贵州白香猪γ干扰素基因的克隆与序列分析

为获得贵州白香猪γ干扰素基因,以提取的经刀豆蛋白A诱导培养的贵州白香猪外周血淋巴细胞总RNA为模板,扩增全长猪γ干扰素基因,并克隆至pMD18-T Simple载体后测序分析。结果表明,pIFN-γ基因全长501bp,可编码166个氨基酸,其中前23位氨基酸为信号肽序列;pIFN-γ含有2个潜在N-糖基化位点;贵州白香猪与国内地方猪种之间pIFN-γ基因差异不大,具有很近的亲缘关系,其中与藏猪、成华猪、枫径猪、梅山猪的同源性达100%,而与内江猪的亲缘关系相对较远,与荣昌猪(DQ902588)亲缘最远。

贵州白香猪与3种杂交猪脏器系数及血液生理指标比较

试验对贵州白香猪及贵州白香猪与大约克猪、杜洛克猪、长白猪3种杂交猪的体重、脏器系数和血液生理指标进行了比较。结果显示,贵州白香猪体重极显著低于3种杂交猪(P<0.01);贵州白香猪的脏器指标除心脏外与3种杂交猪均存在差异;贵州白香猪红细胞总数(RBC)和红细胞压积(HCT)极显著高于大约克猪×香猪(YX)(P<0.01);贵州白香猪的平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、白细胞中淋巴细胞数量(LYM)、白细胞中淋巴细胞比率(LYM,%)及白细胞中中性粒细胞比率(GRA,%)与长白猪×香猪(LX)间存在显著差异(P<0.05)。

贵州白香猪的白细胞介素2基因的克隆及其序列分析

为获得贵州白香猪白细胞介素2基因,以提取的经刀豆蛋白A诱导培养的贵州白香猪外周血淋巴细胞总RNA为模板,扩增全长猪白细胞介素2(IL-2)基因,并克隆至pMD18-T Simple载体后测序。结果表明:贵州白香猪IL-2基因ORF长为465bp,可编码154个氨基酸,其中前20个氨基酸为信号肽,后134个氨基酸为成熟肽,具有一个潜在的N-糖基化位点;贵州白香猪除与FJ543109(99.4%)、Neijiang(98.7%)、JN851821(98.7%)、AB194099(98.5%)氨基酸一致性相对较低外,与其他猪源IL-2的一致性均为100%,而与其他种属动物的IL-2基因氨基酸一致性则较低,为11.9%～75%。

敌百虫中毒对贵州白香猪氧化应激及自由基损伤的影响

为探讨急性敌百虫中毒对贵州白香猪氧化应激和自由基损伤的影响,为贵州白香猪有机磷农药中毒诊断和治疗提供参考数据,采用兽用敌百虫对贵州白香猪进行经口急性毒性试验,观察试验猪临床中毒症状并用分光光度法检测其肝、脾、肺、肾等组织的乙酰胆碱酯酶(AchE)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、胆碱酯酶(CHE)活力及VC、VE水平。结果表明:中毒贵州白香猪体内存在严重氧化应激及自由基损伤;与对照相比,染毒处理试验猪的肝、脾、肺、肾中的AchE、CHE活力及VC、VE含量均呈下降趋势,SOD和POD活力则有所提高,说明,有机磷中毒导致乙酰胆碱酯酶活力受抑制,体内自由基反应加剧。

贵州白香猪群体遗传结构的微卫星分析

采用27对微卫星标记对贵州大学香猪育种场F11、F12世代贵州白香猪的2个品系进行遗传结构分析。试验结果显示,F11世代贵州白香猪Ⅰ、Ⅱ系的平均有效等位基因、平均期望杂合度、平均多态信息含量和平均近交系数分别为1.9281、1.8189,0.4582、0.4221,0.3664、0.3348和0.5418、0.5779;F12世代贵州白香猪Ⅰ、Ⅱ系的有效等位基因、平均杂合度、平均多态信息含量和平均近交系数分别为1.8289、1.7100,0.4315、0.3868,0.3430、0.3063和0.5685、0.6132。结果表明,经过多个世代的近交繁育,贵州白香猪群体的基因多态性低,近交程度高,已成为一个稳定的遗传群体。

贵州白香猪IL-2、IL-4和IL-6基因的克隆及生物信息学分析

为研究和挖掘贵州地方特色猪种贵州白香猪的遗传种质资源,本实验克隆了该猪种的白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-6基因,并对其相关遗传信息进行了分析。克隆测序结果表明,IL-2、IL-4和IL-6的ORF大小分别465 bp、402 bp和639 bp,其与猫、牛、狗、马、人、猴、鼠、兔、羊的推导氨基酸的序列相似性分别为57.8%~74.7%、47.8%~87.6%和45.3%~76.4%,与已报道的其它猪种的推导氨基酸的序列相似性均在98%以上。不同猪种间,除IL-4推导氨基酸序列完全相同外,IL-2的差异主要出现在第2位,第87位以及第125位,IL-6则仅出现在第30位和第69位。推导蛋白质特性分析结果表明IL-2、IL-4和IL-6大小分别为17 401.2 Ku、15 022.6 Ku、23 880.5 Ku,均系亲水性蛋白质,信号肽长度分别为20、24、25个氨基酸残基,分别含有27、26和35个磷酸化位点,仅IL-6在7~26位氨基酸之间含有一个跨膜螺旋区。不同猪种间,尽管上述白细胞介素在推导氨基酸水平均存在一定差异,但这些差异并未引起其预测模型空间结构改变,表明其在功能上具有高度保守性。