骨炎消巴布剂对膝骨关节炎家兔软骨细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

目的:研究骨炎消巴布剂对膝骨关节炎(KOA)家兔的疗效并探究其相关分子机制。方法:50只家兔随机分为正常组、模型组、巴布剂基质组、奇正消痛贴组、骨炎消巴布剂组,每组10只。除正常组外,其余各组膝关节注射碘乙酸钠制备兔KOA模型,2周造模成功后,模型组不做任何处理,其余各组分别给予巴布剂基质、奇正消痛贴、骨炎消巴布剂外敷。治疗6周后,HE染色观察各组家兔膝关节软骨组织病理变化,TUNEL染色观察各组家兔膝骨关节中软骨细胞凋亡情况,ELISA检测各组家兔滑膜液中IL-1β、IL-6、IL-17、IL-18和TNF-α的分泌水平,实时荧光定量PCR及Western blot检测软骨组织中Bcl-2和Bax mRNA及蛋白表达水平。结果:与正常组相比,模型组软骨组织结构紊乱,大量炎症细胞渗出,巴布剂基质组各层分界不清,细胞排列稍紊乱,细胞出现增生,模型组和巴布剂基质组软骨细胞凋亡率显著升高(P<0.01),滑膜液中IL-1β、IL-6、IL-17、IL-18和TNF-α水平均显著升高(P<0.01),软骨组织Bcl-2 mRNA与蛋白表达显著降低(P<0.01),Bax mRNA及蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组相比,骨炎消巴布剂组和奇正消痛贴组软骨细胞形态较规则,胞核呈椭圆形,染色分布均匀,骨炎消巴布剂组和奇正消骨痛贴组软骨细胞凋亡率显著降低(P<0.01),滑膜液中IL-1β、IL-6、IL-17、IL-18和TNF-α表达水平显著下降(P<0.01),软骨组织Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平显著上调(P<0.01),Bax mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:骨炎消巴布剂可抑制炎症因子分泌,促进Bcl-2表达,降低Bax水平,抑制软骨细胞凋亡,保护软骨细胞,进而延缓KOA的病情进展。

骨炎消巴布剂对小鼠镇痛作用的实验研究

目的探讨骨炎消巴布剂对小鼠的镇痛作用。方法采用热板法建立小鼠疼痛模型,观察骨炎消巴布剂的镇痛作用。结果骨炎消巴布剂对小鼠热板所致的疼痛反应有明显的镇痛作用,骨炎消巴布剂高、中剂量组疗效显著优于对照组(P<0.05)。结论骨炎消巴布剂对小鼠疼痛具有镇痛作用。

骨炎消巴布剂对小鼠抗炎作用实验研究

目的:研究骨炎消巴布剂对小鼠的抗炎作用。方法:采用二甲苯制作小鼠耳廓肿胀实验模型,观察骨炎消巴布剂的抗炎作用。结果:骨炎消巴布剂对小鼠耳廓肿胀有明显的抗炎作用,骨炎消巴布剂中剂量组与赋形剂对照组比较,有显著性差异(P<0.05),表明巴布剂的中剂量可明显对抗二甲苯所致的炎症反应。结论:骨炎消巴布剂对小鼠耳廓肿胀具有抗炎作用。

正交试验优化骨炎消巴布剂的基质处方

目的:优选骨炎消巴布剂的基质配方。方法:采用正交设计,选取聚丙烯酸钠(NP-700),羧甲基纤维素钠(CMC-Na),丙三醇和二氧化钛的用量为考察因素,以初黏力、持黏力、综合感官的综合评分为指标,优化骨炎消巴布剂的基质处方。结果:优选的基质处方为NP-700 3 g,CMC-Na 0.6 g,丙三醇16 g,二氧化钛0.8 g。结论:按优选的基质处方制得的骨炎消巴布剂外观、黏附性良好。

基于PI3K/AKT信号通路探讨骨炎消巴布剂对膝骨性关节炎兔模型的作用机制

目的研究骨炎消巴布剂对膝关节骨关节炎(KOA)PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平的影响。方法正常组不作处理,其余组采用膝关节注射碘乙酸钠建立KOA家兔模型,造模成功后随机分为模型组、巴布剂基质组、奇正消痛贴组、骨炎消巴布剂组。模型组不给药,其余组分别给予巴布剂基质、奇正消痛贴、骨炎消巴布剂外敷,连续给药6周。HE染色观察各组家兔膝关节滑膜组织病理变化,免疫组化检测关节滑膜Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达,ELISA法检测血清中IL-1β、IL-17、TNF-α水平,RT-PCR及Western blot检测软骨组织中PI3K、AKT、Caspase-3 mRNA表达及蛋白水平。结果与模型组比较,骨炎消巴布剂干预的关节滑膜炎性细胞浸润减少,Bcl-2表达显著上升(P<0.01),Bax、Caspase-3表达显著降低(P<0.01),IL-1β、IL-17、TNF-α显著降低(P<0.01),软骨组织中PI3K、AKTmRNA及蛋白水平显著上升(P<0.01),Caspase-3 mRNA表达及蛋白水平显著降低(P<0.01)。结论骨炎消巴布剂通过激活PI3K/AKT信号通路,抑制炎症因子的分泌,促进Bcl-2的表达,降低Bax、Caspase-3水平,抑制软骨细胞凋亡的发生,保护软骨细胞,进而延缓KOA的病情进展。