绞股蓝多糖提高小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能

研究不同浓度(12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μg/mL)绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino]多糖(GPP)对小鼠腹腔巨噬细胞的影响,探讨GPP对机体免疫功能的调节作用及其可能的作用机制。采用中性红法、Griess法、CCK8法、ELISA法和荧光定量PCR法检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力、增殖、细胞因子(NO、LDH、TNF-α、IL-1β)的分泌量、CaM和GSα基因的表达水平。结果表明,GPP激活小鼠腹腔巨噬细胞,随着GPP浓度的增加小鼠腹腔巨噬细胞增殖能力增强,当GPP浓度为50.0、100.0、200.0μg/mL时,吸光度与空白对照处理相比差异显著;GPP刺激小鼠腹腔巨噬细胞后,吞噬能力强于空白对照处理,GPP浓度为200.0μg/mL时,小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力最强;GPP促进小鼠腹腔巨噬细胞NO、LDH、TNF-α和IL-1β的分泌;GPP上调CaM和GSα基因的表达,GPP浓度为100.0、25.0μg/mL时CaM、GSα基因表达量分别达到最高。

绞股蓝多糖对D-半乳糖致衰老小鼠肝脏抗氧化能力的影响

【目的】探究绞股蓝多糖(Gynostemma pentaphyllum polysaccharides,GPP)对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致衰老小鼠肝脏抗氧化能力的影响。【方法】60只4周龄SPF级昆明小鼠随机分为6组(雌雄各半):空白对照组(Control)、模型组(D-gal)、阳性对照组(Vc)及绞股蓝多糖低(50 mg/kg)、中(100 mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量组(GPP-L、GPP-M和GPP-H),每组10只。采用生物化学、酶联免疫吸附及组织学技术等方法分别对各试验组小鼠的体重及增重变化、肝脏指数、血清总抗氧化能力(T-AOC)水平、肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量及肝脏组织形态和肝索面积比进行测定分析。【结果】各组小鼠体重均呈增长趋势,增重均呈下降趋势,其中GPP-M组小鼠体重低于其他各组,增重最少;GPP各剂量组肝脏指数、血清T-AOC水平均高于D-gal组;GPP各剂量组的小鼠肝脏组织SOD水平与D-gal组相比均无显著差异(P>0.05)。GSH-Px、CAT活性水平与D-gal组相比均有所增强,其中GPP-M组小鼠肝脏中GSH-Px活性显著高于D-gal组(P<0.05);GPP-L组小鼠肝脏中CAT活性显著高于D-gal组(P<0.05),ROS、MDA含量均显著低于D-gal组(P<0.05)。HE染色发现,D-gal组胞浆嗜酸性增强,肝细胞之间连接松散,肝血窦扩张明显,而GPP各组肝脏组织结构均有所改善,GPP-M与GPP-H组改善较明显;GPP-H组肝脏肝索面积占比与空白对照组和阳性对照组相当,GPP-M和GPP-H组肝脏肝索面积占比与GPP-L组相比显著增加(P<0.05)。【结论】GPP可以有效提高D-gal致衰老小鼠肝脏的抗氧化能力,从而达到延缓衰老的作用,其中GPP-M(100 mg/kg)组对D-gal致衰老小鼠肝脏抗氧化效果明显。

绞股蓝多糖对MFC胃癌荷瘤小鼠肿瘤生长抑制及免疫调节作用

目的探讨绞股蓝多糖对MFC胃癌荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制及免疫调节作用。方法MFC胃癌细胞接种于BALB/c小鼠右侧腋下,建立MFC胃癌荷瘤小鼠模型。将小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组(25mg/kg)及绞股蓝多糖高、低剂量组(100、50mg/kg),每组10只,环磷酰胺组腹腔注射,绞股蓝多糖组灌胃给药,1次/d,给药周期12 d。检测抑瘤率及脏器指数,NK细胞杀伤活性、脾淋巴细胞增殖能力及腹腔巨噬细胞吞噬功能,ELISA检测IFN-γ、IL-2和TNF-α水平,流式细胞仪检测外周血淋巴细胞亚群。结果与模型组比较,各药物处理组小鼠瘤质量均明显降低(P<0.05);环磷酰胺组小鼠体质量明显降低(P<0.05),而绞股蓝多糖组小鼠体质量无明显差异(P>0.05);环磷酰胺组小鼠脾脏指数、胸腺指数、NK细胞杀伤活性、淋巴细胞增殖能力、巨噬细胞吞噬功能、IFN-γ、IL-2、TNF-α水平、CD4+、CD8+细胞水平及CD4+/CD8+比值均明显降低(P<0.05),而绞股蓝多糖各剂量组上述指标均明显增加(P<0.05)。结论绞股蓝多糖对MFC胃癌荷瘤小鼠的肿瘤生长具有抑制作用,该作用与免疫调节作用有关。

绞股蓝多糖对H_(2)O_(2)损伤小鼠卵母细胞及线粒体的保护作用

【目的】探究绞股蓝多糖(Gynostemma penttaphyllum polysaccharides,GPP)对过氧化氢(H_(2)O_(2))损伤小鼠卵母细胞及线粒体的保护作用。【方法】用H_(2)O_(2)构建小鼠卵母细胞体外成熟氧化应激模型,并对GPP添加浓度进行筛选。将收集的小鼠MⅡ期卵母细胞随机分为空白对照组、H_(2)O_(2)组(在成熟培养液中添加H_(2)O_(2))和H_(2)O_(2)+GPP组(在含H_(2)O_(2)的成熟培养液中添加GPP)。体外受精后统计卵母细胞的卵裂率、4-细胞率、8-细胞率、桑椹胚率和囊胚率;利用线粒体红色荧光探针(Mito Tracker Red CMXRos)检测小鼠卵母细胞线粒体分布及含量,采用Jc-1线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位,利用ATP检测试剂盒检测线粒体ATP含量,通过免疫荧光染色观察小鼠卵母细胞纺锤体形态和染色体分布。【结果】H_(2)O_(2)+GPP组卵母细胞的卵裂率、4-细胞率、8-细胞率、桑椹胚率、囊胚率、线粒体含量、线粒体膜电位和ATP含量均显著高于H_(2)O_(2)组(P<0.05),纺锤体异常率和染色体异常率均显著低于H_(2)O_(2)组(P<0.05),与对照组间差异均不显著(P>0.05)。【结论】GPP可提高H_(2)O_(2)损伤小鼠卵母细胞体外受精的卵裂率和囊胚率,增加卵母细胞内线粒体含量、线粒体正常分布、线粒体膜电位、ATP含量,降低纺锤体形态异常、染色体形态异常和排列紊乱,从而减少线粒体的功能障碍。