平卧菊三七黄嘌呤氧化酶活性抑制提取物的成分分析和降尿酸作用

抑制黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)活性降低尿酸生成是预防和治疗高尿酸血症的有效手段。为获得安全性高的天然来源XOD活性抑制剂,该文以XOD活性抑制率为指标,优化超声波提取条件获得食药兼用资源平卧菊三七XOD活性抑制提取物(Gynura procumbens(Lour.)Merr.extract,GE),利用液质联用技术鉴定其物质组成,并检测其降高尿酸血症小鼠血尿酸作用。经超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱分析发现,GE主要含有4个单咖啡酰基奎尼酸、6个二咖啡酰基奎尼酸等绿原酸类物质和槲皮素及3个糖苷、山奈酚及1个糖苷等黄酮类物质。GE经乙酸乙酯萃取(GEA)和正丁醇萃取(GEB)后,XOD活性抑制率均提高。动物实验表明,GE、GEA和GEB均有效降低血清尿酸水平和肝XOD活性(P<0.01),显著降低肝丙二醛水平(P<0.01)、升高超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性,降低促炎因子IL-6和TNF-α含量(P<0.05)、恢复抑炎因子IL-10水平(P<0.01),从而减轻肾脏尿酸盐沉积和炎症,且GEA和GEB效果好于GE。研究结果可为开发食药资源降尿酸护肝肾产品提供理论基础。

平卧菊三七根部病害的绿色防控试验

【目的】通过对平卧菊三七根部病害开展绿色防治试验,以探讨对其根部病害绿色防治的最佳效果。【方法】通过施用中药渣和竹炭有机肥做基肥和追肥改良土壤,采用壳聚糖和枯草芽孢杆菌制剂溶液灌根方法防治根部病害,以枯萎株率与严重度为评价指标,统计分析各处理组与对照组的试验结果,比较各种处理对其根部病害的防控效果。【结果】施用中药渣和竹炭有机肥试验地平卧菊三七的枯萎株率分别控制在3.54%和5.09%,与对照组相比,枯萎植株减少了22.78%和21.23%(P<0.01);用壳聚糖和枯草芽孢杆菌处理植株根部,植株枯萎率分别控制为11.86%和14.27%,与对照组试验相比,植株枯萎率分别降低了19.96%和17.55%(P<0.05),对根部病害的防治效果分别为75.01%和68.71%。【结论】施用中药渣和竹炭有机肥,以及壳聚糖和枯草芽孢杆菌制剂控制平卧菊三七根部病害,根部病害明显减少,防治效果均显著,绿色防控技术组合简便实用,为平卧菊三七根部病害的绿色防控及生态种植提供参考。

菊三七组织培养的研究

目的 探讨菊三七诱导愈伤组织的过程 ,为快速繁殖幼苗奠定基础。方法 以菊三七的根、茎、叶为外植体 ,采用 MS培养基 ,附加不同的植物激素进行实验。结果 以菊三七的叶片为外植体 ,在培养基 MS+ 1.0 mg/ LNAA+ 4 .0 m g/ L 6- BA上 ,愈伤组织诱导率可达 64%。愈伤组织在适宜的分化培养基上 ,成苗率可达 86.7%。结论 通过诱导愈伤组织的途径 。

菊叶三七生物碱成分的研究

从菊科蒂叶三七植物中分离出六个生物碱,对其中四个进行了鉴定。光谱数据证明:生物碱Ⅰ和Ⅱ分别为已知的千里光碱(senecionine,Ⅰ)和千里光菲灵碱(seneciphylline,Ⅱ),生物碱Ⅲ和Ⅳ为新成分,分别命名为菊三七碱甲(sineciphyllinine,Ⅲ)和菊三七碱乙[(E)-seneciphylline,Ⅳ]。

吡咯里西啶类生物碱肝毒性研究进展及风险分析

吡咯里西啶类生物碱(PAs)在植物中广泛分布,其中约120种PAs具有肝毒性,含肝毒性吡咯里西啶类生物碱(HPAs)的植物主要为菊科、紫草科和豆科6个科的植物。近年来,我国因服用土三七引起的HPAs肝损伤较多,引起社会广泛关注。该文通过查阅国内外相关文献,研究分析HPAs致肝毒性的病因、毒性机制、临床诊断及治疗、风险因素、风险管控等,以期为土三七等含HPAs中草药的安全用药提供参考。

蔓三七叶中分离绿原酸和异绿原酸及其抗氧化活性研究

以蔓三七叶为原料,制备其中的绿原酸和异绿原酸A、B和C,并对它们进行结构鉴定;同时,采用DPPH法、水杨酸比色法、邻苯三酚自氧化法来对其进行体外抗氧化活性研究。结果表明,分离制备的绿原酸和异绿原酸A、B和C质量分数分别为96. 8%、98. 2%、97. 6%和98. 7%。在0. 5～10μg/mL范围内,绿原酸和异绿原酸A、B和C对DPPH和羟基自由基表现出了较好的清除作用,随浓度升高而逐渐增大;但它们对超氧自由基的清除作用时,浓度从5μg/mL升高到100μg/mL时,清除作用都未出现明显的剂量依赖性,各样品与阳性对照组(VC)相比较而言,其清除超氧自由基的作用明显较弱。本文揭示了蔓三七叶中的绿原酸和异绿原酸A、B和C具有不同的抗氧化效果。

民族药菊三七的生药学研究

目的对多民族常用的植物药菊三七进行生药学鉴定,为其鉴别及应用提供科学依据。方法采用原植物、性状、显微鉴别方法。结果菊三七在原植物、性状、显微等方面具有专属性的特征。结论通过原植物、性状、显微能够很好地鉴定菊三七。

平卧菊三七叶化学成分的分离与鉴定

目的研究平卧菊三七叶子的化学成分。方法采用硅胶柱色谱法、反相ODS柱色谱法、Seph-adex LH-20柱色谱法和HPLC法等进行分离纯化,并通过波谱分析技术鉴定其化学结构。结果从平卧菊三七叶子中分离得到7个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇-3-O-龙胆二糖苷(β-sitosterol-3-O-gentiobioside,1)、3-吲哚甲酸(indole-3-carboxylic acid,2)、蚱蜢酮(grasshopper ketone,3)、β-谷甾醇(β-sitosterol,4)、毒豆甲酮(drummondone A,5)、正三十二烷醇(n-dotriacontanol,6)和毒豆乙酮(drummondone B,7)。结论化合物1～3、5、7为首次从菊三七属植物中分离得到,化合物4、6为首次从平卧菊三七中分离得到。

超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法研究菊三七总生物碱致肝毒性的血清代谢组学

应用代谢组学的方法探讨了菊三七总生物碱致肝毒性的可能作用机制。采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)技术,建立菊三七总生物碱高剂量组与空白组的大鼠血清代谢指纹谱,利用主成分分析(PCA)及偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)多元统计分析比较两组的代谢物谱差异。结果表明,与空白组比较,筛选并初步鉴定出34个差异代谢产物(P<0.05,VIP>1),可作为肝毒性相关的潜在生物标记物,其代谢水平的变化表明菊三七总碱致肝毒性可能与氨基酸、核苷酸、脂质代谢及肝肠循环等途径发生紊乱有关,从代谢组学角度初步探讨了菊三七总碱肝毒性的作用机制。

中药三七辨析

明代医家张四维 1 5 76年在《医门秘旨》中首载三七 ;随后 ,李时珍在《本草纲目》中记载了五加科的三七和另一种具有活血化瘀作用的类似三七的植物 ;清代赵学敏在《本草纲目拾遗》中将三七和人参联系在一起 ,归于昭参条下 ;清代吴其浚在《植物名实图考》中进一步描述了三七的功效 ,并指出《本草纲目》中记载的类似三七的植物是土三七 ,即菊叶三七。

菊三七根部主要化学成分研究

目的:研究菊三七根部主要化学成分,为菊三七质量标准的制定提供理论依据与参考.方法:运用正相层析柱色谱和制备高效液相色谱对其化学成分进行分离,通过MS和NMR技术进行结构鉴定.结果:从菊三七的根部分离得到4个主要化合物,分别为千里光菲灵碱(Seneciphylline,1)、千里光宁碱(Senecionine,2)、Seneciphyllic acid(3)、Senecinic acid(4).结论:化合物4首次从菊三七中分离得到.

平卧菊三七扦插繁殖切口形状对植株根系影响的初步研究

本文对平卧菊三七扦插繁殖插穗切口形状对植株根系影响进行了初步研究,结果表明:平切口、斜切口、马耳形切口的单株平均生根数和平均干重差异不显著,而根系平均鲜重差异较显著。在扦插过程中,马耳形切口处理生成的植株长势最好、成活率较高,斜切口处理次之,平切口植株成活率最低。

平卧菊三七提取物体外抗氧化活性研究

研究平卧菊三七植株不同部位、干燥方式和提取溶剂对其提取液中生物活性物质含量和抗氧化活性的影响。结果表明:平卧菊三七植株根部相比于茎部和叶部,酚类化合物和黄酮类化合物含量较高且抗氧化性较强,铁离子还原/抗氧化能力、DPPH自由基清除能力和ABTS^+·清除能力测定的抗氧化值(抗氧化能力TEAC值)分别达到(21.25±0.31),(35.27±0.26),(56.20±0.22)μg Trolox/mL。干燥方式对平卧菊三七植物根部提取液的生物活性物质含量有显著性影响,冷冻干燥和60℃热风干燥方式获得的提取液具有更强的抗氧化活性。溶剂对平卧菊三七植株根部提取液的生物活性物质含量和抗氧化活性有显著性影响(P<0.05),其抗氧化活性(FRAP法、DPPH法和ABTS法)与总酚、总黄酮和绿原酸含量显著相关(P<0.05),与总酚相关系数R分别为0.919,0.848,0.907,与总黄酮含量相关系数R分别为0.915,0.793,0.823,与绿原酸含量相关系数R分别为0.887,0.927,0.900,与VC含量相关性较低。

平卧菊三七组织培养技术研究

该研究以平卧菊三七的叶片为外植体,对影响其愈伤组织诱导及芽分化的相关因素进行了探讨。结果表明,适合平卧菊三七愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 1mg/L;愈伤组织分化出芽的培养基配方为MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.4mg/L。在1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.3mg/L的培养基配方上生根较好,移栽到不同基质中的组培苗,存活率达100%。

平卧菊三七提取物降血糖实验研究

目的：观察平卧菊三七提取物对四氧嘧啶型糖尿病小鼠的降糖作用.方法：选用22-26 g雄性ICR小鼠,禁食时间16 h,腹腔注射200 mg/kg四氧嘧啶造模.结果：连续给药14 d,各组均具有明显降糖效果,且能明显改善小鼠多饮多食症状.结论：平卧菊三七提取物能很好地抑制糖尿病小鼠血糖升高,改善多饮多食症状,疗效与剂量无明显线性关系。

印尼蛇接骨草醇提取物抑制骨肉瘤细胞U2-OS侵袭迁徙的研究

目的发现印尼蛇接骨草95%醇提取物[Gynura procumbens(Lour.)MERR.extract,GPE]能诱导骨肉瘤细胞凋亡、抑制其增殖。文中探讨GPE对骨肉瘤细胞U2-OS体外迁徙、侵袭力的影响。方法用0、40μg/mL GPE分别作用骨肉瘤细胞U2-OS,Wound healing和Transwell侵袭实验检测U2-OS细胞的迁徙、侵袭力。结果 40μg/mL GPE处理组,24 h细胞迁徙率(33±3)%明显低于对照组(0μg/mL GPE)细胞迁移率(66±2)%;2组细胞24h穿膜细胞数分别为(18±2)和(46±2)个/视野,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GPE能在体外抑制骨肉瘤U2-OS细胞侵袭迁徙,有望成为新的抗骨肉瘤转移的药物。

响应面法优化超声波提取平卧菊三七多酚工艺

以平卧菊三七粉末为原料,在单因素的基础上,选取乙醇浓度,超声温度,超声时间,超声功率为自变量,平卧菊三七多酚提取率为响应值,根据中心组合(Box-Benhnken)试验设计原理,采用四因素三水平的响应面分析法模拟得到二次多项式回归方程的预测模型,优化平卧菊三七多酚超声提取工艺。所得最佳提取工艺参数为:乙醇浓度55%,超声温度70℃,超声时间53 mim,超声功率106 W,在此条件下,平卧菊三七多酚提取率为0.522%,与预测值0.524%基本一致。

蛇接骨草提取物对U2-OS细胞增殖及细胞周期的影响

目的研究蛇接骨草提取物对U2-OS细胞的增殖抑制作用及对U2-OS细胞周期的影响。方法以95%乙醇进行提取(提取物简称GPE)。MTT法检测GPE对U2-OS细胞的增殖抑制作用,Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒分析GPE对U2-OS细胞的凋亡诱导作用,流式细胞术分析GPE对U2-OS细胞周期的影响。结果 GPE剂量依赖性抑制U2-OS细胞的增殖,IC50为72μg.mL-1;GPE可诱导U2-OS细胞凋亡,并将U2-OS细胞阻滞在G0/G1期。结论蛇接骨草具有抗肿瘤活性。

平卧菊三七快繁体系优化研究

本研究在已有分化培养基和生根培养基的基础上,用市售普通白糖替代分析纯蔗糖,并去除部分有机成份,对平卧菊三七的快繁体系进行优化.结果表明:在平卧菊三七的快繁过程中,普通白糖可以替代分析纯蔗糖,且以25g.L-1的白糖增殖系数最高,分化苗健壮、根系发达;有机成份中的肌醇和VB1对不定芽的分化不可缺少;试管苗无须经过炼苗即可移栽.优化后的快繁体系比原体系可节省成本84%,有助于工厂化生产成本的降低.

土三七致大鼠肝毒性的代谢组学

目的研究土三七致大鼠肝毒性的代谢组学。方法 20只SD大鼠随机分为空白组和给药组,每组10只,空白组灌胃给予蒸馏水,给药组灌胃给予土三七药液(7.5 g/kg),给药14 d后处死,取血和肝脏,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)水平,并进行病理组织学观察。然后,通过LC-MS法分析大鼠血清、肝组织代谢谱变化,并鉴定差异性代谢物。结果与空白组比较,给药组ALT、AST水平显著升高(P<0.01),HE染色可见有不同程度的炎细胞浸润。通过正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)载荷图筛选,可找到变量权重(VIP)>1、P<0.05的差异性代谢物。血清样品中共有68个差异变量,其中13种代谢物差异较大;肝组织样品中共有26个差异变量,其中14种内源性代谢物差异较大。结论土三七致大鼠肝毒性机制可能与甘油磷脂、胆汁酸代谢紊乱有关,本研究可为有毒中药的毒性机制研究提供新的策略和方法。