尼可地尔含血停搏液对心肌细胞Na^(+)-K^(+)ATP酶的保护作用

目的缺血再灌注损伤会导致心肌细胞Na+-K+ATP酶活性降低,通过对比缺血再灌注后Na+-K+ATP酶活性改变,研究尼可地尔含血停搏液对心肌细胞Na+-K+ATP酶的保护作用。方法采用间生态离体兔心共生支持系统模型。16个心脏随机分为两组,每组8只。分别采用尼可地尔超极化含血停跳液或者高钾去极化含血停跳液灌注。超极化含血停跳液由尼可地尔(100μmol/L),Krebs-Henseleit液和兔血1:2混合配制。去极化停搏液由St.Thomas'液与兔血1:2混合配制,最终K+浓度20mmol/L。心脏停跳后以含血停跳液间断灌注,常温缺血60min。再灌注60min。采用电镜酶化学方法检测缺血前后心脏Na+-K+ATP酶的变化。结果缺血再灌注后两组中酶的活性均明显降低,高钾组较尼可地尔组减少更明显。结论尼可地尔对心肌细胞Na+-K+ATP酶缺血再灌注损伤有保护作用。

mGluR1选择性拮抗剂LY367385对脑星形胶质细胞Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的影响

背景：脑星形胶质细胞肿胀是肝衰竭时脑水肿的特征,但其机制尚未完全阐明。目的：研究代谢型谷氨酸受体1亚型（mGluR1）选择性拮抗剂LY367385对脑星形胶质细胞Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的影响。方法：分离、培养小鼠脑星形胶质细胞,分为谷氨酸组、谷氨酸＋LY367385组、谷氨酸＋DMSO组和空白对照组,以定磷法检测Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性,以高效液相色谱法测定ATP含量。结果：与空白对照组相比,谷氨酸组、谷氨酸＋LY367385组和谷氨酸＋DMSO组Na^＋-K^＋-ATP酶活性、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性和ATP水平显著降低（P〈0.05）;谷氨酸＋LY367385组和谷氨酸＋DMSO组显著高于谷氨酸组（P〈0.001）,两组间则无明显差异。结论：mGluR1选择性拮抗剂LY367385可提高Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性,减少ATP消耗,从而有效保护脑星形胶质细胞,有望成为预防和治疗肝性脑病的药物。

糖末宁对实验性糖尿病大鼠坐骨神经Na^＋-K^＋-ATP酶活性的影响

目的观察中药复方制剂糖末宁对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠坐骨神经Na+-K+-ATP酶活性影响.方法采用STZ诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为糖末宁组、西药对照组、模型组,另设正常对照组.糖末宁组灌胃糖末宁,西药对照组灌胃甲钴胺片,连续6周,观察糖末宁对糖尿病大鼠坐骨神经Na+-K+-ATP酶活性、血糖等指标的影响.结果糖尿病大鼠坐骨神经Na+-K+-ATP酶活性明显降低,糖末宁能明显提高Na+-K+-ATP酶活性.结论糖末宁对糖尿病周围神经病变的治疗作用,可能与改善坐骨神经Na+-K+-ATP酶活性有关.

甲状腺激素对大鼠心肌Na^＋，K^＋-ATP酶α1亚基表达的影响

目的探讨不同甲状腺激素（TH）水平对大鼠心肌Na^＋，K^＋-ATP酶（钠泵）α1亚基mRNA表达的影响。方法Wistar大鼠随机分为甲状腺功能减退（简称甲减）组和对照组，分别摄入含碘量为50、300mg／kg的饲料，并分别饮用去离子水和自来水，喂养24周后放射免疫法测定血清TH水平，RT—PCR法测定心肌组织钠泵α1亚基mRNA的表达水平。结果甲减组血清TH水平明显低于对照组（P〈0．01）；心肌钠泵α1亚基mRNA表达水平，甲减组（0．59±0．51）与对照组（0．97±0．27）相比明显降低，差异有统计学意义（t=2．57，P〈0．05）。结论低碘饮食可以诱发大鼠甲状腺功能减退，低TH水平导致心肌钠泵α1亚基mRNA表达下降。

大鼠肝脏冷/热缺血再灌注损伤钠钾ATP酶、钙ATP酶及镁ATP酶与肝细胞死亡方式的研究

目的 :研究肝脏冷 /热血再灌注损伤条件下 ,钠钾ATP酶、钙ATPATP酶及镁ATP酶活性与细胞凋亡和胀亡的关系 ,并探讨减少此类损伤的途径。方法 :建立大鼠肝门部分阻断热缺血 1h再灌注模型及大鼠原位肝移植冷缺血 1h再灌注模型 ,分别于再灌注 0h、1h、12h和 72h处死取材 ,测定肝细胞钠钾ATP酶、钙ATP酶及镁ATP酶活性。用形态学及AnnexinV、PI双染法流式细胞仪定量测定早期细胞凋亡和胀亡百分数。结果 :与对照组相比 ,冷 /热缺血 1h(再灌注 0h)后钠钾ATP酶、钙ATP酶及镁ATP酶活性均持续显著下降 ,再灌注 1h达低谷。但热缺血再灌注后 72h钠钾ATP酶活性恢复 ,钙ATP酶及镁ATP酶活性仍未恢复。冷缺血再灌注后 12h钙ATP酶先恢复活性 ,72h钠钾ATP酶、镁ATP酶活性才恢复。细胞死亡方式 :①冷缺血再灌注损伤 ,细胞死亡以凋亡为主 ,并于再灌注后 12h后到顶峰。②热缺血 1h胀亡细胞显著增多 ,再灌注 1h后减少 ,细胞死亡方式转为以凋亡为主。结论 :肝脏冷 /热缺血再灌注损伤均能导致 3种ATP酶活性下降 ,细胞内离子浓度失衡 ,热缺血期ATP酶活性严重下降 ,细胞死亡 ,以胀亡为主。冷缺血期ATP酶轻度下降 ,细胞死亡以凋亡为主。术前或术中给予能量物质 ,对提高钠钾ATP酶、钙ATP酶及镁ATP酶活性 ,减轻炎症反应 ,延长肝门阻断?

大枣多糖对血虚大鼠全血细胞及红细胞ATP酶活力的影响

目的:观察大枣多糖对血虚大鼠全血细胞及红细胞膜ATP酶活力的影响,分析大枣的补气血作用的可能途径。方法:实验于2002-02/06在河南中医学院动物实验中心完成。①选用Wistar大鼠60只,体质量170～190g,雄性。随机选用50只采用以下方法造成气血双虚模型:分别于实验第1,3,5,7,9天,尾部放血1mL/180g,于第2天腹腔注射环磷酰胺生理盐水溶液40mg/kg,于第4,6,8,10,12天腹腔注射环磷酰胺20mg/kg,造气血双虚模型;其余10只大鼠为空白对照组(仅注射同体积生理盐水)。②将50只气血双虚模型大鼠随机分为5组:大、中、小剂量大枣多糖组[灌胃大枣多糖溶液,由河南中医学院药物化学学科提供。本品为鼠李科植物枣干燥成熟果实的提取精制物(经乙醇回流脱脂、水提取、浓缩、醇沉、除蛋白、透析、醇沉、真空干燥等程序,得大枣多糖)溶液剂量为200,100,50mg/kg,灌胃体积为10mL/kg],当归补血口服液组[灌胃当归补血口服液(郑州市协和制药厂生产,剂量为2次/d,10mL/次,批号010301)3.3mL/kg,原药液稀释1.5倍]及模型组(灌胃等体积生理盐水)。空白对照组仅灌同体积生理盐水。每天给药1次,连续给药14d。③于第14天给药后2h,用库尔特细胞全自动分析仪测定血中红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白和血小板计数。ATP酶测定用定磷法,按南京建成生物工程研究所提供的ATP酶试剂盒说明书测定红细胞Na+-K+-ATP酶和Ca2-Mg2-ATP酶活性。④计量资料组间比较采用t检验,方差不齐者采用t’检验。结果:大鼠60只均进入结果分析。①空白对照组、各剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠血红细胞计数、白细胞计数、血小板计数及血红蛋白含量明显高于模型组(P<0.05～0.01)。②空白对照组、各剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠红细胞Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明显高于模型组(P<0.05～0.01)。空白对照组,大、中剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠红细胞Ca2+-ATP酶活力明显高于模型组(P<0.05),小剂量大枣多糖组大鼠Ca2+-ATP酶活力与模型组相近。结论:大枣多糖可以改善气血双虚大鼠的造血功能和红细胞能量代谢,从而起到补血作用。

低氧习服过程中肺组织一氧化氮水平及钠-钾-ATP酶活性的变化

目的:探讨低氧习服过程肺组织一氧化氮水平和Na-K-ATP酶活性++的变化及其对模拟高原低氧性肺水肿的影响。方法:将32只3月龄Wistar大鼠随机分成常氧对照组、急性低氧组、3000m低氧习服组、5000m低氧习服组,习服完成后,置于模拟海拔6000m急性低氧24h,检测动物肺组织一氧化氮水平及Na-K-ATP++酶活性的变化及肺超微结构的变化。结果:急性低氧组肺组织超微结构出现明显的间质性肺水肿,而经过低氧习服后间质性肺水肿则明显减轻;急性低氧组大鼠肺组织一氧化氮水平犤(17.09±3.62)μmol/L犦显著低于常氧对照组犤(60.55±4.27)μmol/L犦(q=31.642,P<0.01),经过3000m和5000m低氧习服后肺组织一氧化氮水平逐渐接近于常氧对照组,明显高于急性低氧组(q=25.540,43.625,P<0.01);急性低氧组肺组织Na-K++-ATP酶活性明显低于常氧对照组q=15.347,P<0.01),经过3000m(和5000m低氧习服后Na-K-ATP酶活性显著高于常氧对照组(q++=8.290,28.563,P<0.01)。结论:低氧习服后肺组织一氧化氮水平及Na-K-ATP酶活性的提高有++利于减轻大鼠低氧性肺水肿。

兔海水淹溺性肺水肿与钠钾-ATP酶的关系及不同剂量地塞米松对其影响

目的:探讨海水淹溺性肺水肿与肺钠钾-ATP酶的关系及不同剂量地塞米松对其影响。方法:将40只家兔随机分为4组:对照组(CG)、海水淹溺组(SG)和不同剂量地塞米松治疗组(DG1:0.2mg/kg、DG2:1mg/kg)。SG组兔给予气管内灌注3ml/kg海水,DG1、DG2组在CG组的基础上分别静注0.2mg/kg、1mg/kg地塞米松。于淹溺前及淹溺后30min、60min、120min进行动脉血气分析,淹溺后120min测定肺湿/干重比、肺泡通透指数及钠钾-ATP酶,观察各组兔肺脏在治疗前后光镜、电镜下的改变并计算肺损伤病理评分。结果:与SG组比较,DG1、DG2组在淹溺后60min、120min PO2明显升高(P<0.01),在淹溺后120min肺湿/干重比、肺泡通透指数及肺损伤病理评分明显下降(P<0.05),但DG1组与DG2组之间比较无显著性差异(P>0.05)。使用地塞米松干预后,DG1、DG2组钠钾-ATP酶活性明显增高,与CG及SG组比较均有明显差异(P<0.05)。从形态学上观察,SG,DG1及DG2组动物均可见肺毛细血管淤血,肺泡型、型上皮细胞受损,但SG组动物损伤相对较重。结论:地塞米松可改善兔海水淹溺性肺水肿的缺氧及减轻肺水肿,但增加剂量(1mg/kg)并不能增加治疗效果,其机制可能与地塞米松上调肺组织钠-钾-ATP酶有关。

SMO保存液对犬肾低温保存期间Na^+-K^+ ATPase的影响

目的:研究SMO保存液对犬肾低温保存期间Na+-K+ATPase的影响。方法:建立犬离体肾脏单纯低温保存模型,对照组用0~4℃HTK保存液和UW保存液对供肾进行灌注和保存,试验组用0~4℃自制SMO保存液对供肾进行灌注和保存,分别于24、48、72h后取皮质标本,进行组织病理学观察及检测Na+-K+ATPase的活性。结果:SMO液组所见组织病理学改变,48h和72h比HTK液组轻,在各时间点与UW液组基本相似。Na+-K+ATPase活性,保存各时点,SMO液组与UW液组无明显差异;保存24h和48h,SMO液组与HTK液组无明显差异;保存72h,SMO液组Na+-K+ATPase活性明显高于HTK液组,存在明显差异。结论:SMO保存液在减轻细胞形态学改变和减缓Na+-K+ATPase活性下降方面显著优于HTK保存液,与UW保存液相当。

Klotho蛋白减轻低氧/复氧诱导的心肌细胞系H9C2损伤

目的研究Klotho蛋白对低氧-复氧诱导的心肌H9C2细胞系损伤的保护作用及其机制。方法将H9C2心肌细胞分为对照组、低氧/复氧组(1%O_2低氧6 h, 5%CO_2以及95%空气培养箱中复氧2 h)和Klotho蛋白(10μg/mL)干预组。通过酶标仪间接测定细胞内钙离子([Ca^(2+)]_i)水平;CCK8法和TUNEL法分别检测细胞活性及细胞凋亡;分光光度法检测细胞中钠ATP酶(Na^+/K^+-ATPase,NKA)和反向模式钠/钙交换体(Na^+/Ca^(2+)-exchange,NCX)的活性。结果体外培养的H9C2细胞低氧/复氧(6 h/2 h)处理后可明显降低H9C2细胞活性(P<0.05);增加细胞内Ca^(2+)水平和凋亡率(P<0.05);降低细胞中Na^+/K^+-ATPase的活性(P<0.05);增加反向模式Na^+/Ca^(2+)交换体的活性(P<0.05);10μg/mL Klotho蛋白处理可明显减轻上述损伤。结论 Klotho蛋白可减轻低氧/复氧诱导下的H9C2细胞内钙超载,最终减少该细胞系细胞的凋亡。

贝科能对复苏后大鼠甲状腺组织MDA含量及SOD和Na^+-K^+-ATPase活力的影响

目的研究贝科能对心肺复苏后大鼠甲状腺的保护作用。方法建立心肺复苏大鼠模型,然后将24只大鼠随机分为对照组、常规复苏组、贝科能治疗组。大鼠复苏后24 h取甲状腺组织液氮冷藏。采用比色法测定复苏前后3组甲状腺组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及Na+-K+-ATPase活力。结果与对照组相比,复苏后大鼠甲状腺组织中MDA含量明显增高(t=16.75,P<0.01),SOD及Na+-K+-ATPase活力显著降低(t=6.25、8.85,P<0.01);与常规复苏组相比,贝科能治疗组MDA含量明显降低(t=2.60,P<0.05),Na+-K+-ATPase活力显著增高(t=2.60,P<0.05)。结论贝科能对复苏后大鼠甲状腺具有保护作用。

NHE-1蛋白和V-ATPase在胃癌及癌前病变组织中的表达及临床意义

目的探讨Na+/H+交换蛋白-1(NHE-1)蛋白和空泡型质子ATP酶(V-ATPase)在胃癌和癌前病变组织中的表达及其临床意义。方法收集2014年1月至2019年12月在温州市中西医结合医院行胃镜检查时采取的胃黏膜组织标本及行胃癌手术采取的胃癌组织标本320例。采用免疫组化SP法检测NHE-1蛋白和V-ATPase的表达,分析NHE-1蛋白和V-ATPase在胃癌和癌前病变组织中的表达差异、与胃癌临床病理特征的关系、两者表达的相关性及对胃癌患者预后的影响。结果胃癌组织中NHE-1蛋白及V-ATPase的阳性表达率均高于癌前病变组织,差异均有统计学意义(均P<0.05)。胃癌组织中NHE-1蛋白及V-ATPase的表达与性别、年龄、肿瘤大小、分化程度均无关(均P>0.05),但与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期均有关(均P<0.05)。Spearman等级相关分析显示胃癌组织中NHE-1蛋白表达和V-ATPase表达呈正相关(r=0.299,P<0.05)。NHE-1蛋白表达阴性组、弱阳性组和强阳性组胃癌中位生存时间比较差异有统计学意义(P<0.05),V-ATPase表达阴性组、弱阳性组和强阳性组胃癌中位生存时间比较差异有统计学意义(P<0.05),NHE-1蛋白和V-ATPase均表达组、NHE-1蛋白表达组、V-ATPase表达组和NHE-1蛋白和V-ATPase均不表达组胃癌中位生存时间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃黏膜组织中NHE-1蛋白和V-ATPase过表达可能导致胃癌的发生和发展。

硫酸镁对脊髓损伤后钠离子-钾离子-三磷酸腺苷酶活性和丙二醛浓度与含水量的影响

目的:硫酸镁用于脑损伤的治疗已取得了较满意的疗效,探讨硫酸镁对脊髓损伤后Na+-K+-ATP酶活性、丙二醛浓度与含水量的影响。方法:改良Allen's法建立SD大鼠急性脊髓损伤模型,随机分损伤组和硫酸镁治疗组(脊髓损伤后30min一次性腹腔注射300mg/kg硫酸镁),在伤后6,12和24h检测伤段脊髓Na+-K+-ATP酶活力、脊髓组织含水量及丙二醛浓度,与正常对照组(n=8)比较。结果:损伤组与对照组比较,Na+-K+-ATP酶活力降低,丙二醛浓度与脊髓含水量升高,差异有非常显著性意义(P<0.01);治疗组与损伤组比较,Na+-K+-ATP酶活力增加、丙二醛浓度及含水量降低,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:硫酸镁能提高大鼠急性脊髓损伤后伤段脊髓Na+-K+-ATP酶活力,降低丙二醛浓度及含水量,对脊髓损伤有保护作用。

去除神经支配大鼠骨骼肌中钠钾三磷酸腺苷酶表达的变化(英文)

背景:胰岛素诱导的离子运输改变可影响代谢调节,并且胰岛素抵抗条件下钠钾三磷酸腺苷酶活性的降低导致高血压以及糖原合成、葡萄糖氧化和ATP产生的减少。目的:观察钠钾三磷酸腺苷酶在胰岛素抵抗模型中的表达调控。设计:对照实验。单位:英国邓迪大学生命科学学院分子生理学系。材料:实验于1999-10/2000-02完成。使用15只体质量200～250g的清洁级成年雄性SpragueDawley大鼠。每次实验使用5只,相同实验重复3次。方法:去除大鼠一侧后肢神经支配,4d后将骨骼肌从去除神经支配的后肢和对侧对照后肢中解剖并分离,从红色肌肉(比目鱼与红色腓肠肌)和白色腓肠肌中分离粗制细胞膜。应用免疫印迹法和Northern杂交分析法分别检测蛋白质和mRNA的表达。使用Bio-RadGS-670图像密度仪对蛋白质和mRNA的信号强度进行定量。主要观察指标:对照侧和去除神经支配后肢骨骼肌中钠钾三磷酸腺苷各亚基蛋白质和mRNA表达水平的比较。结果:15只大鼠全部进入结果分析。与对照侧相比,去除神经支配的后肢中:①红色骨骼肌中α2和β1亚基的蛋白质表达分别下降46%和77%。在红色和白色骨骼肌中,α1亚基的蛋白质表达分别增加了20%和15%。β2亚基的蛋白质表达在红色和白色骨骼肌中均未发生显著变化。②在红色腓肠肌和比目鱼肌中,α2亚基的mRNA水平分别下降了29%和39%,β1亚基的mRNA水平分别下降了80%和52%。在红色和白色腓肠肌中,α1亚基的mRNA水平分别增加了9倍和1.3倍。β2亚基的mRNA水平在红色腓肠肌中无显著变化,但在白色腓肠肌中减少了59%。结论:①在去除神经支配的大鼠骨骼肌中,钠钾三磷酸腺苷酶各亚基的表达受转录和转录后双重调控。②α2和β1亚基的蛋白质表达显著下降的结果提示,在大鼠骨骼肌中,去除神经支配造成的胰岛素抵抗使原本受胰岛素调节的钠钾三磷酸腺苷酶亚基的表达机制被破坏。

模拟缺血对豚鼠心室肌细胞Na^+/K^+泵电流的影响

目的观察模拟缺血对心室肌细胞Na+/K+泵电流的影响。方法采用胶原酶酶解法分离豚鼠心室肌细胞,以全细胞膜片钳方法记录心室肌细胞的Na+/K+泵电流(Ip)。采用代谢抑制剂2-脱氧葡萄糖和碳酸氰-4-三氟甲氧基苯腙模拟缺血灌流,造成细胞的模拟缺血,观察模拟缺血对心室肌细胞Ip的影响,并探讨模拟缺血对双氢哇巴因(DHO)高亲和力Ip和DHO低亲和力Ip的影响。结果模拟缺血2.5min时Ip抑制率为(30.15±0.05)%,与4.0min时的(49.33±0.02)%比较差异有统计学意义(P<0.05);6.0min时Ip抑制率为(62.27±0.04)%,与4.0min时的比较差异有统计学意义(P<0.05);Ip抑制程度随缺血时间延长而增加(r=0.82,P<0.05)。模拟缺血特异性抑制DHO低亲和力Ip,而不影响DHO高亲和力Ip。结论模拟缺血对DHO低亲和力Ip的特异性抑制作用,可能是缺血所致心室肌细胞内Na+浓度升高的主要因素之一。

胆红素对神经突触膜Na^+,K^+-ATP酶影响的实验研究

为了研究胆红素的神经毒性作用，对５９只出生２天的ＳＤ大白鼠分别予以腹腔注射不同剂量胆红素制造高胆红素血症动物模型，不连续密度梯度法分离提取脑神经元突触膜，测定Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活力。结果：随着血清胆红素浓度的逐渐增加，脑组织中胆红素沉积量也逐渐增加，神经元突触膜Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活力逐渐降低，Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活力与脑组织中沉积的胆红素量呈负相关（ｒ＝－０．３４，Ｐ＜０．０１）。提示：胆红素对Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶具有抑制作用。

热处理对回收血中肿瘤株细胞的杀伤作用和对红细胞Na^+-K^+-ATP酶活性的影响

目的探讨不同温度热处理对回收血中肿瘤细胞的杀伤作用和对红细胞Na+-K+-A1P 酶活性的影响。方法将培养好的SGC-170胃癌细胞株和LOVO大肠癌细胞株分别加入浓缩红细胞中,采用水浴法加温处理。根据加温温度不同分为5组:37℃组、42℃组、43℃组、45℃组、47℃组,加热时间均为40min。采用密度梯度离心法分离肿瘤细胞,台盼蓝染色计数存活肿瘤细胞;测定肿瘤细胞的克隆形成、DNA BrdUrd标记情况,测定红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性。结果与37℃组比较,42℃ -47℃组存活肿瘤细胞数均减少,肿瘤细胞克隆形成率减少,肿瘤细胞DNA BrdUrd标记率降低,43℃～47℃组红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性降低(P<0．01),42℃组红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性差异无统计学意义(P>0．05)。结论42-47℃温度加热40 min不能完全杀灭肿瘤细胞,43-47℃温度加热40 min对红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性还有明显抑制作用。

脂氧素A4对缺血再灌注大鼠心肌组织Na＋-K＋-ATP酶的影响及意义

目的探讨大鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）前、后使用脂氧素A4（LXA4）对心肌组织Na^＋-K^＋-ATP酶的影响及意义。方法72只SD大鼠随机分成假手术一组（C1组）、假手术二组（C2组）、MIRI一组（I／R1组）、MIRI二组（I／R2组）、MIRI前用药组（LX，组）、MIRI后用药组（LX2组），每组12只。建立大鼠MIRI模型，各组于开胸前取血（T1）、实验结束后取血（T2）测血清cTnI浓度。检测Na^＋-K^＋-ATP酶蛋白、mRNA的表达及活性改变；同时检测心肌细胞凋亡率，测定SOD活性、MDA含量，电镜下观察各组超微结构的改变。结果I／R1、LX1与C1相比，I／R2、LX2与C2相比，Na^＋-K^＋-ATP酶蛋白（α1：0．19±0．03，0．29±0．05比0．46±0．06，0．21±0．03，0．36±0．05比0．48±0．07，α2：0．20±0．02，0．32±0．04比0．54±0．05，0．23±0．03，0．38±0．04比0．56±0．06，α3：0．24±0．03，0．35±0．04比0．61±0．04，0．26±0．03，0．4l±0．04比0．59±o．04，β1：0．22±o．03，0．33±0．04比0．56±0．04，0．24±0．03，0．39±0．04比0．54±0．04），mRNA的表达下降[（0．21±0．07）×10^6，（0．55±0．28）×10^6比（5．73±1．97）×10^6，（0.20±0．09）×10^6，（1．78±0．86）×10^6比（6．21±2．22）×10^6]，活性（mmol／gprot）降低（0．73±0．04，0．95±0．11比1．38±0．15，0．75±0．04，1．19±0．12比1．37±0．13）；血清cTnI浓度（ng／L）（T2）（580．93±43．92，292．95±21．99比151．53±14．00，592．80±60．83，207．13±28．54比155．18±14．92），凋亡指数（52．52±6．36，34．55±5．65比7．48±2．09，54．75±6．29，26．53±4．60比8．54±2．76）以及SOD活性（U／mgprot）（196．84±31．82，293．59±43．10比102．55±24．77，202．48±35．40，411．71±60．44比113．36±26．95）、MDA含量（nmol／gprot）（2402．94±438．56，1548．57±238．08比472．48±190．77，2422．28±517．74，1055．48±237．44比483．26±172．05）显著增高（P〈0．05）。LX1与I／R1，LX2与I／R2相比，Na^＋-K^＋-ATP酶蛋白（α1：0．29±0．05比（0.19±0．03，0．36±0．05比0．21±0．03，0．2：0．32±0．04比0．20±0．02，0．38±0．04比（0．23±0．03，α3：0．35±0．04比0．24±0．03，0．41±0．04比0．26±0．03，β1：0．33±0．04比0．22±0．03，0．39±0．04比0．24±0．03）、mRNA的表达[（0．55±0．28）×10^6比（0．21±0．07）×10^6，（1．78±0．86）×10^6，比（0．20±0．09）×10^6]明显增加，Na^＋-K^＋-ATP酶活性（mmol／gprot）（0．95±0．11比0．73±0．04，1．19±0．12比0．75±0．04）与SOD的活性（U／mgprot）（293．59±43．10比196．84±31．82，411．7l±60．44比202．48±35．40）明显增强；同时凋亡指数（34．55±5．65比52．52±6．36，26．53±4．60比54．75±6．29）、血清cTnI浓度（ng／L）（T2）（292．95±21．99比580．93±43．92，207．13±28．54±592．80±60．83）、MDA含量（nmol／gprot）（1548．57±238．08比2402．94±438．56，1055．48±237．44比2422．28±517．74）也明显降低（P〈0．05）。LX气对缺血再灌注后心肌超微结构有明显的保护作用。结论在MIRI前、后应用LXA4能明显减轻心肌氧化损伤，上调Na^＋-K^＋-ATP酶蛋白、mRNA的表达，增强Na^＋-K^＋-ATP酶的活性，保护心肌超微结构，减少细胞凋亡，发挥其心肌保护作用。

兔角膜内皮细胞Na^+-K^+-ATP酶活性检测及其意义

目的:探讨角膜内皮细胞上Na+-K+-ATP酶的活性。方法:运用接膜联合组织块法获得原代及传代培养的兔角膜内皮细胞(RCECs),使用考马斯亮蓝试剂盒及超微量ATP酶测试盒分别测定即兴揭取组、原代7 d组、传二代5 d组的Na+-K+-ATP酶活性。结果:即兴揭取组Na+-K+-ATP酶活性平均为(0.595±0.010)U/mgprot、原代7 d组及传二代5 d组分别为(0.572±0.007)U/mgprot和(0.333±0.011)U/mgprot,任意两两组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:原代RCECs更接近在体细胞。Na+-K+-ATP酶活性定量检测,可作为评价体外培养RCECs的功能指标。

高渗盐水对大鼠缺血再灌注损伤肾组织Na^+-K^+-ATP酶活性的影响

目的探讨高渗盐水对缺血再灌注损伤肾组织Na+-K+-ATP酶活性的影响。方法 56只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和高渗盐水处理组(H组)。肾缺血再灌注损伤模型的建立:左侧肾蒂夹闭45 min后松开,分别于再灌注4 h、6 h、12 h,测定左肾系数、血清肌酐(Cr)、左肾组织Na+-K+-ATP酶(Na+-K+-ATPase)活性和丙二醛(MDA)含量。结果 H组左肾系数、血清肌酐和丙二醛明显低于IR组,而左肾组织Na+-K+-ATP酶活性明显高于IR组。结论高渗盐水预处理对实验SD大鼠缺血再灌注肾损伤有保护作用。