外翻肠囊法考察复合红花籽油的肠吸收特性

该研究旨在初步考察复合红花籽油的肠吸收特性。采用外翻肠囊法对其肠吸收部位、时间、给药浓度进行研究,通过气相色谱-质谱法(GC-MS)测定肠收集液中亚油酸(Linoleic Acid,LA)及α-亚麻酸(α-Linolenic Acid,ALA)含量,通过计算吸收转运参数、吸收速率参数分析其肠道转运机制。不同肠段中,其主要成分LA与ALA均能在十二指肠(LA:2.71 mg;ALA:1.60 mg)与空肠(LA:1.89 mg;ALA:1.43 mg)中被检出,通过计算不同部位透过药量(M)、药物吸收转化率(A)和药物剩余百分数(R),结果显示十二指肠段中LA、ALA的M高于空肠段,A与空肠段接近,R低于空肠段,因此十二指肠为最佳吸收肠段。在120 min时,LA和ALA的Pappi(瞬时表观渗透系数)皆高于其他时间点,因此最佳吸收转运时间为120 min。在给药倍数为2.0倍时,肠囊液中的LA和ALA浓度最高,分别为0.35、0.19 mg/mL,因此最佳给药浓度为200 mg/mL。结果表明复合红花籽油的肠吸收特性可能为具有时间与浓度依赖性的被动运输模式且在十二指肠段中单向转运。

柴胡总皂苷的大鼠体内代谢特征谱研究

目的研究柴胡总皂苷在大鼠体内的代谢情况,分析其发挥药效的关键成分。方法首先基于UPLC-MS/MS技术,建立柴胡总皂苷提取物化学成分特征谱,对其总体皂苷类成分进行鉴定分析;进一步采用离体外翻肠囊、肝门静脉取血和腹主动脉取血的方法,比较大鼠肠吸收成分、肠代谢的入血成分和肝代谢的血中成分的化学成分特征谱,筛选柴胡皂苷类成分体内发挥药效的关键成分。结果本研究共鉴定出柴胡总皂苷提取物中52种柴胡皂苷类成分,其中只能通过肠道直接吸收入血的成分有16种,只能通过肠道菌群和肝脏代谢的成分有3种,既能直接通过肠道吸收入血又能通过肠道菌群代谢和肝代谢而吸收的成分有3种;通过比较3个代谢特征谱发现,乙酰柴胡皂苷E、柴胡皂苷元A、柴胡皂苷元G、柴胡皂苷A、柴胡皂苷B_(2)、柴胡皂苷元C可能是柴胡皂苷类成分体内发挥药效的关键成分。结论通过柴胡总皂苷提取物在离体外翻肠囊法、肝门静脉取血和腹主动脉取血的化学成分特征谱分析,初步探讨了柴胡皂苷发挥药效的关键成分,为深入研究柴胡皂苷类成分药效物质提供新的依据。

左旋紫草素肠道转运及Caco-2细胞转运特性

目的研究左旋紫草素肠道及Caco-2细胞转运特征及其机制。方法应用翻转肠囊法和Caco-2细胞模型考察时间、浓度对左旋紫草素转运吸收特性的影响,应用P-糖蛋白抑制剂维拉帕米对左旋紫草素转运吸收机制进行研究,采用HPLC法测定左旋紫草素的浓度,计算其表观渗透系数(Papp)。结果在Caco-2细胞模型,随浓度增加和时间延长,左旋紫草素的累积转运量逐渐增加;加用维拉帕米后,使AP侧到BL侧的表观渗透系数Papp(AP→BL)显著增加,而从BL侧到AP侧的表观渗透系数Papp(BL→AP)显著降低。在翻转肠囊模型,100μmol·L-1左旋紫草素中加入维拉帕米后Papp显著增加。结论左旋紫草素的转运存在被动转运和主动转运2种形式,P糖蛋白参与主动转运过程;该药经肠道吸收中等,加入维拉帕米可能促进吸收。

戊己丸提取物不同配伍的肠外翻吸收研究

目的研究戊己丸不同配伍比例时在肠道中的吸收动力学的变化,说明方剂配伍的规律性。方法利用L9(34)正交设计,将黄连、制吴茱萸、土炒白芍组成不同配伍的9个组方,通过体外肠外翻模型和LC-MS分析手段,观察方中代表成分小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、芍药苷的吸收变化情况。结果以各代表成分的Ka为指标,通过正交分析,得出同一成分在肠道不同部位的吸收趋势大致相同,但不同成分之间的吸收趋势变化较大。多指标归一加权综合评分法分析表明,黄连在各肠段吸收贡献度最大,确定了其君药地位,制吴茱萸和土炒白芍次之,为臣药。在各个肠段的最优配比组合(黄连∶制吴茱萸∶土炒白芍)为:空肠12∶6∶12,回肠12∶6∶6与12∶6∶12,结肠12∶6∶12。结论戊己丸各代表成分在肠道中吸收动力学过程,随方剂的配伍比例不同而变化,其在肠道吸收的最优配伍组合为黄连∶制吴茱萸∶土炒白芍=6∶3∶6。

采用外翻肠囊法研究嘌呤在梅花鹿小肠中的代谢

活体取梅花鹿的十二指肠、空肠、回肠肠段,采用外翻肠囊法对各肠段进行离体培养,研究梅花鹿小肠对嘌呤的吸收和代谢。结果表明:嘌呤在小肠内可被氧化成次黄嘌呤、黄嘌呤、尿酸以及尿囊素,其中次黄嘌呤比例最高;空肠后段和回肠是小肠吸收嘌呤的主要部位;嘌呤衍生物排出途径以肠道排出为主。

复方龙脉宁磷脂复合物制备工艺及初步吸收评价

目的制备复方龙脉宁磷脂复合物并进行口服十二指肠体外吸收评价。方法以复合率为评价指标,结合前期试验结果,采用正交法优选复方龙脉宁磷脂复合物的影响因素,包括药物浓度、复合时间、复合温度和药脂比;分别制备复方龙脉宁提取物与磷脂复合物,对二者采取外翻肠囊法测定改性前后在十二指肠段的吸收情况。结果确定了以乙醇作为反应溶剂,提取物与大豆卵磷脂比例为1∶3,提取物的投料浓度为80 mg/mL,在40℃条件下复合12 h为最佳复合条件;采用磷脂复合物技术制备的复方龙脉宁磷脂复合物肠吸收较提取物显著增加。结论磷脂复合物技术对于复方龙脉宁口服生物利用度的提高具有一定的适用性。

格列吡嗪小肠吸收机制的研究

目的对格列吡嗪在大鼠小肠中的吸收机制进行研究。方法采用外翻肠囊法研究格列吡嗪在大鼠小肠中的吸收特征。结果离体肠吸收实验结果表明,格列吡嗪在大鼠的十二指肠、空肠、回肠和结肠4个肠段均有吸收,但在空肠中吸收最多;在高浓度和低浓度时,格列吡嗪累积吸收-时间曲线均呈线性,表明格列吡嗪在各肠段的吸收机制为被动扩散;增溶剂的加入可在一定程度上提高格列吡嗪的吸收;肠营养液的pH值小于格列吡嗪的pKa值时,格列吡嗪在溶液中多以分子型存在,分子型药物在小肠中易被吸收。结论格列吡嗪在大鼠的空肠段吸收为主,吸收机制为被动扩散,增溶剂的加入,提高了格列吡嗪在肠黏膜的通透性。

紫草素微乳改善大鼠小肠吸收的研究

目的:研究紫草素微乳(Skn-ME)对紫草素(Skn)实验性小肠吸收的改善作用。方法:采用大鼠单向灌流模型和离体外翻肠囊模型,紫外分光光度法测定肠灌流液中紫草素的浓度变化,研究紫草素微乳在大鼠小肠的吸收部位和吸收动力学特征。结果:大鼠在体小肠吸收实验中,紫草素微乳可被大鼠全肠段吸收,在十二指肠、空肠回肠及结肠各肠段的药物吸收速率常数(Ka)分别是0.213 4,0.221 8,0.217 6,0.221 1 min-1;药物表观吸收系数(Papp)分别是0.035 69,0.036 37,0.036 32,0.037 27 cm.min-1,结肠段吸收最好(P<0.001)。在15～60 mg.L-1内,紫草素微乳在小肠的Ka不具有显著性差异。离体小肠吸收实验中,紫草素微乳吸收量和吸收率较紫草素提高106.1%,肠壁通透性增加123.02%。在15～60 mg.L-1内,吸收符合Fick’s扩散定律,表现出一级动力学过程。结论:紫草素微乳通过提高肠壁通透性一定程度地改善其吸收,在小肠的吸收主要以被动扩散方式吸收。

异甘草素微乳改善大鼠小肠吸收的研究

目的研究异甘草素微乳(Iso-ME)对异甘草素(Iso)实验性小肠吸收的改善作用。方法采用大鼠单向灌流模型和离体外翻肠囊模型研究异甘草素微乳在大鼠小肠的吸收行为。结果大鼠在体小肠吸收实验中,异甘草素微乳可被大鼠全肠段吸收,在各肠段的Ka及Papp均高于异甘草素;各肠段Ka、Papp是结肠>回肠>十二指肠>空肠,结肠吸收最好(P<0.01)。在4～16μg.mL-1内,异甘草素微乳在小肠的Ka不具有显著性差异。离体小肠吸收实验中,异甘草素微乳吸收量和吸收率较异甘草素分别提高34.45%和78.98%,肠壁通透性增加38.30%。在4～16μg.mL-1内,吸收符合Fick's扩散定律,表现出一级动力学过程。结论异甘草素微乳通过提高肠壁通透性一定程度地改善其吸收,在小肠的吸收主要以被动扩散方式吸收。

新旧工艺仙灵骨葆胶囊中补骨脂大鼠肠吸收特性对比研究

目的:研究新型仙灵骨葆胶囊中补骨脂有效成分补骨脂素和异补骨脂素的大鼠肠吸收特性,并与仙灵骨葆胶囊肠吸收结果进行对比。方法:采用大鼠离体非翻转肠囊法,以HPLC对补骨脂素和异补骨脂素进行检测,研究吸收部位和药物浓度对补骨脂素和异补骨脂素肠吸收的影响。结果:补骨脂素和异补骨脂素在十二指肠的吸收略好于空肠和回肠;低浓度和中浓度胶囊内容物中补骨脂素、异补骨脂素Ka无显著性差异,但高浓度内容物Ka显著减小(P<0.05)。结论:胶囊内容物溶出速度可能影响补骨脂素和异补骨脂素的肠吸收;新工艺仙灵骨葆胶囊中补骨脂素和异补骨脂素的肠吸收均明显好于原工艺,表明新工艺仙灵骨葆胶囊中补骨脂有效成分更易吸收。

外翻肠囊法研究氧化苦参碱磷脂复合物的肠吸收特性

目的通过对比研究氧化苦参碱及其磷脂复合物大鼠离体肠吸收情况,考察磷脂复合物对氧化苦参碱肠吸收的影响。方法采用大鼠离体外翻肠囊模型研究氧化苦参碱磷脂复合物的肠吸收特性。HPLC测定不同剂量的氧化苦参碱及氧化苦参碱磷脂复合物在大鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠内的累积吸收量。结果氧化苦参碱磷脂复合物在不同肠段的吸收较氧化苦参碱均有提高,低剂量组氧化苦参碱磷脂复合物在空肠、结肠处的吸收较氧化苦参碱有显著提高;中剂量组氧化苦参碱磷脂复合物在十二指肠、空肠、结肠处的累积吸收量较氧化苦参碱有显著提高;高剂量组氧化苦参碱磷脂复合物在空肠的吸收较氧化苦参碱有显著提高。结论与氧化苦参碱相比,磷脂复合物对氧化苦参碱在大鼠肠道的吸收有显著的促进作用。

新旧工艺仙灵骨葆胶囊中淫羊藿大鼠肠吸收特性对比研究

目的:研究新型仙灵骨葆胶囊中淫羊藿有效成分朝藿定C和淫羊藿苷的大鼠肠吸收特性,并与仙灵骨葆胶囊肠吸收结果进行对比。方法:采用大鼠离体非翻转肠囊法,以HPLC对朝藿定C和淫羊藿苷进行检测,研究吸收部位和药物浓度对朝藿定C和淫羊藿苷肠吸收的影响。结果:朝藿定C在十二指肠的吸收优于空肠和回肠,且有统计学意义(P<0.05);淫羊藿苷在空肠的吸收低于十二指肠和回肠,且有统计学意义(P<0.05)。高、中、低3个浓度胶囊内容物中朝藿定C和淫羊藿苷的Ka无显著性差异,朝藿定C高、中、低3个浓度的Ka分别为0.0400,.058,0.061 h-1,淫羊藿苷高、中、低3个浓度的Ka分别为0.002,0.0070,.003 h-1。结论:朝藿定C和淫羊藿苷的肠吸收不受浓度影响。新工艺仙灵骨葆胶囊中朝藿定C和淫羊藿苷的肠吸收均好于旧工艺。

豆豉纤溶酶纳米脂质体的肠吸收效率研究

采用外翻肠囊法和大鼠在体单向灌注法,以肠吸收速率(Ka)和表观渗透系数(Papp)为指标,考察豆豉纤溶酶纳米脂质体的小肠吸收部位及效率。结果显示,由外翻肠囊法测得豆豉纤溶酶纳米脂质体的回肠段Ka和Papp分别为3.25×10-2μg/s和2.355×10-6cm/s,且吸收速率随着浓度的升高而降低,最终出现饱饮现象。由大鼠在体单向灌注法测得的Ka和Papp分别为(1.49±0.22×10-3)μg/s和(7.90±1.46)×10-5cm/s。上述两种方法均表现出豆豉纤溶酶纳米脂质体在回肠的吸收效率为最高,这可能与回肠中大量存在Peyer’s淋巴结有关,而Peyer’s淋巴结中存在的M细胞可能导致饱饮现象。

不同配比白芍、桂枝多组分大鼠肠渗透特性及其相互影响

目的考察白芍、桂枝及其不同配伍比例水煎液中的成分在大鼠体外的肠吸收特性及其可能存在的相互作用。方法采用大鼠外翻肠囊法结合HPLC指纹图谱定性、定量考察肠渗透前后各化学成分的变化以及白芍桂枝不同配比的相互影响。结果桂枝各成分大多吸收良好(Papp>1×10-5 cm·s-1),组分间渗透前后的相对比例基本未变;白芍中以芍药苷为代表的亲水性成分吸收较好(Papp>1×10-6 cm·s-1),但成分随保留时间延长渗透变差;配伍前后二者各成分的渗透未发生明显的变化。结论除白芍部分亲脂性成分外,桂枝与白芍中大多成分肠道吸收较好,二者配伍对各成分的吸收影响不大。

基于外翻肠囊法的补锌制剂生物利用率研究

使用30日龄商品代AA肉仔鸡回肠构建外翻肠囊模型,用硫酸锌制剂培养肠囊组织,验证肠囊有效性及确定肠囊培养时间为20 min。根据所选取的时间灌注不同补锌制剂,培养结束时取肠囊中的培养液,测量其酚红浓度矫正浆膜液终体积。用原子吸收光谱仪测量培养液中的Zn浓度,根据公式计算出不同补Zn制剂在肉仔鸡回肠中的吸收率。试验结果表明,各补锌制剂灌注肠囊20 min的吸收效率:甘草锌组>葡萄糖酸锌组>氨基酸螯合锌组>钙铁锌组>硫酸锌组,表明甘草锌颗粒制剂中锌元素的生物利用率最高,在肉仔鸡回肠中具有较好的吸收效果。

制何首乌中主要药效/毒效成分的生物药剂学分类系统评价研究

目的对制何首乌5种主要药效/毒效成分没食子酸、大黄素、二苯乙烯苷、大黄素甲醚和大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷进行生物药剂学分类系统(BCS)研究。方法分别采用平衡溶解度法和外翻肠囊法研究各代表成分的溶解度和渗透性,采用2种软件Pipeline Pilot 7.5和ChemDraw 7.0预测各成分的溶解性和渗透性参数,采用美国食品药物管理局(FDA)标准分别对代表成分实测值与预测值进行经典BCS分类研究,同时评估其相关性。结果初步判定制何首乌中大黄素、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷及大黄素甲醚为BCSIV类药物;二苯乙烯苷和没食子酸属于BCSⅢ类成分,渗透性是其吸收过程中主要限制因素。蒽醌类化合物的BCS分类研究存在差异,软件预测存在假阳性。结论采用体外生物利用度快速评价方法对制何首乌中5种主要药效/毒效成分进行BCS分类研究,为中药体内吸收预测和体外安全性评价提供研究思路和实验范例。

大鼠外翻肠囊法考察对乙酰氨基酚的渗透性

目的采用大鼠外翻肠囊模型,考察对乙酰氨基酚的渗透性。方法以大鼠外翻肠囊为模型,用HPLC法测定对乙酰氨基酚在不同肠段的透过量(Q),计算吸收速率常数(Ka)和表观渗透系数(P_(app)),评价对乙酰氨基酚在不同肠段的渗透性。结果所有组别的P_(app)值均大于高渗模型药物的P_(app)值,且不同肠段、不同给药浓度的Papp测定结果均无显著性差异。结论高、中、低浓度对乙酰氨基酚的渗透性无显著性差异;且不同肠段的渗透性无显著性差异;对乙酰氨基酚在大鼠外翻肠囊模型上表现为高渗透性。

外翻肠囊法测定盐酸二甲双胍在大鼠不同肠段的吸收

目的采用大鼠外翻肠囊(EGS)模型,考察盐酸二甲双胍在大鼠不同肠段的渗透性。方法以大鼠EGS模型分别取得盐酸二甲双胍在大鼠十二指肠、空肠、回肠的6个时间点的肠囊内样品;用HPLC法测定样品中的盐酸二甲双胍浓度,计算每个时间点的累计透过量。使用线性模型拟合药物渗透过程,计算药物在各个肠段的表观渗透系数(Papp)。结果对不同肠段的Papp值(n=6)两两进行t检验,结果Papp值无显著性差异。结论盐酸二甲双胍在大鼠的不同肠段间的渗透性无显著性差异。

利巴韦林肠道渗透性的研究

目的研究抗病毒药物利巴韦林的肠道渗透性。方法采用外翻肠囊法和Caco-2单层细胞模型,收集利巴韦林给药后不同时间点的肠囊液及Transwell小池基底端的接收液,用高效液相色谱仪进行检测,计算药物的表观渗透系数(Papp);并以高渗透性药物酒石酸美托洛尔为模型药物,用相同的方法测定其渗透性,以此为参照,对利巴韦林的渗透性进行分析。结果外翻肠囊实验结果显示:利巴韦林的药物浓度对其Papp无影响,为被动转运,且药物的吸收无明显的肠段特异性,利巴韦林在肠道的Papp低于酒石酸美托洛尔。Caco-2单层细胞模型实验结果显示:利巴韦林的Papp值也低于酒石酸美托洛尔。结论采用外翻肠囊法和Caco-2单层细胞模型测得利巴韦林的肠道渗透性低于酒石酸美托洛尔。

使药石菖蒲对定志小丸中人参皂苷类成分肠吸收的影响

目的:探究使药石菖蒲对定志小丸中人参皂苷成分肠吸收的影响,从肠吸收角度揭示石菖蒲"佐使则有功"的科学内涵。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定大鼠样品中人参皂苷Rg1,Re,Rb1的浓度;通过大鼠在体肠灌流试验比较不同配伍方式下定志小丸中3种人参皂苷类成分肠吸收速率常数(Ka)与表观通透系数(Papp)的差异;通过大鼠外翻肠囊试验考察不同剂量石菖蒲挥发油及P-糖蛋白(P-gp)抑制剂维拉帕米对3种人参皂苷类成分累积吸收量的影响。结果:缺失石菖蒲条件下定志小丸中3种人参皂苷类成分的Papp均≤0. 191×10-3cm·min-1。与缺石菖蒲组相比,缺石菖蒲挥发油组的Ka和Papp无显著性差异,但定志小丸全方组的Ka提高了3. 97～8. 35倍,Papp提高了3. 99～8. 49倍;外翻肠囊研究表明定志小丸中石菖蒲挥发油能显著促进3种人参皂苷类成分在大鼠肠道的累积吸收量,但没有剂量依赖性。结论:石菖蒲挥发油可明显促进定志小丸中3种人参皂苷类成分的肠吸收,其促吸收机制可能与抑制P-gp有关。