基于WGCNA和动物实验探究骨坏死康复丸治疗激素性股骨头坏死的作用机制

目的探讨骨坏死康复丸治疗激素性股骨头坏死(Steroid-induced osteonecrosis of the femoral head,SONFH)的主要药理学基础和作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)等数据库对骨坏死康复丸的有效成分和靶点进行筛选。基于人类在线孟德尔遗传数据库(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)和GeneCards数据库筛选SONFH的靶点。采用加权基因共表达网络分析(Weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)对SONFH基因模块和枢纽基因进行鉴定。取三者的交集,获得骨坏死康复丸治疗SONFH的潜在靶点,并利用Cytoscape软件构建的“活性成分-靶点”网络筛选关键活性成分;然后,利用STRING数据库构建蛋白相互作用网络,筛选关键靶点。进行基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)信号通路富集分析,探索“关键活性成分-关键靶点-关键信号通路”之间的关系。最后,进行了关键活性成分与关键靶点的分子对接,并使用SONFH大鼠模型进行实验验证。结果得到骨坏死康复丸的146个化合物和相应的346个靶点,获得了4187个SONFH靶点。此外,基于WGCNA筛选出SONFH的12个基因模块和2556个枢纽基因,得到槲皮素、木犀草素和山柰酚是骨坏死康复丸治疗SONFH的关键活性成分,涉及PI3K/AKT等多条信号通路。分子对接显示关键活性成分与关键靶点之间存在较好的结合活性。动物实验结果证明骨坏死康复丸可通过上调AKT1、PI3K、RUNX2,下调Caspase-3和IL-6的表达改善骨生物学改变(P<0.01),验证了网络药理学部分预测结果。结论通过网络药理学和动物实验分析了骨坏死康复丸治疗SONFH的潜在作用机制,可为进一步研究其药理基础和靶点提供参考。

基于VEGF/PI3K/Akt通路基因表达探讨骨坏死康复丸对激素性股骨头坏死大鼠血管新生的影响

【目的】观察骨坏死康复丸对激素性股骨头坏死(SONFH)大鼠的治疗作用及机制。【方法】将60只大鼠随机分为空白组,模型组,仙灵骨葆胶囊组及骨坏死康复丸低、中、高剂量组,每组10只。除空白组,其他各组大鼠采用脂多糖联合糖皮质激素诱导法建立SONFH模型。干预结束后,分别进行股骨头的血管造影观察骨髓内微血管变化、苏木素-伊红(HE)染色并计算空骨陷窝率、Micro-CT扫描分析、压缩实验,采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测全血磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)1、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)基因表达。【结果】与空白组比较,模型组股骨头髓腔内血供差,空骨陷窝率增加(P<0.05),骨密度、骨体积分数显著降低(P<0.05),股骨头最大载荷及弹性模量降低(P<0.05),全血Akt1、PI3K、VEGF、CD31 mRNA表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,骨坏死康复丸高剂量组和仙灵骨葆胶囊组股骨头髓腔内血供较好,空骨陷窝率减少(P<0.05),骨密度、骨体积分数、骨小梁数量、骨小梁厚度显著升高(P<0.05)及骨小梁分离度显著减小(P<0.05),股骨头最大载荷及弹性模量升高(P<0.05),全血Akt1、PI3K、VEGF、CD31 mRNA表达水平升高(P<0.05);骨坏死康复丸高剂量组上述各指标与仙灵骨葆胶囊组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。【结论】骨坏死康复丸可改善大鼠激素性股骨头坏死,其机制与促进VEGF/PI3K/Akt通路基因表达,进而促进血管新生有关。

骨坏死康复丸治疗股骨头坏死肝肾亏虚证的临床研究

目的 探讨骨坏死康复丸治疗股骨头坏死肝肾亏虚证的临床疗效。方法 将纳入的80例股骨头坏死肝肾亏虚证患者随机分为试验组和对照组各40例,试验组口服骨坏死康复丸,对照组口服仙灵骨葆胶囊,疗程均为3个月。结果 试验组总有效率高于对照组,差异具有统计学意义,P <0.05。2组均有效降低中医证候积分,改善Harris髋关节评分和疼痛VAS评分,增加周围静脉血中BMP-2、VEGF含量。经统计学分析,试验组均优于对照组P <0.05,且均未见不良反应。结论 骨坏死康复丸治疗股骨头坏死肝肾亏虚证疗效显著,可以有效改善髋关节功能、缓解疼痛,并能增加血液中BMP-2和VEGF含量。

骨坏死康复丸治疗股骨头坏死(肝肾亏虚证)临床研究

目的观察骨坏死康复丸在治疗股骨头坏死(肝肾亏虚证)中的疗效及安全性。方法选取2016年1—12月确诊的132例肝肾亏虚证股骨头坏死病人为研究对象,按照随机数字表法均分为试验组和对照组,每组66例,对照组给予仙灵骨葆胶囊治疗,试验组给予骨坏死康复丸治疗,6个月后对2组患者的髋关节Harris评分及功能评分进行对比。结果治疗6个月后,试验组Harris评分平均为(83. 56±10. 25),对照组平均为(65. 35±11. 36),2组对比差异具有统计学意义(P <0. 05);治疗后试验组66例患者中显效数为16例(24. 2%),有效数为30例(45. 5%),无效20例(30. 3%),总有效率为69. 7%;对照组治疗显效数为10例(15. 2%),有效数为30例(45. 5%),无效26例(39. 4%),总有效率为60. 6%,2组治疗有效率对比差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论骨坏死康复丸治疗股骨头坏死临床疗效较好,未发现明显不良反应,值得进行推广。