光照对贵州黄鸡ONECUT 1基因在不同产蛋期各组织中表达的影响

【目的】分析光照对蛋鸡不同组织和不同产蛋时期ONECUT1基因的差异表达,探讨该基因对鸡产蛋性能的影响,为深入开展光照对鸡繁殖性能分子机理的研究奠定基础。【方法】选取贵州黄鸡体重相近的10周龄母鸡216只,在半舍饲养殖条件下(舍饲+运动场)随机分为自然光照组和早晚各增光1 h组,140日龄、200日龄、480日龄屠宰各4只,采集垂体、下丘脑、视网膜、输卵管和卵巢等组织,利用qRT-PCR技术检测ONECUT1基因的差异表达。【结果】ONECUT1基因在肌肉组织中表达量最高,输卵管、卵巢次之,肝脏最低。在垂体、下丘脑和卵巢组织中,ONECUT 1基因在产蛋高峰期(200日龄)的表达量显著高于开产日期(140日龄)和产蛋后期(480日龄)。垂体组织中200日龄的增光组显著高于自然光照组,输卵管中140日龄的自然光照组显著低于增光组。【结论】ONECUT1基因的表达具有时空特性,并受光照调节,与鸡产蛋性能有关。

蚯蚓抗菌肽对贵州黄鸡生产性能的影响研究

为了考察蚯蚓抗菌肽对贵州黄鸡生产性能的影响,试验采用单因素试验设计,共设4个抗菌肽添加水平,分别是0%、0.6%、0.8%和1.0%。选用0日龄健康贵州黄鸡120只,根据体重随机分为4组,分别为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组分别设3个重复,每个重复10只鸡。试验期21 d。试验结果表明:日粮中添加抗菌肽对贵州黄鸡的采食量无显著影响(P>0.05),但显著提高日均增重(P<0.05),降低料重比(P<0.05),降低发病率和死亡率(P<0.05),以添加1%水平的蚯蚓抗菌肽效果为佳。

贵州黄鸡血清的同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE(Polyacrylimade gel electrophoresis)技术分析了260份贵州黄鸡血清中淀粉酶(Amylase,E.C.3,2,1,1)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,E.C.3,1,3,1)、酯酶(Esterase,E.C.3,1,1,1)同工酶的遗传多态性。结果表明:贵州黄鸡血清中这三种同工酶均呈现复杂的遗传多态现象,并报导了有关位点的等位基因频率。

威宁鸡与贵州黄鸡血清酯酶-1的多态性比较研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对贵州优良地方鸡种威宁鸡48份血清蛋白的酯酶(ES-1)位点电泳图谱的检测,并与贵州黄鸡相应位点的比较研究发现:威宁鸡的酯酶-1呈现明显的多态现象。两个品种的ES-1A频率都很低。

赤水乌骨鸡MC1R基因多态性及其生物信息学分析

采用DNA混池及PCR产物直接测序技术,对赤水乌骨鸡、泰和乌鸡、兴义白鸡、兴义白鸡F2代、贵州黄快羽鸡、贵州黄慢羽鸡、罗曼蛋鸡和瑶山鸡8个鸡种群MC1R基因外显子区域进行多态性分析。结果显示:瑶山鸡与红色原鸡序列一致,无SNPs,赤水乌骨鸡的4个SNPs分别为G23A(Arg→His)、C69T、T212C、G274A,泰和乌鸡的8个SNPs分别为C69T、T212C、G274A、T398C(Leu→Pro)、G636A、T637C、A644C(His→Pro)、C834T,贵州黄快、慢羽鸡和兴义白鸡均有3个SNPs,分别为A427G(Thr→Ala)、G636A、T637C,罗曼蛋鸡的4个SNPs分别为T398A(Leu→Gln)、G636A、T637C、C834T,兴义白鸡F2代的4个SNPs分别为C69T、T212C、G274A、A644C(His→Thr);生物信息学分析发现,除G274A、T398C、T398A、A644C位点的稳定性增加外,其余位点的稳定性均有所降低;除G274A、T398C、T637C、A644C位点的整体多样性有所下降外,其余位点的均有所增加;除泰和乌鸡MC1R基因编码蛋白为不稳定蛋白外,其余种群的均属于稳定蛋白,且包括泰和乌鸡在内的7个鸡群MC1R基因编码蛋白均为疏水性蛋白和非分泌蛋白;赤水乌骨鸡、泰和乌鸡、兴义白鸡、兴义白鸡F2代和罗曼蛋鸡的MC1R蛋白三级结构均由α-螺旋、β-转角、无规则卷曲组成。

0~6周龄贵州黄鸡能量需要的研究

本试验研究了0~6周龄贵州黄鸡的能量需要,旨在为贵州黄鸡的科学养殖和制定其饲养标准提供理论依据和数据参考。采用单因素完全随机试验设计,选取健康1日龄贵州黄鸡雏鸡400只,随机分为4组,每组5个重复,每个重复20只鸡。4组试验鸡饲粮能量水平分别为10.03、11.71、12.54和13.16 MJ/kg,试验期为6周。通过饲养试验,测定每周的体重和采食量,计算平均日增重、平均日采食量和料重比;通过代谢试验,测定表观代谢能及养分表观代谢率;通过比较屠宰试验,测定鸡体能量、粗蛋白质和粗脂肪含量,计算鸡体能量、粗蛋白质和粗脂肪沉积率,确定饲粮适宜能量水平。结果显示:饲粮能量水平对0~6周龄贵州黄鸡的平均日增重、平均日采食量和料重比均有显著影响(P<0.05),对平均日增重进行二元回归分析得到最适饲粮能量水平为11.17 MJ/kg。饲粮能量水平对0~6周龄贵州黄鸡的各养分表观代谢率均有显著影响(P<0.05),适当提高饲粮能量水平可以提高各养分的表观代谢率,进而提高饲料利用率。以此为判定指标,推荐0~6周龄贵州黄鸡饲粮能量水平为12.54 MJ/kg。饲粮能量水平对0~6周龄贵州黄鸡的能量、粗脂肪以及粗蛋白质的摄入量和沉积率均有显著影响(P<0.05)。适宜的饲粮能量水平会提高三大养分的沉积率,以此为评定指标,推荐0~6周龄贵州黄鸡饲粮能量水平为12.54 MJ/kg。通过回归分析建立的0~6周龄贵州黄鸡的能量需要预测模型为AME G=377.70+1.6069NE G(R 2=0.7591,式中AME G为增重表观代谢能,NE G为增重净能),得出每千克代谢体重的维持表观代谢能需要量为377.70 kJ,其增重表观代谢能的增重净能转化率为62.23%。

高、低肌内脂肪含量的贵州黄鸡的肉品质研究

试验旨在比较高、低肌内脂肪(IMF)含量的贵州黄鸡的屠宰性能、肉品质、肌纤维特性以及脂肪酸含量的差异。选取相同饲养环境的雌性贵州黄鸡30只,于120日龄屠宰,测定其肌内脂肪含量、屠宰性能、肉品质、脂肪酸及肌纤维特性,根据其IMF含量分为高IMF组和低IMF组(IMFH组和IMFL组)。结果显示:IMFL组鸡的腹脂率极显著高于IMFH组(P<0.01),胸肌剪切力极显著高于IMFH组(P<0.01)。IMFH组与IMFL组鸡的胸肌中共检出23种脂肪酸,IMFL组鸡不饱和脂肪酸含量显著高于IMFH组(P<0.05),亚油酸和花生三烯酸含量显著低于IMFH组(P<0.05),花生四烯酸含量极显著高于IMFH组(P<0.01)。IMFL组鸡胸肌的肌纤维直径极显著高于IMFH组(P<0.01),肌纤维密度极显著低于IMFH组(P<0.01)。研究表明,贵州黄鸡的肌内脂肪含量高,肉品质较好,饱和脂肪酸含量丰富,肌纤维致密,肉质营养丰富和口感极佳。

0~6周龄贵州黄鸡赖氨酸需要量的研究

为探究饲粮中不同赖氨酸水平对贵州黄鸡0~6周龄生长性能的影响,选取1日龄贵州黄鸡雏鸡400羽,随机分为4个组,每个组设5个重复,每个重复20羽,分别采食赖氨酸水平为0.7%、0.9%、1.1%和1.3%的饲粮,并记录体重和采食量。结果显示:0~6周龄,0.9%组平均日增重(ADG)显著高于0.7%、1.3%组(P<0.05),但与1.1%组差异不显著(P>0.05);0.9%组平均日采食量(ADFI)显著高于1.3%组(P<0.05),与0.7%、1.1%组差异不显著(P>0.05);0.9%组料重比(F/G)最低,显著低于0.7%组(P<0.05),但与1.1%、1.3%组差异不显著(P>0.05)。通过回归分析,分别建立赖氨酸与体重、ADG和ADFI的二次曲线回归方程,方程分别为y=-214.81+1460.41x-745.37x^(3),y=-7.84+39.05x-19.98x^(3),y=-4.22+64.41x-34.62x^(3),基于6周龄体重、0~6周龄ADG及0~6周龄ADFI,贵州黄鸡0~6周龄赖氨酸的适宜水平分别为0.98%、0.98%、0.93%。提示:推荐贵州黄鸡0~6周龄赖氨酸的适宜需要量为0.93%~0.98%。

贵州兴义矮脚鸡黄、黑羽品群外貌特征及部分生产性能的比较

对相同条件下饲养的同龄成年贵州兴义矮脚鸡黄、黑羽两品群部分生产性能指标进行测定,结果表明黄羽品群成年公鸡平均体重为1801.67g,母鸡为1443.91g,黑羽品群成年公鸡平均体重为1780.83g,母鸡为1524.81g;产蛋率黄羽品群为55.0%,黑羽品群为47.3%,经t检验,二者差异极显著(P<0.01);授精率黄羽品群为94.59%,黑羽品群为81.96%;孵化率黄羽品群为86.86%,黑羽品群为70%。

贵州黄鸡慢羽系生长曲线拟合研究

试验旨在揭示贵州黄鸡慢羽系生长发育规律。选择100只贵州黄鸡慢羽系(公母鸡各50只),于0、2、4、6、8、10、12、14周龄末称重,分别采用Bertalanffy、Logistic、Gompertz3种非线性生长曲线模型对贵州黄鸡慢羽系0~14周龄体重变化进行拟合分析。结果表明:3种模型均能很好地拟合其生长曲线,拟合度均在0.99以上,其中Logistic模型在贵州黄鸡慢羽系公鸡、母鸡生长曲线中拟合最好,拟合结果最接近实测体重情况,其公鸡拐点体重为1550.81g,拐点周龄为10.42,母鸡拐点体重为976.67g,拐点周龄为9.14。试验结果初步揭示了贵州黄鸡慢羽系的生长发育规律和各阶段的生长特征,为贵州黄鸡慢羽系选育生产和产业化发展提供了科学依据。

基于转录组测序技术研究饲粮赖氨酸水平调控贵州黄鸡采食量的差异表达基因和信号通路

本试验旨在利用转录组测序(RNA-Seq)技术研究饲粮赖氨酸(Lys)水平调控贵州黄鸡采食量的分子机制,挖掘与采食量相关的候选基因和信号通路,进一步提高家禽采食量以及促进养殖效益。选取健康的1日龄贵州黄鸡雏鸡400羽,随机分为4组,每组5个重复,每个重复20羽。各组饲粮Lys水平分别为0.7%、0.9%、1.1%和1.3%。试验期6周。在6周龄时,选取平均日采食量差异极显著(P<0.01)的0.9%Lys水平组(b组,n=3)和1.3%Lys水平组(d组,n=3)中的贵州黄鸡各3只,采集下丘脑组织进行RNA-Seq分析、差异表达基因GO功能富集和KEGG信号通路分析,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证RNA-Seq测序数据。结果表明:1)0.7%、0.9%、1.1%Lys水平组1~6周龄平均日采食量极显著高于1.3%Lys水平组(P <0.01),其中,0.9%Lys水平组最高。2)每个样品所产的测序读数比对到鸡参考基因组上比对率均在89%以上,Q20、Q30含量分别在97%、93%以上;b组和d组共筛选到2 006个差异表达基因,其中,1 275个基因表达上调,731个基因表达下调。GO功能主要在调节神经过程、投射神经元形态发生、负调控神经发生等生物学过程极显著富集;KEGG通路显著富集到19条通路,富集到磷脂酰肌醇信号系统、叉头框转录因子O信号传导途径、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、神经活性配体-受体相互作用信号通路和脂肪细胞因子信号通路6条通路可能影响贵州黄鸡的采食量。筛选到神经肽Y (NPY)、前阿黑皮素原(POMC)、刺鼠相关蛋白(AgRP)、可卡因和安非他明调控转录前肽(CARTPT)富集到神经活性配体-受体相互作用信号通路和脂肪细胞因子信号通路上。qRT-PCR结果显示6个随机选择的差异表达基因的表达趋势与RNA-Seq结果一致。综上所述,0.7%、0.9%、1.1%赖氨酸水平组1~6周龄平均日采食量极显著高于1.3%赖氨酸水平组。不同水平赖氨酸可能通过调控下丘脑组织NPY、AgRP、CARTPT和POMC等相关基因的表达,作用于神经活性配体-受体相互作用通路和脂肪细胞因子信号通路,以此来调控贵州黄鸡的采食量。

贵州黄鸡蛋品质测定和相关性分析

为研究贵州黄鸡的蛋品质及各指标之间的相关性,随机抽取44周龄贵州黄鸡新鲜种蛋60枚,按照国家规定的方法,在24 h内测定相关指标。结果:贵州黄鸡平均蛋重为(52.74±5.33) g,蛋形指数1.36±0.10,蛋壳厚度(0.35±0.05) mm,蛋黄重(17.55±1.66) g,蛋黄颜色9.26±0.73,蛋白高度(4.72±1.13) mm,哈氏单位平均68.43±4.29。相关性分析表明:蛋壳强度与哈氏单位、蛋壳厚度呈显著正相关(P<0.05);蛋黄重与蛋重呈极显著正相关(P<0.01),与蛋黄比例和蛋壳厚度呈显著正相关(P<0.05);蛋重与蛋黄比例呈极显著负相关(P<0.01),与蛋白高度呈显著正相关(P<0.05);蛋白高度与哈氏单位呈极显著正相关(P<0.01);其他性状间无显著相关性(P>0.05)。

鸡TRAF6和TIFA基因克隆及其组织表达特征分析

【目的】分析肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)及具有叉头相关结构域的TRAF相互作用蛋白(TIFA)基因在贵州黄鸡不同发育阶段各组织中的表达特点,为后续开展TRAF6和TIFA基因调控鸡的生长发育及二者相互作用调控鸡相关病毒复制打下基础。【方法】利用RT-PCR扩增鸡TRAF6和TIFA基因编码区(CDS)序列,通过ProtParam、SOPMA、SWISS-MODEL及MegAlign等在线软件进行生物信息学分析;同时采用实时荧光定量PCR分别检测TRAF6和TIFA基因在鸡胚发育第14 d(E14d)、鸡出壳第1 d(H1d)、第7 d(H7d)和第14 d(H14d)不同组织中的表达情况。【结果】鸡TRAF6和TIFA基因CDS序列全长分别为1638和564 bp,编码545和187个氨基酸残基,对应的编码蛋白分子量约62和22 kD,理论等电点(p I)为6.14和5.18。鸡TRAF6蛋白二级结构中无规则卷曲占47.08%、α-螺旋占38.14%、延伸链占11.86%、β-转角占2.92%,鸡TIFA蛋白二级结构中无规则卷曲占51.87%、α-螺旋占27.81%、延伸链占16.58%、β-转角占3.74%,二者均以无规则卷曲和α-螺旋为主。TRAF6和TIFA基因核苷酸序列同源比对分析均显示鸡与火鸡的相似性最高,分别为96.4%和92.2%,符合物种进化规律,也表明TRAF6和TIFA基因在禽类中具有一定的遗传保守性。TRAF6和TIFA基因在贵州黄鸡不同发育阶段的眼球、脑组织、心脏、肝脏、肺脏、肌胃、胸肌及腿肌中均有不同程度表达,且内脏组织的相对表达量普遍高于肌肉组织,以肺脏中的相对表达量最高,其次是肝脏和肌胃;从E14d发育到H14d,鸡TRAF6和TIFA基因在肺脏、肝脏和肌胃中的表达均呈先下降后上升的变化趋势,在眼球中则呈先上升后下降再上升的变化趋势,在脑组织、胸肌和腿肌的表达水平较低且趋于稳定。【结论】TRAF6和TIFA基因在鸡不同发育阶段各组织中均有表达,且以肺脏和肝脏中的表达水平相对较高,在脑组织、胸肌和腿肌中的表达相对较低,故推测TRAF6和TIFA基因相互作用对鸡的生长发育具有调控作用。

不同慢羽型鸡翼生长规律和体重发育规律的研究

为研究慢羽性状在不同鸡品种间是否有差异,选择出壳雏鸡200只,采用羽速鉴定的方法将其分为快羽型组、等长型慢羽组、倒长型慢羽组和微长型慢羽组4个组,每周测量主翼羽、覆主翼羽、尾羽、体重并进行统计分析。结果显示:21~28日龄,等长型慢羽鸡的主翼羽长度显著长于微长型(P<0.05);14日龄等长型慢羽鸡在覆主翼羽长度上显著长于快羽型、倒长型、微长型(P<0.05),49日龄微长型慢羽鸡覆主翼羽长度显著长于倒长型(P<0.05);28~42日龄,快羽型、倒长型慢羽鸡的尾羽长度显著长于微长型(P<0.05)。结果表明:贵州黄鸡不同慢羽型的主翼羽生长速度比覆主翼羽和尾羽快,鸡翼和体重在开始生长发育后都呈直线增长趋势。