目的:本实验探讨血管内皮生长因子165(VEGF165)对体外培养的胃癌细胞株BGC-823凋亡的影响和机制.方法:将BGC-823细胞分为对照组、感染复数(MOI=20)病毒Ad-GFP的Ad-GFP组,重组腺病毒Ad-VEGF165转染的Ad-VEGF165组.应用流式细胞仪检测细...目的:本实验探讨血管内皮生长因子165(VEGF165)对体外培养的胃癌细胞株BGC-823凋亡的影响和机制.方法:将BGC-823细胞分为对照组、感染复数(MOI=20)病毒Ad-GFP的Ad-GFP组,重组腺病毒Ad-VEGF165转染的Ad-VEGF165组.应用流式细胞仪检测细胞凋亡的百分率,RT-PCR方法检测凋亡抑制基因Bcl-2mRNA的表达,免疫细胞化学方法检测Bcl-2蛋白的表达情况.结果:流式细胞仪测定显示Ad-VEGF165组的细胞凋亡率明显低于Ad-GFP组和对照组(4.6%±0.31% vs 8.37%±1.06%.7.73%±0.86%,P<0.01);RT-PCR和细胞免疫化学结果显示VEGF165转染BGC-823细胞后促进了细胞Bcl-2mRNA和蛋白的表达.Ad-VEGF165组Bcl-2mRNA和蛋白均高于对照组和Ad-GFP组(Bcl-2mRNA:0.761±0.05 vs 0.363±0.12.0.356±0.08;Bcl-2蛋白:1.010±0.08 vs 0.865±0.07,0.901±0.05;P<0.01).结论:VEGF165通过上调凋亡抑制基因Bcl-2及其蛋白的表达,来抑制血浆饥饿诱导的胃癌细胞的凋亡.展开更多
目的观察土茯苓提取物落新妇苷对永生化人角质形成细胞Ha Ca T增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法收集对数生长期Ha Ca T细胞,观察组分别加入不同浓度落新妇苷、空白对照组加DMEM培养液,培养24 h后,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,流式...目的观察土茯苓提取物落新妇苷对永生化人角质形成细胞Ha Ca T增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法收集对数生长期Ha Ca T细胞,观察组分别加入不同浓度落新妇苷、空白对照组加DMEM培养液,培养24 h后,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞早期凋亡率;收集对数生长期Ha Ca T细胞,观察组分别加入不同浓度落新妇苷+20 ng/m L INF-γ、模型对照组加20 ng/m L INF-γ、空白对照组加DMEM培养液培养24 h,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中的核转录因子κB(NF-κB)p65、骨桥蛋白(OPN)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA。结果落新妇苷在25、50、100、200、400μg/m L时,Ha Ca T细胞增殖抑制率分别为3.06%、26.53%、40.82%、60.20%及61.22%。落新妇苷在50、100、200μg/m L时,观察组Ha Ca T细胞早期凋亡率分别为3.26%、8.24%和15.38%;与空白对照组早期凋亡率(1.33%)比较,P均<0.05。与空白对照组比较,模型对照组NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达增加(P均<0.01);与模型对照组比较,观察组随落新妇苷浓度增加,NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达逐渐降低(P均<0.05)。结论土茯苓提取物落新妇苷能抑制Ha Ca T细胞增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与制抑细胞NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达有关。展开更多
文摘目的:本实验探讨血管内皮生长因子165(VEGF165)对体外培养的胃癌细胞株BGC-823凋亡的影响和机制.方法:将BGC-823细胞分为对照组、感染复数(MOI=20)病毒Ad-GFP的Ad-GFP组,重组腺病毒Ad-VEGF165转染的Ad-VEGF165组.应用流式细胞仪检测细胞凋亡的百分率,RT-PCR方法检测凋亡抑制基因Bcl-2mRNA的表达,免疫细胞化学方法检测Bcl-2蛋白的表达情况.结果:流式细胞仪测定显示Ad-VEGF165组的细胞凋亡率明显低于Ad-GFP组和对照组(4.6%±0.31% vs 8.37%±1.06%.7.73%±0.86%,P<0.01);RT-PCR和细胞免疫化学结果显示VEGF165转染BGC-823细胞后促进了细胞Bcl-2mRNA和蛋白的表达.Ad-VEGF165组Bcl-2mRNA和蛋白均高于对照组和Ad-GFP组(Bcl-2mRNA:0.761±0.05 vs 0.363±0.12.0.356±0.08;Bcl-2蛋白:1.010±0.08 vs 0.865±0.07,0.901±0.05;P<0.01).结论:VEGF165通过上调凋亡抑制基因Bcl-2及其蛋白的表达,来抑制血浆饥饿诱导的胃癌细胞的凋亡.
文摘目的观察土茯苓提取物落新妇苷对永生化人角质形成细胞Ha Ca T增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法收集对数生长期Ha Ca T细胞,观察组分别加入不同浓度落新妇苷、空白对照组加DMEM培养液,培养24 h后,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞早期凋亡率;收集对数生长期Ha Ca T细胞,观察组分别加入不同浓度落新妇苷+20 ng/m L INF-γ、模型对照组加20 ng/m L INF-γ、空白对照组加DMEM培养液培养24 h,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中的核转录因子κB(NF-κB)p65、骨桥蛋白(OPN)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA。结果落新妇苷在25、50、100、200、400μg/m L时,Ha Ca T细胞增殖抑制率分别为3.06%、26.53%、40.82%、60.20%及61.22%。落新妇苷在50、100、200μg/m L时,观察组Ha Ca T细胞早期凋亡率分别为3.26%、8.24%和15.38%;与空白对照组早期凋亡率(1.33%)比较,P均<0.05。与空白对照组比较,模型对照组NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达增加(P均<0.01);与模型对照组比较,观察组随落新妇苷浓度增加,NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达逐渐降低(P均<0.05)。结论土茯苓提取物落新妇苷能抑制Ha Ca T细胞增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与制抑细胞NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达有关。
