A new dammarane-type triterpene saponin from Gynostemma pentaphyllum

One new dammarane-type triterpene saponin,named(20S)-3β,20,21-trihydroxydammar-24-ene 3-O-[α-L-rhamnopyranosyl- (1→2)][β-D-xylopyranosyl(1→3)]-β-D-glucopyranoside(1),was isolated from the aerial parts of Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino.Its structural elucidation was accomplished mainly on the basis of the interrelation of spectroscopic methods, such as IR,HR-TOF-MS,NMR.

绞股蓝多糖提高小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能

研究不同浓度(12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μg/mL)绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino]多糖(GPP)对小鼠腹腔巨噬细胞的影响,探讨GPP对机体免疫功能的调节作用及其可能的作用机制。采用中性红法、Griess法、CCK8法、ELISA法和荧光定量PCR法检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力、增殖、细胞因子(NO、LDH、TNF-α、IL-1β)的分泌量、CaM和GSα基因的表达水平。结果表明,GPP激活小鼠腹腔巨噬细胞,随着GPP浓度的增加小鼠腹腔巨噬细胞增殖能力增强,当GPP浓度为50.0、100.0、200.0μg/mL时,吸光度与空白对照处理相比差异显著;GPP刺激小鼠腹腔巨噬细胞后,吞噬能力强于空白对照处理,GPP浓度为200.0μg/mL时,小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力最强;GPP促进小鼠腹腔巨噬细胞NO、LDH、TNF-α和IL-1β的分泌;GPP上调CaM和GSα基因的表达,GPP浓度为100.0、25.0μg/mL时CaM、GSα基因表达量分别达到最高。

富硒绞股蓝功能性茶冻的研制

绞股蓝是一种药食同源的草本植物,兼具较高的营养价值与药用价值。目前,绞股蓝相关产品以绞股蓝茶为主,存在味苦、浮沫多的弊端,制约了绞股蓝茶推广销售。本文以富硒超微绞股蓝茶粉为主要原料,以黄原胶、甜菊糖苷(甜味剂)、水等为辅料,以感官评分为主要指标,利用正交试验与Box-Behnken设计-响应面法筛选出最优的富硒绞股蓝功能性茶冻配方工艺,即富硒超微绞股蓝茶粉0.65 g、水1.00 L、甜菊糖苷0.10 g、黄原胶0.20 g,同时添加魔芋葡甘聚糖60 g。相较于传统绞股蓝茶,所得产品克服了绞股蓝茶味苦、浮沫多的弊端,丰富了绞股蓝茶产品形式;茶冻状态突破了传统茶冲泡形式下功能成分利用率低的限制,极大地提高了硒等功能活性物质的摄取率;以膳食纤维魔芋葡甘聚糖为成胶成分,既使产品具有细腻弹爽的口感、透明均匀的色泽,又赋予其调节肠道菌群、缓解便秘的功能特性,增强了产品的功能活性;以甜菊糖苷甜味剂代替传统茶冻中的蔗糖,更适宜控糖人群食用。该研究结果为绞股蓝基功能性产品的研制与推广提供了技术和理论借鉴。

QuEChERS-气相色谱-质谱联用法测定绞股蓝中28种农药残留

为检测绞股蓝中农药残留情况,本文建立了一种使用QuEChERS-气相色谱-质谱联用法测定绞股蓝中28种农药残留的方法。结果表明,28种农药在50~250μg/L的范围内线性关系良好,回归方程相关系数为0.995 5~0.999 5,样品回收率为74.40%~123.54%,相对标准偏差为0.43%~10.00%。该方法简单、快捷,适合绞股蓝中常用农药的快速测定。

绞股蓝多糖对免疫功能的影响

绞股蓝多糖（２５，５０１００ｍｇ／ｋｇ，ｉｐ）能明显提高小鼠碳粒廓清速率，其Ｋ值分别为０．０５１７±０．０１１７，０．０４１９±０．０１１９，０．０５７６±０．０４８，与对照组（ＮＳ）０．０１６９±０．０１１７相比有显著差异（Ｐ＜０．０５）。能增强肝癌Ｈｅｐｓ小鼠ＮＫ细胞活性，其活性（％）分别为２１．４０±４．００，４１．１９±１１．５６，４９．６５±５．０６，除２５ｍｇ／ｋｇ剂量组外，均显著高于对照组１７．９９±２．３５（Ｐ＜０．０５），而对肉瘤Ｓ１８０小鼠ＮＫ细胞活性无明显影响。另外对小鼠血清溶血素和Ｓ１８０小鼠脾指数有显著提高作用，但对Ｈｅｐｓ小鼠脾和胸腺指数、Ｓ１８０小鼠胸腺指数和脾淋巴细胞转化无显著作用。

不同水分和氮素条件对栽培绞股蓝生物量和皂苷量的影响

目的研究人工栽培条件下水分和氮素对绞股蓝Gynostemma pentaphyllum生物量和皂苷量的影响。方法对野生绞股蓝扦插苗进行水分和氮素控制实验。结果在干旱和缺氮逆境下,整株植株生物量减少,但由于β-糖苷酶活性降低,导致单位干质量叶片中绞股蓝皂苷的量增加。由于干旱使生物量减少的速率大于对皂苷积累的促进作用,表现为干旱使总皂苷产量降低,与之相反,缺氮对生物量减少的速率小于对皂苷积累的促进作用,但是氮素浓度过低也不利于皂苷积累。结论这意味着在人工种植的情况下,必须保证充足的水分供应和适度的氮肥供应才有利于绞股蓝生长,保持较高的生物量和总皂苷产量。

RP-HPLC测定绞股蓝中芦丁和槲皮素的含量

目的：建立绞股蓝中芦丁与槲皮素的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱仪,使用TURNER KromasilTM C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为0.4磷酸水溶液-甲醇-乙腈进行梯度洗脱,流速为0.5mL/min,检测波长为360nm;柱温为40℃。结果：芦丁在0.37-3.70μg范围内有良好的线性关系,r=0.9999。槲皮素在0.05-0.50μg范围内有良好的线性关系,r=0.9999;芦丁的平均加样回收率为99.6,RSD为1.07;槲皮素的平均加样回收率为97.2,RSD为1.01。结论：该方法简便快捷,准确度高。

膜技术分离七叶参皂甙研究

以七叶参为材料,研究了微滤澄清、超滤除大分子、纳滤分离、纳滤浓缩等膜技术在分离七叶参皂甙的应用效果。结果表明,采用0.2μm微滤膜在40℃条件下微滤经粗滤后的七叶参浸提液,且在微滤滤液达到浸提液重的80%时加入与原料等重的透析水透析残渣可作为微滤澄清的技术参数;选用截留分子量为10000Da的超滤膜能有效去除色素等大分子物质;利用截留分子量为2500Da或3500Da的纳滤膜分离七叶参皂甙,可制得纯度为42%以上的七叶参皂甙产品,且3500Da纳滤膜比2500Da纳滤膜的得率要高,但干粉中皂甙纯度略低;选用500D的纳滤膜在32℃左右、操作压力为1.8MPa的条件下浓缩七叶参皂甙不仅浓缩效率高,而且可进一步提高产品纯度。

绞股蓝多糖提取分离、化学结构及生物活性的研究进展

绞股蓝是我国特色天然资源,近年来研究发现多糖是其重要的药用活性成分,具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、降血糖、抗疲劳等生物活性。更重要的是绞股蓝多糖不仅具有显著的抗肿瘤活性,还参与和介导了免疫功能的调节,能够提高机体免疫功能而对正常细胞没有毒副作用,在恶性肿瘤、艾滋病等威胁人类健康疾病的防治和治疗方面具有广阔的应用前景,有希望开发成我国特色的创新药物。本文对绞股蓝多糖分离纯化、结构以及生物活性等方面进行详细综述,为以后进一步研究提供理论参考。

绞股蓝中总黄酮的分析研究

采用三波长—光谱法测定绞股蓝中总黄酮的含量 ,有效地消除了吸收峰不对称给定量分析造成的影响 ,并校正了基于干扰组分的吸收光谱具有线性吸收产生的基线倾斜 .本法的回收率为 96%～ 1 0 2 % ,变异系数小于 0 3 6% .方法的准确度与精密度均令人满意 ,而且操作简便易行 .

原子吸收光谱法测定绞股蓝中20种微量元素

本文运用火焰和石墨炉ＡＡＳ法结合使用基体改进技术测定了绞股蓝叶、茎、地下茎中２０种微量元素的含量，并通过实验拟定了各待测元素的最佳分析条件。各元素的回收率在９３％～１０６％之间，相对标准偏差小于８％。方法简单准确，具有实用意义。

中草药绞股蓝的傅里叶变换红外和拉曼光谱分析

利用傅里叶变换红外和拉曼光谱法直接、快速地测定了中草药绞股蓝样品 ,并对所测样品的红外、拉曼光谱图进行比较。结果表明 ,红外光谱图中各吸收峰位置与拉曼光谱图中各散射特征峰位置相对应 ,其关系互补。采用傅里叶变换红外和拉曼光谱分析法 ,对中草药绞股蓝的成份研究和特征波谱的鉴别 。

绞股蓝营养器官的结构及其人参皂甙的组织化学定位研究

绞股蓝是多年生草质藤本植物。根系由不定根组成 ,根的初生结构木质部为 2～ 4原型 ,次生结构中栓内层较厚。攀缘茎 ,具 5棱 ,周围纤维连成一环 ,幼茎的维管束排成两圈 ,外圈 5个 ,内圈 4或 5个 ;老茎圆柱形 ,周围纤维呈不连续环状 ,维管束具次生木质部和次生韧皮部 ,排成一圈。掌状复叶互生 ,小叶 5～ 7片 ,背腹型 ;叶柄具 5束维管束 ,进入小叶时分为 7～ 9束。茎和叶的初生维管束为双韧维管束。组织化学实验表明 ,绞股蓝人参皂甙主要分布在营养器官的同化组织及韧皮部薄壁细胞中 ,厚角组织。

绞股蓝的RAPD指纹图谱鉴定及其特异DNA片段克隆、序列分析

目的：在DNA分子水平上鉴定绞股蓝及其伪品乌蔹莓。方法：用筛选出的两条随机引物（WGS001，WGS004）对不同采集地绞股蓝及乌蔹莓基因组DNA进行PCR扩增，将引物WGS004扩增7份绞股蓝样品中的具有相同迁移率的1条500bp左右的DNA片段进行克隆、测序、一致性分析，并在NCBI上作Blastn比对检索。结果：以上两条引物能分别扩增得到绞股蓝与乌蔹莓样品基因组的差异性DNA片段，这些片段可以明确区别绞股蓝与乌蔹莓。经克隆获得的7条绞股蓝DNA序列问的一致性在45．7％～94．5％之间，在NCBI上检索后未见相似序列的报道，为新序列。结论：RAPD技术可有效地鉴别绞股蓝和乌蔹莓，本研究克隆得到一段绞股蓝DNA序列，为绞股蓝的品种鉴定、辅助选择育种等研究奠定了基础。

正交法优选绞股蓝皂苷提取工艺及稳定性研究

综合考察和分析了各影响因素在绞股蓝水提取过程中对绞股蓝皂苷提取过程的影响,确定以料液比、提取时间、提取温度为主要考察因素进行单因素试验,并分析各因素对绞股蓝皂苷提取得率的影响。以人参皂苷标准品为对照,利用分光光度法对绞股蓝皂苷进行检测,并对提取液中皂苷纯度进行了分析计算。在单因素试验基础上,确定料液比、提取时间、提取温度为影响因素,各选出3个水平,安排三因素三水平的L9(33)正交试验,进一步优化了水提取绞股蓝皂苷的提取工艺,并在此提取工艺条件下进行了重复性验证试验,考察了提取工艺的稳定性。最终的试验结果为,水提取的最佳提取工艺为:料液比1:35,温度85℃,时间90min;在此最佳条件下绞股蓝皂苷平均提取得率为7.7943%,提取纯度为26.8522%,各提取得率相对标准差RSD为1.2099%。结果表明,绞股蓝提取率与提取纯度较高,提取工艺稳定,符合工业化生产要求。

HPLC法测定绞股蓝中5种皂苷成分的含量

目的:HPLC法比较不同地区绞股蓝中人参皂苷Rb1、Rb3、Rd和绞股蓝皂苷XLIX、XVII的含量。方法:采用Shimpack C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈和水,流速为0.8m L·min-1,检测波长为203nm,柱温为25℃。结果:采自陕西沣峪口的绞股蓝样品中人参皂苷Rb1、Rb3和Rd的含量最高,约为1.625%,1.776%,0.892%;云南普洱样品所含的绞股蓝皂苷XLIX最高,约为1.75%;重庆北碚区-1的样品中XVII的含量最高,约为1.063%。结论:各地区绞股蓝样品中皂苷含量差异很大。

绞股蓝甜味物质分离鉴定研究

对"恩五叶蜜绞股蓝"其所含的甜味物质,采用超声波,ZTC1+1除杂剂、G-10凝胶层析等提取分离技术,得到高纯甜味物质,然后用液质质谱仪检测其分子量和分子所含元素种类和数量及估测分子式。通过研究初步得出该物质不是蔗糖、葡萄糖,而是分子量为251.1393,最大可能分子式为C13H19N2O3的物质。

绞股蓝与辣蓼草对小曲质量的影响性研究

研究绞股蓝与辣蓼草对小曲糖化力、液化力及发酵力的影响,探索小曲制作过程中,各中草药的最佳添加量,通过正交试验获得最佳的工艺条件。设定草药比、药米比和接种量为3个因素,进行L(933)正交试验,通过检测糖化力、液化力与发酵力,确定最佳工艺条件为28℃培养6d,绞股蓝与辣蓼草比为2∶1,药/米为15%,接种量为8%。辣蓼草与绞股蓝的添加对小曲的质量有促进作用。

应用RAPD技术构建绞股蓝DNA指纹图谱

以不同类型绞股蓝(Gynostemma Pentaphyllum,(Thunb)Makino)DNA为模板,进行RAPD反应条件的优化及RAPD结果分析.最终筛选的RAPD反应条件为:20μL PCR反应体系中包括了10×buffer2.0μL,Mg2+2.0 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,引物0.5 mmol/L,Taq酶1U,模板DNA 50 ng.反应程序为94℃3 min→(94℃30 s→38℃40 s→72℃1 min)45个循环→72℃10min→4℃保持,并从66条随机引物中筛选出5条带型丰富、适合于绞股蓝分析的随机引物.以这5条随机引物对不同类型绞股蓝进行RAPD扩增,识别其特征性多态位点,建立分子标记检索表.

绞股蓝诱导人肝细胞瘤细胞凋亡(英文)

目的绞股蓝(GpM)在我国长期以来用于治疗多种疾病,目前在肿瘤的治疗中运用越来越多。然而,GpM在肿瘤治疗中的作用机理尚不清楚。本文旨在研究GpM对人肝细胞瘤细胞的促凋亡作用。方法采用流式细胞术检测GpM对人肝细胞瘤细胞株Huh-7细胞凋亡的影响,同时Western blot分析GpM作用Huh-7细胞后表达的Bcl-2、Bcl-XL、Bax和Bad蛋白水平。结果 20mg/mL GpM作用于细胞24小时后,56％的Huh-7细胞发生凋亡,而人纤维细胞凋亡率只有12％。Western blot结果显示: GpM作用后的Huh-7细胞中Bcl-2(一种抗凋亡分子)表达明显降低,而Bax(一种促凋亡分子)表达显著上调。结论实验结果提示,GpM作用于人肝细胞瘤细胞Huh-7,是通过下调Bcl-2和上调Bax的表达而诱导细胞凋亡的。