2.61%和6.09%,几何平均滴度(GMT)分别为4.30和4.38。接种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗后30 d,这115名婴幼儿A群流脑抗体的阳性率和C群流脑抗体的阳性率分别为95.65%和97.39%,GMT分别为162.27和157.39。这115名婴幼儿接种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗后出现的不良反应有发热、腹泻、皮肤斑丘疹、皮肤瘙痒、皮肤水泡疹等,其上述不良反应多较为轻微。结论:为婴幼儿接种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗具有良好的安全性及免疫原性。