贵州蜜环菌资源的分子标记与遗传多样性分析

【目的】探明蜜环菌菌株间的遗传差异,为蜜环菌的优良资源筛选及后续研究奠定基础。【方法】收集19份贵州省天麻主产区毕节市的蜜环菌资源,筛选对贵州蜜环菌基因组DNA进行有效扩增的引物,通过生物信息学分析各蜜环菌菌株间的遗传多样性。【结果】从3对引物中筛选出对蜜环菌基因组DNA进行有效扩增的引物2对。19株蜜环菌以2#引物扩增的序列,碱基片段长度为574-667 bp,GC含量为51.79%-54.27%,A含量和T含量分别为25.21%-22.15%和22.01%-24.62%;以3#引物扩增的序列,碱基片段长度为828-925 bp,GC含量为43.01%-45.00%,A含量和T含量分别为23.82%-33.57%和23.62%-33.06%。通过序列比对、GC含量分析与聚类分析发现,贵州天麻主产区毕节市野生蜜环菌资源大部分为Armillaria gallica,少部分为Armillaria mellea。2对引物扩增所得序列的聚类结果有区别,但表现出与环境关系不密切。【结论】贵州天麻主产区各蜜环菌菌株间有一定的遗传差异,以Armillaria gallica居多。

贵州天麻遗传多态性的ISSR初步分析

目的:构建贵州天麻ISSR指纹图谱,分析彼此间的遗传关系。方法:采用ISSR分子标记技术对贵州省境内的23个野生和栽培天麻居群的样品进行了初步研究,从24个ISSR引物中筛选出4个有效引物,在供试的23个样品中共检测到32个位点,其中29个表现出多态性,占总带数的90.63%,平均每个引物扩增的DNA带数为8条。天麻的多态位点百分率(PPB)在80%和100%之间。用NTSYSpc,ver.2.02软件进行UPGMA聚类分析。结果:23个居群的相似性系数在0.13-1.00之间,同一变型的天麻样品并不严格聚为一类,不同变型天麻样品之间的遗传变异较大。结论:地理分布和生长环境的差异以及人为的选择是导致天麻形成丰富的遗传多态性的一个重要的原因。

贵州乌天麻的营养成分分析

为了解贵州乌天麻的食用营养价值和开发贵州特色食品资源,采用常规分析法分析贵州乌天麻的营养成分。结果表明：乌天麻的营养成分为蛋白质含量5.8-6.8g/100g、粗纤维素含量12.3-17.6g/100g、淀粉含量26.1-31.1g/100g、天麻素含量0.21%-0.23%、粗脂肪含量1.9g/100g,氨基酸总量4.05-4.14g/100g,其中,必须氨基酸占氨基酸总量的44.93%;乌天麻含有丰富的微量元素,其中Ca为389.00-401.00mg/kg,Fe为79.99-137.68mg/kg,Zn为20.01-21.31mg/kg,乌天麻中VC和VB2含量较高,分别为3.84-9.97g/100g和0.14-0.18mg/kg,结果显示贵州乌天麻有较高的营养价值。

紫外光谱估测贵州天麻中的天麻素

采用高效液相色谱法和紫外光谱法测定名贵中药材贵州天麻样品中天麻素的含量,选择在最大吸收波长223nm处,分析天麻素含量与紫外光谱的吸光度数值之间的相关性。采用先聚类后回归的分析法进一步估测天麻中天麻素的含量。结果表明:在223nm处,天麻素含量与紫外光谱的吸光度数值呈显著相关,其相关系数均达到0.98以上。对回归模型进行检验,预测值与实测值吻合。这表明紫外光谱法可为系统评价贵州天麻等级提供理论依据和相关技术手段。

贵州8种树材对天麻蜜环菌生长的影响

为寻找更多适合天麻生产上培养蜜环菌的树材,选取桉树、天竺桂和女贞等8种贵州常见树材的枝或干作菌材接种蜜环菌,观察培养蜜环菌在生长过程中的接菌时间、色泽变化、顶端分生能力、菌索直径及其密集程度等,并对各菌材所培育出的蜜环菌菌索进行HPLC指纹图谱比较分析。结果表明:8种树材10d左右均可长出蜜环菌菌索,其色泽基本一致,幼嫩时呈黄白色或浅黄色,成熟后呈棕色,老化之前尖端都有白色的生长点,老化后呈黄褐色、深褐色或黑褐色,菌索顶端分生组织在老化前分裂能力较强;8种树材中,马尾松作为蜜环菌菌种接种菌材的菌索直径最大,天竺桂菌材最小;菌索数量,滇鼠刺菌材最多,天竺桂菌材最少;马尾松易腐烂、虫蛀。不同菌材培养的蜜环菌菌索的HPLC指纹图谱有一定的差异。8种树材中,滇鼠刺、女贞和天竺桂较适合作为培育蜜环菌的菌材。

贵州省天麻产业技术专利的计量分析

为相关部门全面了解天麻产业开发现状,进一步提升贵州省科技创新对天麻产业发展的支撑能力,采用文献计量学方法,从专利申请的类型、趋势、区域、申请人、技术领域及主要机构等方面对全国及贵州省天麻产业技术专利申请状况进行分析。结果表明:1989—2016年贵州省天麻专利申请量为102件,占全国申请量的14.80%。贵州省天麻外观设计专利和实用新型专利申请量占比较高,较全国分别提高17.38%和2.11%,发明专利申请占比低,较全国降低19.49%。其中,贵州省天麻产业的发明专利申请以天麻资源及种植领域、天麻药品领域的申请量居多,分别为22件(39.92%)和13件(23.21%)。

贵州省不同产地天麻中重金属及农药残留分析

目的:测定和分析贵州不同产地天麻药材中As、Hg、Pb、Cd、Cu含量和有机氯农药残留量,为其质量控制和临床安全用药提供理论依据。方法:选取贵州省不同地区21批次天麻药材采用石墨炉原子吸收法测定铅、镉的含量,采用火焰原子吸收法测定铜的含量,采用原子荧光光度法测定汞、砷含量,采用气相色谱法测定药材中六六六、滴滴涕等9种有机氯农药残留量。结果:有2批次样品Cu、Cd超标,Pb、As、Hg及有机氯农药残留均未超过国家标准有关规定,另19批次天麻药材所有指标均未超标。结论:黔产天麻重金属及有害元素和农药残留情况较理想,本实验所建立的检测方法准确、灵敏,为黔产天麻药材的质量控制标准提供了理论依据。

德江县仿野生天麻种植现状调查分析

为促进德江县及类似生产区实现天麻种植产业的区域特色经济跨越式发展提供理论参考,采用实地走访、文献调研等方法对德江县城区及其辖区乡镇仿野生天麻种植情况进行调查。结果表明:德江天麻仿野生种植品种主要为红天麻、乌天麻和黄天麻;主要采用春、夏、冬连续滚动种植模式,春冬栽以无性繁殖技术扩大规模,生产商品麻;夏栽以有性繁殖技术培育麻种。德江县仿野生天麻种植存在种植技术应用及推广力度不够、资金不足及资金利用效益低、市场对接及产品研发创新活力不足等问题。建议从提升“两菌一种”的规模和质量、夯实产业持续发展基础及推进示范园区建设等方面提升仿野生栽培天麻产业的发展。

贵州省天麻种植的生态适宜度区划研究

[目的]对贵州省道地药材天麻的生态适宜性进行评价,为产地中药资源合理种植提供参考。[方法]基于高程数据、气象栅格数据、土壤质地数据、土壤类型数据、土壤侵蚀数据、土地利用数据等,从地形适宜度、气候适宜度、土壤适宜度和土地利用适宜度4个方面,考察贵州省天麻的种植生态适宜性,借助空间分析技术将影响天麻生长的各类因素综合,获得贵州天麻种植的生态适宜性区划。[结果]黔西北是天麻种植生态适宜度的高度集中区,黔东北地区种植潜力也较大,但目前开发尚不充分,具有很大的发展潜力。[结论]贵州生态条件适合天麻药材产业发展,空间分析方法是一种有效的中药材种植区划方法。