基于16S rDNA序列分析骨质疏松大鼠肠道菌群结构变化及固本增骨方的调控机制

目的:通过16S rDNA序列分析探讨骨质疏松模型大鼠肠道菌群结构的多样性特征及固本增骨方作用的靶点菌种。方法:将48只Wistar雌性大鼠,随机分为造模组(40只)和空白对照组(8只),造模组采用去卵巢法复制骨质疏松模型,造模成功后随即分为模型对照组、戊酸雌二醇组、固本增骨方(高、中、低剂量)组,每组8只。固本增骨方高、中、低剂量组给予固本增骨方(9.2、4.6、2.3g/kg)灌胃,空白对照组和模型对照组以等剂量0.9%氯化钠溶液灌胃,戊酸雌二醇组按90μg/kg给予戊酸雌二醇灌胃,16周后收集大鼠粪便,提取并检测粪菌总DNA,16sRNA扩增子测序,对标本中的细菌16S rRNA V3-V4进行定性分析、OUT分析、16S功能基因预测分析。结果:与空白对照组比较,模型对照组大鼠肠道菌群的多样性增加;与模型对照组比较,戊酸雌二醇组和固本增骨方高、中、低浓度组可调节厚壁菌门、螺旋菌门及Candiadatus Soleaferrea的相对丰度;固本增骨方高剂量组在翻译、细胞壁的生物合成、细胞运动、复制和修复、能源生产与转化等功能方面显著性增高。结论:卵巢切除大鼠诱导骨质疏松模型中,肠道微生态失衡可能为绝经后骨质疏松症的发病机制之一;固本增骨方对肠道菌群具有调节作用,通过"健脾补肾"之效应机制发挥对PMOP的防治作用。

固本增骨方联合高压氧疗对骨质疏松症模型大鼠骨代谢平衡的影响

目的探讨固本增骨方联合高压氧疗对骨质疏松症骨代谢平衡的影响及可能机制。方法50只雌性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、高压氧组、固本增骨方组、联合组,每组10只。除空白组外,其余各组大鼠采用去卵巢法建立骨质疏松症大鼠模型。造模成功后空白组、模型组、高压氧组大鼠给予30ml/kg生理盐水灌胃,固本增骨方组及联合组给予固本增骨方混悬液4.6g/(kg·d)灌胃,高压氧组、联合组大鼠每天灌胃后进行高压氧治疗。干预12周后检测大鼠血清骨代谢标志物[包括骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、核结合因子α1(CBF-α1)、Ⅰ型胶原羧基末端肽(CTX-Ⅰ)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PⅠNP)、骨钙素(OC)]含量变化;显微CT影像观察大鼠股骨骨密度水平及骨小梁微结构;检测大鼠下丘脑和股骨组织中骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)蛋白和mRNA表达。结果与空白组比较,模型组大鼠骨密度及BALP、CBF-α1、CTX-Ⅰ、PⅠNP、OC含量、相对骨体积分数、骨小梁数量、骨小梁厚度、连接密度降低,骨小梁分离度、结构模型指数升高,下丘脑及股骨组织中OPG蛋白和mRNA表达下降、RANKL蛋白和mRNA表达升高(P<0.05)。与模型组比较,高压氧组、固本增骨方组和联合组大鼠各指标均显著改善(P<0.05);且固本增骨方组和联合组各指标改善优于高压氧组,联合组各指标改善优于固本增骨方组(P<0.01)。结论固本增骨方联合高压氧疗能够调节骨质疏松症模型大鼠骨代谢平衡,增加骨量,改善骨小梁微结构,其机制可能与调控OPG/RANKL信号通路有关。