ANTIBODY TO ONCOGENE PROTEIN PRODUCT AND ITS CONJUGATE WITH RICIN A-CHAIN

The proteins encoded by oncogene were thought to be tumor associated antigen. The protein P110 in MGC803, a human gastric cancer cell line, was purified as immunogen. The IgY to the gastric cancer was extracted from eggs laid by immunized hen. The IgY could react immunohistochemically with gastric cancers. Positive staining rates of PAF were 80% in gastric cancers and markedly higher than in cancers of other organs and normal gastric tissue. The IgY-Ricin A was synthesized by the IgY conjugated with Ricin A- chain. TCID50 of MGC803 treated by the IgY-Ricin A was 0. 01 mg/ml and markedly lower than other cell. These results showed the IgY-Ricin A were able to react with gastric cancers selectively.

SMOOTH MUSCLE TUMORS OF THE GASTROINTESTINAL TRACT EXPRESSION OF RAS P21 ONCOGENE PRODUCT AND THE ASSOCIATION WITH CLINICOPATHOLOGY

Quantitative analysis of ras oncogene product P21 was performed on paraffin blocks from 55 smooth musele tumors of the gastrointestinal tract by immunofluorescence and flow cytometry.No positive evidence for P21 was found in 5 cases of normal smooth muscle tissues.

PTTG蛋白和c-myc蛋白在原发性肝细胞癌中的表达

目的 :研究PTTG蛋白和c -myc蛋白与原发性肝细胞癌 (HCC)发生的关系。方法 :应用免疫组织化学方法 (SP法 )检测 6 1例人肝细胞癌和癌旁肝组织中PTTG蛋白和c -myc蛋白的表达。结果 :PTTG蛋白和c-myc蛋白在肝癌中阳性率分别为 78.7% (48/ 6 1)和 6 7.2 % (41/ 6 1) ,在癌旁组织中阳性率分别为 91.8%(5 6 / 6 1)和 83.6 % (5 1/ 6 1) ,相关性研究显示PTTG蛋白和c -myc蛋白表达关系密切 (P <0 .0 0 5 )。结论 :PTTG和c-myc蛋白过度表达参与了人肝细胞癌的发生发展过程。

胃癌组织P^（53）基因突变、蛋白产物的表达及与病人预后的关系

采用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法对正常胃粘膜和胃癌组织中Ｐ５３基因第２４８和２４９编码区点突变进行分析，同时采用免疫组化方法对Ｐ５３蛋白的表达进行观察。结果表明，胃癌组织Ｐ５３第２４８编码区点突变率为７．２％，２４９编码区未发现有点突变。胃癌组织Ｐ５３染色阳性率为３６．５％，肿瘤大于５ｃｍ组，有淋巴结转移和浆膜侵犯及Ⅲ、Ⅳ期胃癌组Ｐ５３染色阳性率分别显著高于肿瘤小于５ｃｍ、无淋巴结转移和浆膜侵犯及Ⅰ、Ⅱ期胃癌组（Ｐ＜０．０１）。Ｐ５３染色阳性者５年存活率为２１．１％，染色阴性者为５０．０％，两组５年存活率差别非常显著（Ｐ＜０．０１）。以上提示检测胃癌组织Ｐ５３蛋白有助于判断胃癌患者预后。

PTTG基因在人肝细胞癌中的表达

研究PTTG基因与原发性肝细胞癌 (HCC)发生的关系。方法 :应用免疫组织化学 (SP法 )和原位杂交 (DNA -RNA)技术检测 6 1例人肝细胞癌和癌旁肝组织中PTTGmRNA和PTTG蛋白的表达。结果 :PTTGmRNA在肝癌和癌旁组织阳性率分别为 72 .1% (44 /6 1)和 93.4 % (5 7/6 1) ,肝癌和癌旁组织PTTG蛋白阳性率分别为 78.7% (48/6 )和 91.8% (5 6 /6 1) ,相关性研究显示PTTGmRNA和PTTG蛋白表达结果关系密切 (P <0 .0 0 5 )。结论 :PTTG基因的过度表达参与了人肝细胞癌的发生发展过程。

NDPK/nm23在胆囊、胆管癌中的表达及临床意义

为探讨核苷二磷酸激酶／ｎｍ２３（ＮＤＰＫ／ｎｍ２３）在胆囊、胆管癌中的表达及临床意义，用免疫组化ＡＢＣ法对４１例胆囊癌、１２例胆管癌ＮＤＰＫ／ｎｍ２３表达进行了测定。结果发现：ｎｍ２３在恶性肿瘤中的表达率明显高于良性病变（Ｐ＜０．０５）。ＮＤＰＫ／ｎｍ２３表达与胆囊及胆管癌组织的分化、局部浸润及淋巴转移密切相关（Ｐ＜０．０５），提示：ｎｍ２３检测对正确估计肿瘤的侵袭性、淋巴转移潜能及预后有重要价值。

新鲜乳腺疾病组织C－erbB－2基因蛋白表达、癌胚抗原、性激素受体的研究

应用ＡＢＣ法对４２例乳腺癌、４０例乳腺良性病变新鲜冰冻组织进行了Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白表达的研究，比较了Ｃ－ｅｒｂＢ－２、雌激素受体（ＥＲ）、孕激素受体（ＰｇＲ）、癌胚抗原（ＣＥＡ）在乳腺癌组织中的表达。结果：乳腺癌中２６例（６１．９％）有Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因表达，强阳性表达８例（１９．０％），良性乳腺病变也有表达；淋巴结转移多见于Ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性、ＥＲ阴性，ＣＥＡ阴性病例；随着Ｃ－ｅｒｂＢ－２表达程度增加（－→＋→＋＋），淋巴结转移阳性率增加，临床分期为Ｉ期的患者数减少，ＩＩ、ＩＩＩ期增多，ＥＲ、ＰｇＲ受体水平下降。提示，Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白表达与预后有关，表达强度越高，预后越差。

食管癌中HPV16、18感染与多癌基因产物表达的研究

目的 :探讨高危型HPV16、18感染、多个癌基因激活在食管癌发生机制中的作用。方法 :采用免疫组化技术 ,检测本地区人口食管鳞癌、食管鳞状上皮不典型性增生和食管粘膜慢性炎症组织中HPV16、18E6蛋白 ,p5 3,p2 1ras ,c -myc和c-erbB - 2癌基因蛋白的表达情况。结果 :癌组中E6、p5 3、p2 1ras、c -myc、c -erbB - 2和不典型性增生组中E6、p5 3、p2 1ras癌基因蛋白的阳性表达与炎症组相比 ,差异均非常显著 (P <0 0 1)。E6、p5 3、p2 1ras同时阳性表达在癌组和不典型性增生组中分别为 48 0 % (2 4/5 0 )、30 0 % (3/10 )。癌组中E6与 p5 3,E6与p2 1ras,p5 3与 p2 1ras的阳性表达均具显著相关性 (P <0 0 5 )。结论 :高危HPV16、18型感染、多个癌基因的激活、协同 ,可能涉及本地区人口食管癌的发生过程。p5 3、p2 1ras基因的突变 /激活可能是一个早期事件。E6、p5 3、p2 1ras的联合检测有可能成为食管癌早期诊断的指标之一。

乳腺不典型增生组织中ras基因产物表达的意义

用免疫组化法检测正常乳腺组织、乳腺囊性增生病和乳腺癌中ｒａｓ癌基因产物ｐ２１蛋白表达。结果显示正常乳腺组织无ｐ２１蛋白表达，乳腺囊性增生病不典型增生Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级，乳腺癌组织分化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级ｐ２１蛋白表达阳性率分别为１０％、３０％、４０％、４６％、６４％和８４％。乳腺癌不同组织学类型中ｐ２１蛋白表达阳性率差别无显著性。在乳腺癌前的不典型增生阶段已有ｒａｓ癌基因产物的过度表达，随着不典型增生程度加重其表达阳性率增加，提示ｒａｓ癌基因改变及其产物表达增多可发生在乳腺上皮细胞癌变之前和其进展期，与乳腺癌发生及其生物学行为密切相关。可能成为临床监测乳腺癌前病变的一种有重要价值的参考指标。

HPV16、18E6、c-erbB-2及p21ras基因蛋白的表达与宫颈癌的关系

目的 研究人乳头状瘤病毒 (humanpapillomavirus,HPV) 16和 18型E6蛋白及c erbB 2和p2 1ras基因蛋白的表达与宫颈癌的关系。方法 应用免疫组化envision法 (二步法 )对宫颈鳞癌 6 4例、腺癌 2 0例、宫颈上皮瘤变 (cervi calintraepithelialneoplasia ,CIN) 30例及正常子宫颈粘膜 30例行HPV16、18E6、c erbB 2及p2 1ras染色。结果 上述各组织HPV16、18E6阳性率分别为 78 1% (5 0 / 6 4)、15 0 % (3/ 2 0 )、5 6 7% (16 / 30 )、10 0 % (3/ 30 ) ,其中鳞癌及CIN中明显高于正常宫颈组织的表达 (P <0 0 1) ,腺癌与正常宫颈组织表达无明显差异 (P >0 0 5 )。上述组织中c erbB 2及p2 1ras阳性率分别为 5 9 4% (38/ 6 4)、6 0 0 % (12 / 2 0 )、2 3 3% (7/ 30 )、10 0 % (3/ 30 )和 5 4 7% (35 / 6 4)、5 5 0 % (11/ 2 0 )、30 0 % (9/ 30 )、3 3 % (1/ 30 ) ,其中鳞癌和腺癌明显高于正常宫颈组织的表达 (P <0 0 1)。在鳞癌中 ,E6与c erbB 2同时表达 35例 ,占 5 4 7% (35 / 6 4) ,E6与p2 1ras同时表达 31例 ,占 48 4% (31/ 6 4) ,与腺癌、CIN及正常宫颈粘膜组织中二者同时表达的病例相比有明显差异 (P <0 0 1)。结论 HPV16、18E6、c erbB 2及p2 1ras与宫颈鳞癌的发生发展有一定相关性。c erbB 2?

大蒜对松花江水有机提取物致癌活性的阻断作用

目的探讨大蒜对松花江水有机提取物致癌活性的阻断作用及其机制,为进一步开发和利用大蒜预防肿瘤提供依据。方法采用体外试验 ,观察大蒜浸液对松花江水有机提取物诱导的BALB/C胚胎成纤维细胞恶性转化及其DNA损伤的影响 ,并通过检测大蒜水浸液对转化细胞p53、p16、p21表达和细胞凋亡的作用 ,探讨其阻断作用的机理。结果大蒜水浸液可通过诱导细胞中p53、p16和p21的表达 ,进而引起受损伤细胞的凋亡而抑制江水有机提取物诱发的转化。对已经发生恶性变的细胞 ,大蒜水浸液没有诱发细胞凋亡的作用 ,3种蛋白的表达率也未见升高。结论大蒜水浸液对松花江水有机污染物的致癌活性具有阻断作用。

d-宁烯、丹参及姜黄素衍生物对ras基因产物膜结合和细胞间隙信息传导的影响

目的旨在寻找新型抗肿瘤药物，进一步研究ｄ宁烯、丹参及姜黄素衍生物的抗肿瘤机理。采用分子生物学方法及划痕标记染料示踪技术，研究了４种人实体瘤起源的细胞系的细胞间隙信息传导（ＧＪＩＣ）、Ｈｒａｓ癌基因表达以及ｒａｓ癌基因产物（Ｐ２１ｒａｓ蛋白）表达状态，并观察了４种天然产物对它们的影响。结果表明，细胞内染料传输功能的丧失与ｒａｓ基因突变率呈正相关；单萜化合物ｄ宁烯和酚类化合物丹参衍生物的抗肿瘤作用可能与抑制Ｐ２１ｒａｓ蛋白膜结合和增强细胞间隙信息传导功能有关。

眼眶横纹肌肉瘤rasp21、p53蛋白表达及其与预后的关系

目的研究ｒａｓｐ２１，ｐ５３癌基因蛋白产物在眼眶横纹肌肉瘤（ＲＭＳ）中的表达及其与预后的关系。方法对确诊的２１例眼眶ＲＭＳ用免疫组化ＡＢＣ法标记ｒａｓｐ２１，ｐ５３蛋白。结果发现ｒａｓｐ２１，ｐ５３在眼眶ＲＭＳ的阳性率分别为４２．９％和７６．２％。随访的１３例患者中，ｐ５３阳性表达组１００％预后不好，ｒａｓｐ２１／ｐ５３阳性表达组８０％预后不好，ｒａｓｐ２１／ｐ５３阴性组２５％预后不好。阳性组和阴性组之间有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论ｒａｓｐ２１，ｐ５３蛋白表达可判断预后，而ｐ５３更为敏感，是肿瘤预后差的重要指标之一。

宫颈鳞癌组织HPV16/18感染与多个癌基因产物表达的研究

目的 探讨 HPV1 6、1 8的感染及多个癌基因的激活在宫颈鳞癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组化方法对 1 9例慢性宫颈炎、40例宫颈上皮内瘤变 ( CIN)及 70例浸润性宫颈鳞癌进行 E6、PCNA、p5 3、p2 1 ras和 c- myc蛋白检测。结果 CIN 和浸润性宫颈鳞癌组 E6、PCNA、p5 3、p2 1 ras阳性率明显高于慢性宫颈炎、CIN 和 CIN ,而其 c- myc阳性率则明显低于其它几组。结论 HPV1 6、1 8的感染及 PCNA、p5 3、p2 1 ras、c- myc的异常表达与宫颈鳞癌的发生发展密切相关。

小白菊内酯抑制胎牛血清诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及信号转导机理

目的 探讨小白菊内酯的抗动脉粥样硬化机理与IκBα ,环氧合酶 2 (COX 2 ) ,p2 1,p2 7蛋白表达的关系。方法 培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC) ,Western印迹杂交法检测IκBα ,COX 2 ,p2 1,p2 7蛋白表达 ,流式细胞仪检测VSMC周期情况 ,[3H ]TdR参入测定VSMC的DNA合成。结果小白菊内酯 (30 μmol·L- 1)以时间依赖关系上调IκBα ,p2 1,p2 7蛋白表达和以时间依赖关系抑制COX 2蛋白表达 ,10～ 30 μmol·L- 1以剂量依赖关系使VSMC周期中的G0 /G1期细胞比例明显增多 ,S期细胞比例显著减少 ,同时抑制VSMC的 [3H]TdR参入。结论 ①小白菊内酯可能通过上调IκBα蛋白表达抑制核因子 κB活性 ,从而抑制COX 2蛋白表达 ,通过抑制COX 2蛋白表达来抑制VSMC增殖 ;②小白菊内酯可能通过上调调控G1 S周期转换的p2 1,p2 7蛋白来抑制VSMC增殖。

卵巢癌ras癌基因产物p21的定量分析

目的：探讨卵巢癌ｒａｓｐ２１表达与ＤＮＡ倍体水平及临床病理参数的关系。方法：采用流式免疫荧光技术。结果：３６例卵巢癌１４例ｒａｓｐ２１呈阳性表达，ｒａｓｐ２１阳性表达与组织分级无关：ｒａｓｐ２１阳性表达量在二倍体与异倍体之间有显著性差异；ｒａｓｐ２１阳性表达多见于粘液性卵巢癌。

肝细胞癌和肝硬变中bcl-2蛋白表达与细胞凋亡的关系

目的：研究肝细胞癌和肝硬变中ｂｃｌ－２蛋白表达与细胞凋亡的关系。方法：应用原位脱氧核糖核酸末端转移酶标记法和Ｓ－Ｐ免疫组化技术检测２８例肝硬变和３５例肝细胞癌组织中凋亡细胞的分布、密度及ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果：肝细胞癌组织中凋亡细胞密度显著低于肝硬变，且随其恶性程度的增高呈逐渐降低趋势；凋亡细胞在肝硬变中多分布于假小叶周边区域。ｂｃｌ－２蛋白在肝细胞癌组织中的表达强度明显高于肝硬变，但表达的阳性率差异不明显。结论：ｂｃｌ－２通过其表达产物调控肝硬变和肝细胞癌中的细胞凋亡，在肝细胞癌发生中起重要作用。

胃癌及癌前病变中表皮生长因子受体和P21^(ras)蛋白表达的研究

探讨表皮生长因子受体 (EGFR)和ras原癌基因产物—P2 1蛋白的表达与胃癌生物学行为的关系及其在胃癌发生发展中的作用。方法 :采用免疫组化S -P法。结果 :P2 1ras蛋白在慢性浅表性胃炎、异型增生、胃癌中阳性率分别为 10 % (2 /10 ) ,2 0 % (4 /2 0 ) ,52 .5% (2 1/4 0 ) ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。EGFR在正常胃粘膜中均为阴性 ,EGFR在轻、中、重度异型增生的阳性率分别为 3 3 .3 % (3 /9) ,66.7% (4 /6) ,60 % (3 /5)。EGFR在早期和进展期胃癌中的阳性率分别为 2 0 % (2 /10 )和 60 % (18/3 0 ) ,进展期胃癌EGFR的阳性率显著高于早期胃癌 (P <0 .0 5)。结论 :P2 1ras蛋白、EGFR参与了胃癌的发生、发展 ,两者阳性的肿瘤可能具有更强的浸润与转移能力。

平滑肌肿瘤组织形态与预后的关系

分析１５０例平滑肌肿瘤的随访资料。４６例ＬＭ中除１例死于其它原因外，余全部存活。１０４例ＬＳ术后逐年生存率为１年８４．６％，２年６９．２％，３年５７．７％，４年５３．８％，５年５０．０％。ＬＳ预后与核分裂数、细胞形态、细胞密度及细胞异形性四项形态学指标均有关，其中核分裂数与预后关系最为密切。免疫组化检测结果显示：①ＰＣＮＡ及ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达与ＬＳ预后有密切关系。②ＰＣＮＡ的表达与核分裂数、细胞形态及细胞异形性有关。③ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达与核分裂数及细胞异形性有关。提示这二项检测方法是估计ＬＳ预后的可靠手段。

Ras、c-myc、p^(53)癌基因蛋白在喉癌及癌旁 不同距离组织中表达的研究

研究癌基因及抗癌基因在喉癌及癌旁不同距离处的表达特点及意义。方法：应用ＬＳＡＢ微波 免疫组化法，检测了ｒａｓ，ｃ－ ｍｙｃ及 ｐ５３在 ３０例喉癌、边缘区、癌旁 ０．５ｃｍ、１．０ｃｍ、１．５ｃｍ、２．０ｃｍ处粘膜和４例正 常喉粘膜中的表达。结果；①ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、ｐ５３在喉癌组织中有较高的阳性表达率，分别为８６．７％（２６／３０）、９６．７％ （２９／３０）、６３．３％（１９／３０），与癌旁及正常组织相比，差异显著（Ｐ＜０．０１），ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ在正常组织中有低量表达，ｐ５３ 从癌旁１．０ｃｍ处开始出现表达。②两种以上癌基因蛋白产物同时表达阳性者在喉癌组织为２８例（９３．３％），其中 ｒａｓ＋ｃ－ｍｙｃ＋ｐ５３者为１７例（５６．７％）。癌旁组织中也存在着复合表达，在正常组织中无一例联合表达。③ｒａｓ、ｃ －ｍｙｃ、ｐ５３的单独及联合表达依正常粘膜→癌旁２．０ｃｍ→１．５ｃｍ→１．０ｃｍ→０．５ｃｍ→边缘区→癌依次增高，多 数在癌旁１．０ｃｍ处与０．５ｃｍ以内处的表达存在有显著差异（Ｐ＜０．０５）。④三种癌基因产物的表达与喉癌的分化 程度无关（Ｐ＞０．０５）。结论：ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、ｐ５３基因改变均参与了喉癌?