贵州小型香猪与人五种CYP酶活性的比较

目的对比测定贵州小型香猪与人肝微粒体细胞色素CYP酶的五个主要亚型的活性,并对二者活性相似的亚型以特异性抑制剂进行抑制,观察抑制活性反应的相似性,比较二者的CYP酶特性,评估贵州小型香猪作为人体外药物代谢动力学研究实验动物模型的可行性及其可应用的药物代谢反应类型。方法制备贵州小型香猪和人的肝微粒体,构建肝微粒体和探针底物的反应体系以及抑制剂抑制反应的体系,利用HPLC测定CYP3A,CYP1A,CYP2A,CYP2D和CYP2E酶的探针底物与肝微粒体反应的活性,并对贵州小型香猪和人的相应活性值进行比较,选择活性最为相近的亚型进行特异性抑制。结果贵州小型香猪肝微粒体具有CYP酶的五个主要亚型的反应活性,其中CYP3A酶的两个特异反应即硝苯地平氧化反应,睾酮6β-羟化反应的活性值和人肝的相应活性接近。同时,二者的CYP3A酶的特异性抑制反应相似。结论贵州小型香猪适用于作为人的CYP3A酶及其相关药物代谢研究的良好动物模型。鉴于CYP3A酶是人体内Ⅰ相反应最主要的药物代谢酶,因此贵州小型香猪作为人体药代动物模型具有一定前景。

脂蛋白脂酶活化剂No-1886对抗脂毒性葡萄糖毒性及对贵州小香猪胰岛细胞的保护作用

目的 探讨合成化合物No 1 886调节糖、脂代谢的作用机制及对贵州小香猪胰岛结构和功能的影响。方法 3- 4月龄贵州小香猪 1 5只 ,随机选取 5只饲以基础饲料为正常对照组 ;5只饲以高脂高糖饲料为糖尿病对照组 ;5只前 3个月饲以高脂高糖饲料 ,后 5个月饲以高脂高糖饲料加 1 0 %No 1 886为糖尿病治疗组。分别在 0、2、3、4、5、6、8个月末时从禁食过夜的猪眶静脉窦取血样 ,测定血浆葡萄糖、甘油三酯和血清胰岛素浓度。第 8个月末 ,处死动物 ,每只动物取胰腺 1小块 ,1 0 %中性甲醛液固定 ,常规石蜡包埋切片 ,HE染色。另一部分胰腺切片用猪胰岛素抗体作免疫组化染色 ,显微观察照相 ,并用图像分析软件IMAGEJ测量胰岛 β细胞在胰岛中所占的面积。另取 1小块胰腺 ,4℃ ,2 5 %戊二醛固定 ,常规透射电镜样品制备 ,透射电镜下观察并照相。结果 糖尿病对照组和糖尿病治疗组 (加药前 )出现高血糖、高甘油三酯 ,胰岛素水平亦升高 ,正常对照组血糖、甘油三酯、胰岛素未见明显升高。两组比较差异具有显著性意义 (P <0 0 5 ) ;与糖尿病对照组比较 ,糖尿病治疗组加药后血糖、甘油三酯、胰岛素水平降低。从胰腺显微和超微结构观察及 β细胞免疫染色结果看 ,高糖高脂饲料对贵州小香猪胰腺组织结构。

贵州小香猪颈总动脉球囊损伤致动脉粥样硬化血管重构

目的 研究球囊损伤引起动脉粥样硬化血管重构及其机制。方法 采用贵州小香猪 10头 ,均用球囊损伤右侧颈总动脉内膜 ,喂饲正常饮食 (n =5 )或高脂饮食 (n =5 ) 12个月。血管样本分为四组 :正常对照组、拉伤对照组、高脂组和高脂拉伤组。采用计算机图像分析系统测定血管重构的相关指标 ,观察血管组织的病理变化 ,并检测血管组织生化指标的变化。结果 除正常对照组外 ,其余三组均出现内膜增厚及病理性血管重构 ,尤以高脂拉伤组的变化最为显著。其最大内膜厚度及内膜面积分别由 0增大到 1.2 0± 0 .0 7mm和 2 .0 9± 0 .10mm2 (P <0 .0 1) ;而外弹力膜围绕面积由 15 .2 1± 0 .4 2mm2 减少到 9.94± 0 .32mm2 ,内弹力膜围绕面积由 11.38± 0 .2 2mm2减少到 6 .14± 0 .16mm2 ,管腔最小直径由 3.6 4± 0 .10mm2 减少到 1.5 0± 0 .0 5mm2 (P <0 .0 1) ,管腔面积减少达6 4 % ;血管紧张素Ⅱ、内皮素 1和白细胞介素 6也均显著增高 ,分别为正常对照组的 3.4、4 .5和 3.2倍 (P <0 .0 1)。结论 单纯内膜损伤及高脂血症均可引起或 (和 )加速血管重构 ,血管紧张素Ⅱ、内皮素、一氧化氮、白细胞介素

高脂高蔗糖饲料诱导贵州小香猪发生糖尿病和动脉粥样硬化病变

用贵州小香猪建立一种新的 2型糖尿病合并动脉粥样硬化模型 ,探讨高脂高蔗糖饲料对糖、脂代谢的影响。采用高脂高蔗糖饲料饲喂贵州小香猪 ,观察其体重、血糖、胰岛素和血脂的变化 ,并对胰岛 β细胞功能、脂质在主动脉和肝脏组织沉积进行研究。结果发现 ,喂养 8个月后 ,与正常对照组比较 :实验组空腹血糖值明显升高 ,血清总胆固醇、甘油三酯水平升高 ,脂肪细胞肥大 ,胰岛 β细胞受损 ,主动脉出现脂纹 ,内膜增厚 ,肝脂肪样变性。以上结果说明 ,高脂高蔗糖饲料可诱导贵州小香猪发生胰岛素抵抗、糖尿病和动脉粥样硬化 ,此模型适用于糖尿病并发脂代谢紊乱和动脉粥样硬化及其治疗的研究。

贵州小型猪和广西巴马小型猪部分血液生化指标筛查

目的对现有小型猪种群进行筛查,期望发现可遗传性疾病,并进而开展遗传选育研究。方法未去势的广西巴马小型猪60头(♂21,♀39)和贵州小型猪50头(♂7,♀43),前腔静脉采血、检测13项血液生化指标。以超出(x±2s)范围为异常值,并对异常值进行重复检测和分析。结果共获得了血清生化指标异常个体42头,其中,贵州小型猪19头,广西巴马小型猪23头。经复测和分析,选择37号和103号猪,分别作为动脉粥样硬化抗性和易感性选育种猪。结论经血清生化指标筛查和统计分析,获得2头动脉粥样硬化抗性和易感性选育候选种猪。

No-1886对实验性糖尿病小型猪血糖、血脂异常和肝脏病变的保护作用观察

目的 探讨合成化合物No 1886是否降低高糖高脂饲料诱发的糖尿病贵州小型猪的血浆葡萄糖、自由脂肪酸浓度和改善肝脏病变。方法 3～ 4月龄贵州小型猪 15只 (♂ 8只、♀ 7只 ) ,随机选取 5只饲以基础饲料为A组 (正常对照组 ) ;5只饲以高糖高脂饲料为B组 (糖尿病对照组 ) ;5只前 3个月饲以高糖高脂饲料 ,后 5个月饲以高糖高脂饲料加 1.0 %No 1886为C组 (糖尿病治疗组 ) ,分别在 0、2、3、4、5、6、8个月时从禁食过夜的猪眶静脉窦取血样测定葡萄糖、自由脂肪酸 ,第 8个月末 ,处死动物 ,取肝脏 1小块 ,10 %甲醛液固定 ,常规石蜡包埋切片 ,分别作HE和肝糖原染色以及油红O染色 ,光学显微镜下观察并照相。结果 糖尿病对照组和糖尿病治疗组加药前出现高血糖、高自由脂肪酸 ,并随着喂养时间的延长而逐渐升高。正常对照组血糖、自由脂肪酸未见明显升高 ,两组对比差异具有显著意义 (P <0 .0 5 ) ,与糖尿病对照组比较 ,糖尿病治疗组血糖、自由脂肪酸明显降低。从肝脏病理切片观察所见 ,糖尿病对照组肝脏肝细胞索排列紊乱 ,中央静脉扩张 ,肝细胞脂肪变性明显 ,具大量脂肪空泡 ,并有局灶溶解性坏死 ,淋巴细胞浸润 ,肝糖原极少或消失 ,油红O染色显示细胞内有较多脂滴。而糖尿病治疗组未见明显脂肪空泡变性 。

NO-1886对过氧化体增殖物激活型受体、脂蛋白脂肪酶和肿瘤坏死因子α基因表达的影响

为了探讨脂蛋白脂肪酶活化剂NO 1886对高脂高糖饮食喂养贵州小香猪过氧化物体增殖物激活型受体、脂蛋白脂肪酶及肿瘤坏死因子α表达的影响 ,选择雄性贵州小香猪 15头 ,随机分为 3组。正常对照组喂普通饲料 ;高脂高糖组喂高脂高蔗糖饲料 ;治疗组喂高脂高蔗糖饲料 4个月后加 1%NO 1886治疗。 8个月后处死动物 ,采用Trizol提取组织总RNA ,逆转录聚合酶链反应检测过氧化体增殖物激活型受体、脂蛋白脂肪酶及肿瘤坏死因子αmRNA的表达。结果发现 ,正常对照组肌肉组织和肝脏过氧化体增殖物激活型受体α的表达较低。高脂高糖组肌肉组织和肝脏过氧化体增殖物激活型受体α的表达增强 ,NO 1886使高脂高糖喂养增强肌肉组织和肝脏过氧化体增殖物激活型受体α表达的作用减弱 ;在脂肪组织 ,治疗组脂蛋白脂肪酶的表达水平最高 ,分别比正常对照组和高脂高糖组高 2 7%和 2 0 % ;NO 1886抑制高脂高糖喂养小香猪脂肪组织肿瘤坏死因子α的表达。结果提示 ,NO 1886能促进小香猪脂肪组织脂蛋白脂肪酶的表达 ,显著抑制脂肪组织肿瘤坏死因子α基因表达 ,高调脂肪组织过氧化体增殖物激活型受体γ ,减弱肝脏和肌肉过氧化体增殖物激活型受体α的表达 ,是NO 1886有效降低血浆游离脂肪酸和肿瘤坏死因子α水平可能的机制。

贵州小型猪牙槽嵴裂动物模型的建立

目的采用外科手术方法建立贵州小型猪牙槽嵴裂动物模型,为牙槽嵴裂的相关治疗提供实验基础。方法贵州小型猪20只。设计唇腭侧两个"L"型黏骨膜瓣,去除自第一乳侧切牙近中至乳尖牙近中约8 mm×9 mm骨质;将唇腭侧黏膜覆盖骨创面严密缝合。术后通过大体观察、X线、组织学检查评价实验结果。结果术后观察10周,所有实验动物所形成的牙槽嵴裂裂隙保持良好,无自愈;软组织愈合良好。结论利用贵州小型猪建立的人工牙槽嵴裂动物模型方法可靠,稳定性好。

四个品种小型猪血液学指标测定及比较

目的分析比较四个品种小型猪的血液学生物学特性。方法分别选取上海地区饲养的巴马小型猪、贵州小型猪和版纳小型猪及陆川小型猪，每个品种雌雄各20头，3-6月龄，测量其血液生理、血清生化与血凝指标，然后进行单因素方差分析，并进行数据比较。结果四个品种的小型猪血液生理14个指标差异有统计学意义（P〈0．05），血清生化12个指标组问差异有统计学意义（P〈0．05），血凝4个指标差异都有统计学意义（P〈0．05）。分别对各品种群体数据进行比较分析，巴马小型猪群体雌雄间血液常规、血清生化和血凝指标差异显著（P〈0．05）的指标分别有6项、4项和3项，而贵州小型猪、版纳小型猪和陆川小型猪雌雄间差异指标较少或差异不显著。四品种小型猪相同性别间比较，也有较多指标差异显著。结论测定和比较的巴马小型猪、贵州小型猪、版纳小型猪和陆川小型猪在血液学、血清生化和血凝等方面数据，为应用和选择小型猪开展相关生物医学和药物研究提供了基础数据。

三品种实验用小型猪繁殖性能测定

目的选取饲养于上海地区的巴马小型猪、贵州小型猪和版纳小型猪,分别测定三品种母猪和公猪的繁殖性能。方法采用场内结合实验室测定的方法,分别测定初情年龄、初配年龄等母猪繁殖性能指标及性行为年龄、初配年龄等公猪繁殖性能指标。结果用单因素方差分析比较。结果对比巴马小型猪、贵州小型猪和版纳小型猪的母猪繁殖性能10个指标,贵州小型猪和版纳小型猪的初生窝重和断奶成活率存在显著差异(P<0.05)。分析三品种的公猪繁殖性能,群体间性行为年龄存在显著差异(P<0.05);三品种初配年龄比较接近;比较初配年龄和初配体质量,表明三品种的小型猪在相同初配年龄时,巴马小型猪个体偏小,版纳小型猪的体质量最大。结论系统测定了雌性和雄性巴马小型猪、贵州小型猪和版纳小型猪的繁殖性能,为实验用小型猪提供了遗传育种工作的基础,也为小型猪实验动物化提供了背景数据。