Antiarrhythmic ionic mechanism of Guanfu base A—Selective inhibition of late sodium current in isolated ventricular myocytes from guinea pigs

The present study was designed to determine the effects of Guanfu base A(GFA) on the late sodium current(INa.L),transient sodium current(INa.T),HERG current(IHERG),and Kv1.5 current(IKv1.5).The values of INa.L,INa.T,IHERG and IKv1.5 were recorded using the whole-cell patch clamp technique.Compared with other channels,GFA showed selective blocking activity in late sodium channel.It inhibited INa.L in a concentration-dependent manner with an IC50 of(1.57 ± 0.14) μmol·L-1,which was significantly lower than its IC50 values of(21.17 ± 4.51) μmol·L-1 for the INa.T.The inhibitory effect of GFA on INa,L was not affected by 200μmol·L-1 H2O2.It inhibited IHERG with an IC50 of(273 ± 34) μmol·L-1 and has slight blocking effect on IKv1.5,decreasing IKv1.5 by only 20.6% at 200 μmol·L-1.In summary,GFA inhibited INa.L selectively and remained similar inhibition in presence of reactive oxygen species..These findings may suggest a novel molecular mechanism for the potential clinical application of GFA in the treatment of cardiovascular disorders.

老子生态哲学核心词英译研究

老子哲学是自然哲学,发掘老子哲学的生态价值对解决当前的生态问题,以及推进生态文明建设具有重要意义。本文通过湛约翰、阿瑟•韦利和陈荣捷的译本,考察了他们对老子生态哲学核心词:“道”“无为”“观复”“自然”的阐释与翻译。研究发现湛约翰的阐释融合了部分基督教思想,韦利的阐释具有人类学民族志的特色,而陈荣捷更注重从中国传统文化史和思想史角度阐释。通过分析译者阐释可见,他们大部分情况下能较好地把握和展现老子生态哲学核心词的基本含义,但译者身份不同、所处社会背景不同也使得其译文侧重有所不同。通过对其译文分析发现,译者们综合运用了直译与意译法、语境化释译法、增补翻译法、加注翻译法、音译法等多种翻译方法,以不同方法呈现了老子生态哲学核心词的生态意蕴,不同译本之间可以相互补充,能更好地将老子生态思想展现出来。

高效液相-质谱联用法对盐酸关附甲素在大鼠尿中代谢物的研究

目的 研究盐酸关附甲素在大鼠尿中的代谢产物。方法 大鼠iv盐酸关附甲素后收集尿 ,用高效液相 质谱联用方法测定。通过与标准化合物的色谱保留时间、分子离子峰、碎片离子峰对照从而鉴定I相代谢物。通过用葡糖醛酸酶和硫酸酯酶酶解鉴定其水解产物 (苷元 )从而确定II相结合物。结果 大鼠尿中发现I相代谢物关附醇胺和关附壬素 ;尿经过葡糖醛酸酶和硫酸酯酶酶解后 ,产生关附甲素和关附壬素。结论 盐酸关附甲素在大鼠体内可以转化为关附壬素、关附醇胺、关附甲素葡糖醛酸和硫酸结合物、关附壬素葡糖醛酸和硫酸结合物。经过生物转化 ,代谢产物的极性增加 。

液相色谱-质谱联用法测定犬血浆中盐酸关附甲素的血药浓度及其药代动力学

目的 建立用于测定盐酸关附甲素血药浓度的液相色谱 质谱联用分析方法 ,并探讨关附甲素在犬体内的药代动力学。方法 犬 6只iv盐酸关附甲素 7 5 6mg·kg- 1 后采集一系列血样 ,利用LC MS联用系统测定血浆药物浓度 ,并用 3P87软件拟合求算药代动力学参数。结果 盐酸关附甲素浓度 0 42～ 2 1 2 μg·mL- 1 线性关系良好 (γ=0 9994)。绝对回收率高于 80 % ,日内、日间RSD均小于 15 % ,符合生物样品分析要求。 6只犬iv盐酸关附甲素7 5 6mg·kg- 1 后的血药浓度 时间曲线符合开放三室模型 ,其快分布相、慢分布相和末端消除相的半衰期 (T1 2 π ,T1 2 α和T1 2 β)分别为 0 0 7,1 5和 13 5h。曲线下面积 (AUC)、中央室分布容积 (Vc)和血浆清除率 (CLs)分别为 6 1 43μg·h·mL- 1 ,0 37L·kg- 1 和 0 14L·kg- 1 ·h- 1 。结论 建立的LC MS联用方法专属性强 ,灵敏度高 ,可用于盐酸关附甲素的体内定量分析。

关附甲素对心肌细胞电生理特性的影响

用细胞内微电极术结合微机自动分析,研究关附甲素(GFA)对豚鼠乳头状肌快反应动作电位的影响。结果表明GFA(2.6～260μmol/L)可依浓度降低APA和V_(max),增加V_(MT),且使V_(max)恒定出现在膜电位除极至-27+SD6 mV水平。GFA(2.6～26μmol/L)使APD_(50)、APD_(90)和ERP延长,82～260μmol/L时,APD_(50)、APD_(90)缩短,而ERP/APD_(90)增大。GFA对V_(max)的抑制作用呈明显的频率依赖性和电位依赖性,并使心肌细胞的兴奋性降低。表明GFA主要是通过对快Na通道阻滞而发挥其抗心律失常作用的。

静脉注射盐酸关附甲素的人体药代动力学研究

关附甲素（Ｇｕａｎｆｕ Ｂａｓｅ Ａ－ＧＦＡ）是从中药关白附的根块中提取分离得到的具有抗心律失常活性的单体药物。为研究单次静脉注射盐酸ＧＦＡ人体内药代动力学。方法：健康男性１０名，年龄：２２岁－２４岁（平均２２．７±０．７岁）；体重： ５０ｋｇ－ ７０ｋｇ（平均６０．６ ± ４．５ｋｇ）。单一剂量盐酸ＧＦＡ ４ｍｇ·ｋｇ－１，恒速静推５ｍｉｎ。静脉用药前及静注完毕即刻（０），５，１０，２０，３０，６０，９０，１５０，２４０，３６０，５４０，７２０ｍｉｎ取血。采用气相色谱法测定关附甲素血药浓度。绘制药物浓度－时间曲线图。用３Ｐ８７药代动力学程序拟合药－时曲线，推导出其动力学模型；并求出相应的药代动力学参数。结果与结论：静脉应用关附甲素的药代动力学类型以三室模型解释为宜。药代动力学参数：中心室分布容积（Ｖｃ），１７．５±２．８Ｌ；血药浓度－时间曲线下面积（ Ａ ＵＣ０－ｔ） ９８０．６ ± １６３．９ｍｇ· Ｌ－１ ｍｉｎ；药物总清除率（ ＣＬ） ０．２±０，１Ｌ·ｍｉｎ－１；分布半衰期（Ｔ１／２ｐｉ） ２．６±１．２ｍｉｎ；分布半衰期（Ｔ１／２ａ） １８．１±２０．４ｍｉｎ；消除半衰期（ Ｔ１／２β） ４８０．４ ±１３４．

关附甲素代谢产物关附胺醇在大鼠体内的药代动力学研究

目的:建立关附胺醇血药浓度的高效液相色谱 质谱联用分析方法,并探讨其在大鼠体内的药代动力学。方法:大鼠iv关附胺醇2 0mg/kg后不同时间点采血,利用LC- MS法测定血药浓度,并用3P87软件求算其药代动力学参数。结果:关附胺醇浓度在0 . 0 5～2 0 μg/mL范围内线性关系良好(r =0 . 9989)。绝对回收率大于80 % ,日内、日间RSD均小于15 %。大鼠iv关附胺醇2 0mg/kg后其主要动力学参数AUC、Vc、T1/2 、CLs分别为(5 . 5 9±1. 5 7)mg·h·L-1、(1 .19±0 .17)L·kg-1、(1 .88±0 . 2 4 )h、(3 .81±1. 0 2 )L·kg-1·h-1。排泄试验结果表明,给药2 4h后从尿中,胆汁中和粪便中排出的原型药物累计量分别相当于给药量的82 . 4 %、7. 5 %、4 . 7%。结论:该法专属性强,灵敏度高,可用于关附胺醇的体内定量分析。该药在大鼠体内消除较快,主要以原型从尿中排出。

盐酸关附甲素对大鼠心室肌细胞膜L型钙通道(J_(Ca-L))的影响

目的:研究盐酸关附甲素对正常大鼠心室肌细胞L型钙离子通道(I_(Ca-L))的影响。方法:应用膜片钳全细胞记录法,记录关附甲素对I_(Ca-L)的作用并对通道动力学进行初步评价。结果:关附甲素呈浓度依赖性阻滞I_(Ca-L),在25,125,250和1000μmol·L^(-1)时I_(Ca-L)峰值电流密度(去极化至0mV时)分别减少为用药前的81．76%, 77．54%,76．46%和64．77%(P＜0．05)。关附甲素使I_(Ca-L)的I-V曲线上移,但不改变其激活电位、峰值电位。关附甲素呈轻度使用依赖性阻滞I_(Ca-L),对I_(Ca-L)静息态有阻滞作用。关附甲素对I_(Ca-L)激活曲线无明显影响,但使I_(Ca-L)失活后再激活的恢复时间常数(τ)延长,有作用于I_(Ca-L)的失活态的可能。结论:因为关附甲素产生明显I_(Ca-L)阻滞的浓度远大于临床浓度,其对I_(Ca-L)的阻滞作用可能不是抗心律失常的主要作用机制。关附甲素呈浓度依赖性阻滞I_(Ca-L),其作用于L型钙通道的静息态,也有可能作用于失活态。

关附甲素抑制犬冠脉结扎引起的心律失常

关附甲素抑制犬冠脉结扎引起的心律失常王友群，苏玲，龚国清，刘静涵（南京中国药科大学药理研究室，中草药化学教研室２１０００９）关附甲素（ｇｕａｎｆｕｂａｓｅＡ，ＧＦＡ）是从关白附子中提取的一种二萜类生物碱（１，２）。现已发现它能抑制乌头碱、哇巴因和氯化...

关附甲素在犬体内的药动学-药效学结合模型分析

用药动学-药效学结合模型,对犬静脉推注关附甲素后,进行了药代动力学和药效动力学分析。以QTc延长百分率为效应指标,关附甲素的E_(max)、S、K_(co)和EC_(50)分别为1.11±0.01,1.06±0.43,0.097±0.046 min^(-1)和1.50×10^(-6)±0.92×10^(-6)μg/ml。

盐酸关附甲素对大鼠血管舒缩功能的影响及其机制

目的研究盐酸关附甲素(guanfu base-A,GFA)对大鼠离体胸主动脉舒缩功能的影响,并探讨其可能机制。方法将SD大鼠胸主动脉分离并制成血管环,分成内皮完整组和去内皮组,采用离体血管环实验,观察GFA对基础状态,氯化钾(KCl)预收缩及苯肾上腺素(phenylephrine,PE)预收缩的血管舒张功能的影响,并结合不同抑制剂及无钙液处理,探讨其舒张血管的可能机制。结果累积浓度的GFA(10-8～10-4mol·L-1)对基础状态或KCl预收缩的有无内皮的血管环的张力均无明显影响(P>0.05);对PE(10-6mol·L-1)预收缩内皮完整的血管有浓度依赖性舒张作用,而与PE预收缩的去内皮组相比,从10-7mol·L-1开始差异有显著性(P<0.01)。一氧化氮合酶抑制剂L-NAME、鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝及环氧合酶抑制剂吲哚美辛孵育后,均能明显抑制GFA的扩血管作用(P<0.01);经无钙液及GFA处理后,胸主动脉对PE的反应性降低(P<0.01)。结论 GFA对大鼠胸主动脉的舒张作用主要通过两种途径:内皮依赖性舒张作用的机制主要与NO-GC-cGMP途径及激活环氧合酶有关;非内皮依赖性舒张机制主要与抑制内钙释放有关,与门控钙通道引起的外钙内流无关。

关附甲素对豚鼠左心房肌的变力性作用

关附甲素（ＧＦＡ）８．０×１Ｏ（－７）～８．２×１０（－５）ｍｏｌ／Ｌ可浓度依赖性地降低豚鼠左心房肌的收缩力（Ｆｃ），但不能翻转正阶梯现象，对静息后增强（ＰＲＰ）则能明显减弱。普萘洛尔（Ｐｒｏ）５μｍｏｌ／Ｌ也有相似的作用，而在Ｐｒｏ阻断β受体的基础上，ＧＦＡ仍可进一步降低心房肌Ｆｃ的幅度和ＰＲＰ。维拉帕米（Ｖｅｒ）５μｍｏｌ／Ｌ则可翻转正阶梯为负阶梯，对ＰＲＰ无影响。结果提示，ＧＦＡ的负性肌力作用除了与抑制外钙流入细胞内有关外，还与减少细胞内钙的释放有关；与β受体无关，且无频率依赖性。Ｐ＜０．０５，＊Ｐ＜０．０１，ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｃｏｎｔｒｏｌｄａｔａ（１００％）２．２关附甲素、Ｐｒｏ和Ｖｅｒ对正阶梯现象和静息后增强效应的影响随着刺激频率的增加，左心房肌的Ｆｃ亦呈阶梯状增强，表现为正阶梯现象，而当刺激频率调回到０．５Ｈｚ时，Ｆｃ的幅度也恢复到起始值。给予ＧＦＡ（８．２，８２μｍｏｌ／Ｌ）２０ｍｉｎ后，重复上述过程，心房肌的Ｆｃ幅度被减弱，但Ｆｃ仍随刺激频率的增加而加大，不表现为负阶梯现象，ＰＲＰ则明显减小（图２Ａ，３）。Ｖｅｒ（５ｐｍｏｌ／Ｌ）作用１０ｍｉｎ后增加刺激频率，左心房肌的Ｆｃ幅度则随之?

关附甲素对心肌慢反应动作电位的影响

关附甲素（ＧＰＡ）８．６μｍｏｌ／Ｌ使缺Ｏ＿２、高Ｋ￣＋和酸中毒的豚鼠乳头肌动作电位幅值（ＡＰＡ）和最大除极速率（Ｖ＿（ｍａｘ））下降，ＡＰＤ＿９０显著缩短，ＥＲＰ／ＡＰＤ＿９０比值增大，ＧＦＡ２６μｍｏｌ／Ｌ可使高Ｋ￣＋除极所致的慢反应ＡＰＡ和Ｖ＿（ｍａｘ）降低，ＧＦＡ５０μｍｏｌ／Ｌ时使兔窦房结动作电位０相去极化速率（ＭＲＤ）、舒张期去极化速率（ＲＤＰ）和平均复极化速率（ＭＲＲ）降低，自发活动频率（ＳＦＦ）减慢，并使舒张期去极化时间（ＤＤＴ）及动作电位时程（ＡＰＤ）延长。

关附甲素的结构修饰

为寻找高效、低毒的抗心律失常新药,以关附甲素为先导物进行结构修饰,设计合成了6个化合物。初步药理实验结果表明,化合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅵ对乌头碱诱发大鼠心律失常具有明显的保护作用。

RP-HPLC法测定不同采收期黄花乌头中关附甲素的含量

采用 ＲＰ－ＨＰＬＣ方法对黄花乌头 Ａｃｏｎｉｔｕｍ ｃｏｒｅａｎｕｍ抗心律失常有效成分关附甲素（ｇｕａｎｆｕ ｂａｓｅ Ａ）的含量进行了测定。并对不同采收期黄花乌头的不同部位中关附甲素的含量进行比较．结果显示关附甲素在８月份采收的根中含量最高。实验采用Ｃ_１８柱，以乙腈－磷酸三乙胺缓冲液为流动相，检测波长２０８ｎｍ，以外标法定量，为合理有效地利用药物资源提供了参考。

盐酸关附甲素代谢产物关附壬素的药动学研究

目的建立测定盐酸关附壬素血药浓度的液相色谱-质谱联用分析方法(LCMS),并探讨其在大鼠体内的药动学。方法大鼠iv盐酸关附壬素20mg·kg-1后不同时间点采血,利用LCMS法测定血药浓度,并用3P87软件求算其药代动力学参数。结果盐酸关附壬素浓度在005~20mg·L-1范围内线性关系良好(r=09994)。绝对回收率大于80%,日内、日间RSD均小于15%。大鼠iv关附壬素20mg·kg-1后其主要动力学参数AUC、Vc、T1/2、CLs分别为1570mg·h-1·L-1、131L·kg-1、249h、146L·kg-1·h-1。排泄试验结果表明,给药24h后从尿中,胆汁中和粪便中排出的原形药物累计量相当于给药量的706%、91%、53%。结论该法具有专属性强,灵敏度高,可用于关附壬素的体内定量分析。

关附甲素治疗心房颤动的研究进展

心房颤动是临床上最常见的心律失常,严重威胁着人类的生存与健康。关附甲素是一种多离子通道阻滞剂的抗心律失常新药,目前针对该药进行的研究证实关附甲素可有效且安全地治疗心房颤动。现总结介绍该药治疗心房颤动的研究进展及应用前景。

盐酸关附甲素注射液Ⅰ期耐受性试验研究

研究人体对盐酸关附甲素注射液的耐受程度。正常健康受试者 2 7名 ,随机分为负荷量组及维持量组。负荷量Ⅰ组 :15例健康受试者 ,随机分为 5个剂量递增组 ,即 10 0 ,15 0 ,2 0 0 ,30 0 ,40 0mg/次 ,2 0min静脉注入。负荷量Ⅱ组 :8例健康受试者 ,随机分为 2个剂量递增组 ,即 2 0 0 ,30 0mg/次 ,5min静脉注入。维持量组 :4例健康受试者 ,随机分为 2组。先予以负荷量 2 0 0mg/次 ,以后分别用维持量 30 ,40 μg·kg-1·min-1持续静脉泵入 2 4h。观察用药前、用药中及用药后的各项指标变化。结果 :所试剂量范围内 ,耐受性良好。该药使心电图PR间期延长 ,且有剂量依赖的趋势 ,并有部分延缓室内传导的作用。结论 :根据前述剂量范围和使用方法 。

盐酸关附甲素对豚鼠和大鼠心肌细胞钾通道的阻断作用

目的用膜片钳全细胞记录法观察盐酸关附甲素(GFA)对分离的单个豚鼠心室肌细胞缓慢激活型延迟整流钾电流(IKs),大鼠内向整流钾电流(IK1)、瞬时外向钾电流(Ito)的影响。方法用急性酶解法分离获得单个豚鼠和大鼠心室肌细胞。用标准的全细胞膜片钳技术记录IKs、IK1、Ito离子通道电流,观察不同浓度的GFA对豚鼠心室肌细胞IKs,大鼠心室肌细胞IK1、Ito的影响。结果50,150,500μmol/LGFA使IKs尾电流(IKs,tail)最大峰值电流密度分别降低11.4%±3.32%、23.3%±7.36%、36.7%±4.99%,P<0.05;使IK1稳态电流密度分别降低5.1%±0.6%、7.5%±0.9%、7.2%±0.9%;50,500μmol/LGFA使Ito最大峰值电流密度分别降低6.1%±0.64%、8.6%±1.13%。结论GFA对IKs具有浓度依赖性阻滞作用,这可能是其延长动作电位时程而对静息电位影响不大的电生理基础,是其抗心律失常作用的机制之一。

关附甲素对单个心肌细胞钙通道和内向整流钾通道的阻断作用

用膜片钳全细胞记录法观察关附甲素（ＧＡ）对分离的单个豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙通道电流（ＩＣａ－Ｌ）和内向整流钾电流（Ｉｋ１）的影响。结果表明：ＧＡ抑制ＩＣａ－Ｌ：８，４０μＭＧＡ使ＩＣａ－Ｌ最大峰值从１０２０．８±１９７．３ｐＡ分别降至５２３．０±１０１．８和４２９．６±１２０．０ｐＡ（ｎ＝５，Ｐ均＜０．０１），抑制率分别为４８．８％和５７．９％，ＧＡ使ＩＣａ－Ｌ的电流－电压曲线上移，但不改变其激活、峰值和反转电位。ＧＡ对Ｉｋ１没有影响，不改变Ｉｋ１的电流－电压曲线形态，亦不改变细胞的静息膜电位。结果提示ＧＡ对Ｉｃａ－Ｌ的阻滞作用为其抗心律失常效应的离子基础之一。