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毕赤酵母表面展示磷脂酶D高密度发酵优化
被引量:
3
1
作者
刘逸寒
薄嘉鑫
+3 位作者
乔婧
张超
王建玲
路福平
《食品研究与开发》
CAS
北大核心
2012年第8期184-187,共4页
利用基因工程手段构建获得的一株细胞表面展示表达磷脂酶D的毕赤酵母工程菌株GS115/pKFS-pld,通过摇瓶单因素筛选进行发酵条件优化,确定了最佳发酵条件为:诱导产酶阶段28℃,初始pH6.5,甲醇浓度1.5%,装液量为30 mL/250 mL,250 r/min摇床...
利用基因工程手段构建获得的一株细胞表面展示表达磷脂酶D的毕赤酵母工程菌株GS115/pKFS-pld,通过摇瓶单因素筛选进行发酵条件优化,确定了最佳发酵条件为:诱导产酶阶段28℃,初始pH6.5,甲醇浓度1.5%,装液量为30 mL/250 mL,250 r/min摇床培养144 h。在此优化条件下菌体量为19.6 g/L,酶活达17.8×10-7kat/g,分别是是优化前的1.38及1.44倍。同时进行了5 L规模发酵罐分批补料培养,结果表明15 mL(/L.h)速率流加甘油补料培养基6 h后,采用溶氧恒定流加法流加甲醇,诱导132 h后,菌体量及PLD活力分别达到67.4 g/L及27.3×10-7kat/g,是摇瓶发酵水平的3.44倍及1.53倍。
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关键词
毕赤酵母表面展示
磷脂酶D
磷脂酰丝氨酸
发酵优化
酶活力
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职称材料
鱼生长激素基因工程酵母高密度发酵研究
被引量:
3
2
作者
双宝
杨丰
+1 位作者
陈荣忠
徐洵
《台湾海峡》
CAS
CSCD
1998年第A12期65-69,共5页
毕赤酵母是一种新型的高效表达单细胞蛋白的宿主菌,本实验室已用毕赤酵母克隆表达了鲈鱼生长激素基因。为了使这一实验室成果尽快转入实际应用,本研究通过对导入生长激素基因的工程菌酵母生长及诱导条件的进一步研究,筛选出了成本低...
毕赤酵母是一种新型的高效表达单细胞蛋白的宿主菌,本实验室已用毕赤酵母克隆表达了鲈鱼生长激素基因。为了使这一实验室成果尽快转入实际应用,本研究通过对导入生长激素基因的工程菌酵母生长及诱导条件的进一步研究,筛选出了成本低廉、配制方法简便且能使工程菌酵母生长良好的无机盐培养基配方,并确定了酵母发酵工艺过程中主要几种工艺条件。这为重组生长激素的扩大生产及水产养殖业中的实际应用打下了基础。
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关键词
生长激素
毕赤酵母
发酵工艺条件
鱼
基因工程菌
全文增补中
毕赤酵母发酵生产甲醇蛋白工艺条件的优化
被引量:
9
3
作者
苟万晓
卫红伟
+1 位作者
胡元森
王乐
《中国酿造》
CAS
2014年第7期78-82,共5页
利用实验室选育驯化出的高产甲醇蛋白的毕赤酵母(Pichia pastorisYM 6C P02)作为甲醇蛋白生产菌种,对甲醇蛋白发酵生产过程中的关键因素进行较为全面的考察和优化,初步确定了摇瓶水平发酵各因素的最优条件为接种量8%,分段发酵温度采...
利用实验室选育驯化出的高产甲醇蛋白的毕赤酵母(Pichia pastorisYM 6C P02)作为甲醇蛋白生产菌种,对甲醇蛋白发酵生产过程中的关键因素进行较为全面的考察和优化,初步确定了摇瓶水平发酵各因素的最优条件为接种量8%,分段发酵温度采用0~36 h,30℃,36~64 h,28℃,初始pH值为5.0,初始甲醇添加量为1.2%,装液量为50 m L/250 m L摇瓶,转速为200r/m in.在此条件下,得到的甲醇蛋白最高产量(细胞干质量)为19.3 g/L.
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关键词
甲醇蛋白
毕赤酵母
发酵
工艺条件
优化
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职称材料
基因重组毕赤酵母产蛋清溶菌酶发酵工艺及表达条件的优化
被引量:
4
4
作者
宋增健
薛松
+1 位作者
王向东
林剑
《中国酿造》
CAS
北大核心
2018年第10期20-24,共5页
以甲醇诱导型蛋清溶菌酶基因重组毕赤酵母(Pichia pastoris)NCY-2为研究菌株,选用麦芽汁为培养基,首先通过单因素试验,对培养基锥形瓶种类、原麦芽汁稀释度及外加氮源进行了优化,在此基础上,采用均匀设计试验,得到菌株NCY-2的最佳发酵...
以甲醇诱导型蛋清溶菌酶基因重组毕赤酵母(Pichia pastoris)NCY-2为研究菌株,选用麦芽汁为培养基,首先通过单因素试验,对培养基锥形瓶种类、原麦芽汁稀释度及外加氮源进行了优化,在此基础上,采用均匀设计试验,得到菌株NCY-2的最佳发酵工艺条件为发酵温度31℃、pH 5.5,转速220 r/min,接种量4%;蛋清溶菌酶最佳表达条件为诱导温度18℃、诱导pH 4.4、转速190 r/min、甲醇初始添加量为0.3%(之后每隔24 h分别添加体积分数1.0%、1.5%、2.0%,诱导72 h结束)。在此优化条件下,摇床水平发酵液中蛋清溶菌酶酶活力可达到962.4 U/m L。
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关键词
鸡蛋清溶菌酶
毕赤氏酵母
麦芽汁培养基
发酵工艺
表达条件
优化
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职称材料
斜带石斑鱼生长激素基因重组蛋白的发酵
被引量:
1
5
作者
吕晴霁
潘忠超
+3 位作者
石和荣
杨慧荣
王树启
赵会宏
《水产科学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期88-93,共6页
将含有石斑鱼生长激素基因的毕赤酵母X33进行震荡培养后,装入≥50L的自控罐中,28~30.5℃、pH 5.5~6.0、溶解氧≥30mg/L条件下发酵84h,生产石斑鱼生长激素基因重组蛋白。发酵期间,通过甲醇诱导毕赤酵母获得目的蛋白的高效表达,最后通过We...
将含有石斑鱼生长激素基因的毕赤酵母X33进行震荡培养后,装入≥50L的自控罐中,28~30.5℃、pH 5.5~6.0、溶解氧≥30mg/L条件下发酵84h,生产石斑鱼生长激素基因重组蛋白。发酵期间,通过甲醇诱导毕赤酵母获得目的蛋白的高效表达,最后通过Western Blot和SDS-PAGE聚丙酰胺凝胶电泳对目的蛋白进行定性定量检测。最终获得目的蛋白表达量约为1.5~2.0g/L,约占胞外可溶性总蛋白的16.4%。本试验用自控罐发酵生产含有斜带石斑鱼生长激素基因重组蛋白的毕赤酵母生产工艺,为实现工业化生产鱼类生长激素饵料添加剂奠定基础。
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关键词
斜带石斑鱼
生长激素基因重组蛋白
毕赤酵母
发酵
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职称材料
题名
毕赤酵母表面展示磷脂酶D高密度发酵优化
被引量:
3
1
作者
刘逸寒
薄嘉鑫
乔婧
张超
王建玲
路福平
机构
工业发酵微生物教育部重点实验室工业酶国家工程实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院
出处
《食品研究与开发》
CAS
北大核心
2012年第8期184-187,共4页
基金
十二五"农村领域国家科技计划(2011AA100905-4)
国家自然科学基金(31101219)
文摘
利用基因工程手段构建获得的一株细胞表面展示表达磷脂酶D的毕赤酵母工程菌株GS115/pKFS-pld,通过摇瓶单因素筛选进行发酵条件优化,确定了最佳发酵条件为:诱导产酶阶段28℃,初始pH6.5,甲醇浓度1.5%,装液量为30 mL/250 mL,250 r/min摇床培养144 h。在此优化条件下菌体量为19.6 g/L,酶活达17.8×10-7kat/g,分别是是优化前的1.38及1.44倍。同时进行了5 L规模发酵罐分批补料培养,结果表明15 mL(/L.h)速率流加甘油补料培养基6 h后,采用溶氧恒定流加法流加甲醇,诱导132 h后,菌体量及PLD活力分别达到67.4 g/L及27.3×10-7kat/g,是摇瓶发酵水平的3.44倍及1.53倍。
关键词
毕赤酵母表面展示
磷脂酶D
磷脂酰丝氨酸
发酵优化
酶活力
Keywords
pichia
pastoris
surface display technology
phospholipase D
Phosphatidylserine
fermentation
conditions
optimization
enzyme activity
分类号
TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
鱼生长激素基因工程酵母高密度发酵研究
被引量:
3
2
作者
双宝
杨丰
陈荣忠
徐洵
机构
国家海洋局第三海洋研究所
国家海洋局海洋生物工程重点实验室
出处
《台湾海峡》
CAS
CSCD
1998年第A12期65-69,共5页
基金
国家重点科技攻关资助!96-C01-05-04
国家海洋局青年海洋科学基金!97207
文摘
毕赤酵母是一种新型的高效表达单细胞蛋白的宿主菌,本实验室已用毕赤酵母克隆表达了鲈鱼生长激素基因。为了使这一实验室成果尽快转入实际应用,本研究通过对导入生长激素基因的工程菌酵母生长及诱导条件的进一步研究,筛选出了成本低廉、配制方法简便且能使工程菌酵母生长良好的无机盐培养基配方,并确定了酵母发酵工艺过程中主要几种工艺条件。这为重组生长激素的扩大生产及水产养殖业中的实际应用打下了基础。
关键词
生长激素
毕赤酵母
发酵工艺条件
鱼
基因工程菌
Keywords
growth hormone
,
pichia pastoris
,
technological conditions of fermentation
分类号
TQ926.2 [轻工技术与工程—发酵工程]
TQ467.21 [化学工程—制药化工]
全文增补中
题名
毕赤酵母发酵生产甲醇蛋白工艺条件的优化
被引量:
9
3
作者
苟万晓
卫红伟
胡元森
王乐
机构
义马煤业集团煤生化高科技工程有限公司
河南工业大学生物工程学院
出处
《中国酿造》
CAS
2014年第7期78-82,共5页
基金
河南工业大学博士科研基金项目(150493)
文摘
利用实验室选育驯化出的高产甲醇蛋白的毕赤酵母(Pichia pastorisYM 6C P02)作为甲醇蛋白生产菌种,对甲醇蛋白发酵生产过程中的关键因素进行较为全面的考察和优化,初步确定了摇瓶水平发酵各因素的最优条件为接种量8%,分段发酵温度采用0~36 h,30℃,36~64 h,28℃,初始pH值为5.0,初始甲醇添加量为1.2%,装液量为50 m L/250 m L摇瓶,转速为200r/m in.在此条件下,得到的甲醇蛋白最高产量(细胞干质量)为19.3 g/L.
关键词
甲醇蛋白
毕赤酵母
发酵
工艺条件
优化
Keywords
methanol protein
pichia pastoris
fermentation
technology
conditions
optimization
分类号
TQ920.6 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
基因重组毕赤酵母产蛋清溶菌酶发酵工艺及表达条件的优化
被引量:
4
4
作者
宋增健
薛松
王向东
林剑
机构
烟台大学生命科学学院
山东大学应用生命科学研究院
出处
《中国酿造》
CAS
北大核心
2018年第10期20-24,共5页
基金
国家海洋局海洋经济创新示范项目(HY2016K20)
文摘
以甲醇诱导型蛋清溶菌酶基因重组毕赤酵母(Pichia pastoris)NCY-2为研究菌株,选用麦芽汁为培养基,首先通过单因素试验,对培养基锥形瓶种类、原麦芽汁稀释度及外加氮源进行了优化,在此基础上,采用均匀设计试验,得到菌株NCY-2的最佳发酵工艺条件为发酵温度31℃、pH 5.5,转速220 r/min,接种量4%;蛋清溶菌酶最佳表达条件为诱导温度18℃、诱导pH 4.4、转速190 r/min、甲醇初始添加量为0.3%(之后每隔24 h分别添加体积分数1.0%、1.5%、2.0%,诱导72 h结束)。在此优化条件下,摇床水平发酵液中蛋清溶菌酶酶活力可达到962.4 U/m L。
关键词
鸡蛋清溶菌酶
毕赤氏酵母
麦芽汁培养基
发酵工艺
表达条件
优化
Keywords
egg white lysozyme
pichia
pastoris
wort medium
fermentation
technology
expression
conditions
optimization
分类号
Q815 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
斜带石斑鱼生长激素基因重组蛋白的发酵
被引量:
1
5
作者
吕晴霁
潘忠超
石和荣
杨慧荣
王树启
赵会宏
机构
华南农业大学动物科学学院
广东海大畜牧兽医研究院有限公司
汕头大学广东省海洋生物技术重点实验室
出处
《水产科学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期88-93,共6页
基金
广东省科技计划项目(2015A020208002)
广东省海洋生物技术重点实验室开放基金资助项目(GPKLMB201301)
+2 种基金
广东省海洋渔业科技推广专项(A201501A03
A201501A09
A201501A10)
文摘
将含有石斑鱼生长激素基因的毕赤酵母X33进行震荡培养后,装入≥50L的自控罐中,28~30.5℃、pH 5.5~6.0、溶解氧≥30mg/L条件下发酵84h,生产石斑鱼生长激素基因重组蛋白。发酵期间,通过甲醇诱导毕赤酵母获得目的蛋白的高效表达,最后通过Western Blot和SDS-PAGE聚丙酰胺凝胶电泳对目的蛋白进行定性定量检测。最终获得目的蛋白表达量约为1.5~2.0g/L,约占胞外可溶性总蛋白的16.4%。本试验用自控罐发酵生产含有斜带石斑鱼生长激素基因重组蛋白的毕赤酵母生产工艺,为实现工业化生产鱼类生长激素饵料添加剂奠定基础。
关键词
斜带石斑鱼
生长激素基因重组蛋白
毕赤酵母
发酵
Keywords
Epinephelus coioides
recombinant
growth hormone
pichia pastoris
fermentation
分类号
S965.334 [农业科学—水产养殖]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
毕赤酵母表面展示磷脂酶D高密度发酵优化
刘逸寒
薄嘉鑫
乔婧
张超
王建玲
路福平
《食品研究与开发》
CAS
北大核心
2012
3
下载PDF
职称材料
2
鱼生长激素基因工程酵母高密度发酵研究
双宝
杨丰
陈荣忠
徐洵
《台湾海峡》
CAS
CSCD
1998
3
全文增补中
3
毕赤酵母发酵生产甲醇蛋白工艺条件的优化
苟万晓
卫红伟
胡元森
王乐
《中国酿造》
CAS
2014
9
下载PDF
职称材料
4
基因重组毕赤酵母产蛋清溶菌酶发酵工艺及表达条件的优化
宋增健
薛松
王向东
林剑
《中国酿造》
CAS
北大核心
2018
4
下载PDF
职称材料
5
斜带石斑鱼生长激素基因重组蛋白的发酵
吕晴霁
潘忠超
石和荣
杨慧荣
王树启
赵会宏
《水产科学》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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