野生大豆GsRNF12基因的克隆及表达载体的构建

采用RT-PCR的方法,根据栽培大豆的RNF12基因全长设计特异引物,从野生大豆克隆到GsRNF12基因。序列分析表明,该基因的723 bp的开放阅读框(ORF),编码241个氨基酸。序列分析结果表明:野大豆GsRNF12基因的氨基酸序列与大豆、苜蓿同源性>80%,并构建了GsRNF12基因的表达载体。

野生大豆GsRNF12基因的克隆及表达特性研究

采用RT—PCR的方法，根据栽培大豆的RNF12基因全长设计特异引物，从野生大豆克隆到GsRNF12基因。序列分析表明，该基因含723bp的开放阅读框（ORF），编码240个氨基酸，GsRNF12蛋白在178～220氨基酸处有典型的C4HC3结构域，属于C3HC4锌指蛋白家族。利用实时荧光定量PCR对野生大豆GsRNF12基因的表达特性进行分析，结果表明：野生大豆GsRNF12基因对高盐、干旱、低温、ABA、SA胁迫处理均存在不同程度的应答响应；GsRNF12基因在根、茎、叶的表达有差异性，其中在根中表达量最大。