应激状态下大鼠胃壁细胞H^+-K^+-ATP酶活性测定及电镜酶细胞化学研究

目的:探讨应激状态下大鼠胃壁细胞H+-K+-ATP酶活性及电镜酶细胞化学染色的变化。方法:将24只SD大鼠随机分为对照组、应激组和应激+奥美拉唑(OM)组,采用水浸-束缚应激(WRS)动物模型,检测胃粘膜溃疡指数(UI)和壁细胞H+-K+-ATP酶活性,观察壁细胞超微结构变化及H+-K+-ATP酶细胞化学染色结果。结果:应激组胃粘膜UI和壁细胞H+-K+-ATP酶活性明显高于对照组(P<0.01和P<0.05),而应激+OM组UI和H+-K+-ATP酶活性明显低于应激组(P<0.01);电镜下对照组壁细胞呈静息状态,应激组壁细胞内分泌小管密集呈激活状态,而应激+OM组分泌小管明显扩张,绒毛稀少;酶细胞化学染色显示对照组壁细胞的分泌小管和顶部质膜有少量黑色点状酶反应产物沉积,应激组壁细胞的分泌小管可见多量的、密集分布的黑色点状酶反应产物,而应激+OM组分泌小管上几乎无反应产物沉积。结论:应激状态下大鼠胃壁细胞H+-K+-ATP酶活性升高,且与壁细胞超微结构改变相一致,提示胃酸是应激性溃疡发生的重要因素之一。

大鼠实验性胃溃疡自愈过程中HDC和H^+,K^+-ATP酶的表达

目的探讨胃黏膜内组氨酸脱羧酶(histidine decarboxylase,HDC)和H+,K+-ATP酶的表达与大鼠实验性胃溃疡自愈过程的关系。方法制备大鼠乙酸性胃体溃疡模型,采用逆转录聚合酶链反应和Western blot技术,观察溃疡自愈过程中大鼠胃黏膜内HDC和H+,K+-ATP酶mRNA及蛋白表达的动态变化。结果制模术后1d大鼠胃体出现明显溃疡,3d溃疡最为明显,12d溃疡基本愈合。HDC和H+,K+-ATP酶mRNA表达在制模术后1d即开始降低,术后9d恢复正常。HDC和H+,K+-ATP酶蛋白表达在制模术后也出现降低,术后6d达到最低,术后12d基本恢复正常。结论在胃溃疡自愈过程中,胃黏膜内HDC和H+,K+-ATP酶mRNA和蛋白表达下调,其作用是抑制胃酸分泌以促进溃疡愈合。

新型H^+／K^+-ATP酶抑制剂泰妥拉唑的NMR测定分析

目的:测定泰妥拉唑的分子结构,并对化合物的1H NMR和13C NMR谱峰信号进行归属分析。方法:采用一维、二维等核磁共振技术研究药物的分子结构。通过一维NOESY和二维远程1H-13C COSY技术测定分子中结构单元的连接位置。结果:通过对泰妥拉唑的结构测定,确证了该药物的分子结构。结论:目标化合物的NMR测定分析结果与泰妥拉唑的化学结构式相一致。

大鼠乙酸性胃溃疡自愈过程中HDC和H^+、K^+-ATP酶的表达

目的探讨胃黏膜内组氨酸脱羧酶(HDC)和H+,K+-ATP酶的表达与大鼠乙酸性胃溃疡自愈过程的关系。方法制备大鼠乙酸性胃体溃疡模型,采用逆转录聚合酶链反应和免疫组化法,观察溃疡自愈过程中大鼠胃黏膜内HDC和H+,K+-ATP酶mRNA及蛋白表达的动态变化。结果制模术后1d大鼠胃体出现明显溃疡,3d溃疡最为明显,12d溃疡基本愈合。胃黏膜内HDC和H+,K+-ATP酶mRNA表达在制模术后1d即开始降低,术后9d恢复正常。胃黏膜内HDC和H+,K+-ATP酶阳性细胞率及胞质平均灰度值在制模术后也出现降低,术后6d达到最低,术后12d基本恢复正常。结论在胃溃疡自愈过程中,胃黏膜内HDC和H+,K+-ATP酶表达下调,其作用是抑制胃酸分泌以促进溃疡愈合。

胃底黏膜H^+-K^+-ATP酶活性的增龄变化

背景:研究表明人胃底黏膜H^+-K^+-ATP酶表达随增龄有增高的趋势,但目前对H^+-K^+-ATP酶活性的增龄变化尚不明确。目的:探讨增龄对H^+-K^+-ATP酶活性的影响。方法:选择不同月龄的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠15只(分别为4月龄、21月龄、24月龄、27月龄、30月龄)以及不同年龄的比格犬19只(分为中青年组、低龄老年组和高龄老年组),测定胃底黏膜H^+-K^+-ATP酶活性。结果:4月龄、21月龄、24月龄、27月龄、30月龄的SD大鼠胃底黏膜H^+-K^+-ATP酶活性分别为(4.850±0.312)μmol·mg^(-1)·h^(-1)、(5.466±0.379)μmol·mg^(-1)·h^(-1)、(6.068±0.228)μmol·mg^(-1)·h^(-1)、(5.733±0.767)μmol·mg^(-1)·h^(-1)、(6.223±0.428)μmol·mg^(-1)·h^(-1),活性随增龄呈增高趋势(F=4.519,P=0.031)。中青年组、低龄老年组和高龄老年组比格犬胃底黏膜H^+-K^+-ATP酶活性分别为(11.087±4.320)μmol·mg^(-1)·h^(-1)、(8.549±3.250)μmol·mg^(-1)·h^(-1)、(12.071±2.820)μmol·mg^(-1)·h^(-1),组间酶活性差异无统计学意义(F=1.339,P=0.290)。结论:大鼠以及比格犬胃底黏膜H^+-K^+-ATP酶活性随增龄无下降,甚至有增高的趋势。

H^+、K^+-ATP酶的分子生物学研究进展及在药物研究中的应用

H+,K+-ATP酶抑制剂是胃及十二指肠溃疡的一类重要的治疗药物,我们曾对这类药物的研究进展做过综述[1].近年来,随着生物技术特别是分子生物学和生物信息学的发展,人们对H+,K+-ATP酶从分子水平的认识越来越清楚,特别是对药物和酶的作用位点的认识,必将推动H+,K+-ATP酶抑制剂有更新的发展.

盐度胁迫对彩虹明樱蛤存活、抗氧化酶和Na^(+)/K^(+)-ATP酶活性的影响

为探究彩虹明樱蛤(Moerella iribescens)对盐度胁迫的适应能力和调节机制,对其进行急性盐度胁迫实验,在盐度5~50之间设定10个盐度梯度(5,6,8,11,14,18,23,30,39,50),观察死亡情况。结果显示,盐度胁迫96 h后,盐度50组死亡率为100%,盐度39、30、23、6、5死亡率分别为43.3%、6.7%、3.3%、1.7%、8.3%,而盐度8~18之间的4个组中未发现死亡个体。根据急性胁迫实验结果设置5个盐度梯度(6、12、18、24、30),测定0、24、48、72、96 h鳃和消化腺超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和Na^(+)/K^(+)-ATP酶活性变化。结果显示,在同一盐度胁迫下,彩虹明樱蛤鳃和消化腺的SOD、CAT、GSH-Px和Na^(+)/K^(+)-ATP酶活性随时间的变化呈先上升后下降并趋于稳定的变化趋势,不同盐度组SOD、CAT和GSH-Px活性在24 h或48 h达到高峰,不同盐度组Na^(+)/K^(+)-ATP活性在48 h或72 h达到高峰。研究表明,彩虹明樱蛤的适宜盐度为8~18,3种抗氧化酶对盐度胁迫响应时间短于Na^(+)/K^(+)-ATP酶。研究从生存适应和应激相关酶活性角度探讨了彩虹明樱蛤对盐度的响应,可为其养殖和保育提供科学依据。

生长抑素及其特异受体激动剂对离体壁细胞H^+-K^+-ATP酶α亚基基因表达的影响

背景:生长抑素对机体的几乎所有生理性内、外分泌反应均有抑制作用。其生物活性是通过与靶细胞上特异受体的结合而实现的。目前发现了5种生长抑素受体的亚型,受体亚型间对配体结合的亲和力不同,井先后合成广各种亚型的特异激动剂,这一特点具有重要的生理、药理学意义。

H^+/K^+-ATP酶抑制剂的研究进展

介绍了抑酸药物H+ /K+ ATP酶抑制剂的研究情况和发展方向 ,并对已经报道的H+ /K+

H^+/K^+-ATP酶抑制剂苯并咪唑类衍生物的研究Ⅱ

设计合成了 7个未见文献报道的苯并咪唑类衍生物 ,经质谱、核磁共振氢谱和元素分析确定了结构 .初步药理筛选实验表明 :化合物 (3)和 (5 )

H^+,K^+-ATP酶抑制剂的研究——苯并咪唑衍生物的合成及其药理活性筛选

根据H+,K+ ATP酶抑制剂的作用机理 ,设计并合成了 9个未见文献报道的苯并咪唑衍生物 ,药理试验显示均有一定活性 .

奥曲肽联合酚磺乙胺治疗上消化道出血的临床疗效及其对H^(+)-K^(+)-ATP酶活性的影响

目的探讨奥曲肽联合酚磺乙胺治疗上消化道出血的临床疗效及其对氢-钾离子-三磷酸酰胺酶(H^(+)-K^(+)-ATP酶)活性的影响。方法选取2020年1月-2021年6月井冈山市第二人民医院收治的上消化道出血患者60例,按照随机数字表法分为对照组(n=30)与观察组(n=30)。对照组予以酚磺乙胺注射液,观察组在对照组治疗基础上予以奥曲肽注射液,2组均持续治疗5 d。比较2组主要症状(呕血、腹痛、发热、黑便)消失时间,治疗前及治疗5 d后凝血功能指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白稳定因子(FSF)、纤维蛋白原(Fib)]、血液指标[血小板计数(PLT)、血细胞比容(HCT)]、H^(+)-K^(+)-ATP酶,并观察2组药物不良反应发生情况。结果观察组患者呕血、腹痛、发热、黑便消失时间短于对照组(P<0.05)。治疗5 d后,2组患者PT、APTT、TT短于治疗前,FSF、Fib高于治疗前,且观察组患者PT、APTT、TT短于对照组,FSF、Fib高于对照组(P<0.01)。治疗5 d后,2组患者PLT、HCT高于治疗前,H^(+)-K^(+)-ATP酶低于治疗前,且观察组患者PLT、HCT高于对照组,H^(+)-K^(+)-ATP酶低于对照组(P<0.01)。观察组患者不良反应总发生率为16.67%,与对照组的10.00%比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.144,P=0.704)。结论奥曲肽联合酚磺乙胺治疗上消化道出血的临床疗效确切,可快速缓解患者的临床症状,有效改善凝血功能,抑制H^(+)-K^(+)-ATP酶活性,且安全性较高。

盐度驯化对史氏鲟鳃Na^+/K^+-ATP酶活力、血清渗透压及离子浓度的影响

对史氏鲟在盐度驯化过程中鳃Na+/K+-ATP酶活力、血清渗透压及血清离子(Na+、K+、Cl-)浓度进行了检测和分析,探讨了史氏鲟驯化过程中血清渗透压调节机制。研究表明:史氏鲟在不同盐度(10、20、25)下经过驯化,鳃Na+/K+-ATP酶活力显著高于对照组鳃Na+/K+-ATP酶活力(P<0.05),其活力是对照组的2~2.5倍。驯化过程中,3种不同盐度阶段下鳃Na+/K+-ATP酶活力首先表现为下降,随着驯化时间的延长,活力逐渐增加,最后下降并趋于平稳。血清渗透压也随盐度的增加而上升,盐度10时最高,达到(328.77±26.78)mmol.kg-1,此后逐渐下降并稳定在290mmol.kg-1左右,略高于淡水中血清渗透压。不同盐度下,血清渗透压和鳃Na+/K+-ATP酶活力的变化趋势相同。3种不同盐度下史氏鲟血清K+浓度平均值保持在3.00~3.30mmol.L-1之间,与对照组相比无显著差异(P>0.05)。3种盐度下血清Na+和Cl-浓度变化趋势基本一致,随着盐度的增高而增高,盐度20时达到最高。盐度20以下血清Na+和Cl-含量没有显著差异(P>0.05)。史氏鲟血清渗透压调节可以分为3个阶段:一是应激反应阶段,主要表现为鳃Na+/K+-ATP酶活力受到抑制,陡然下降;二是主动调节阶段,鳃Na+/K+-ATP酶被重新激活,且活力逐渐上升;三是适应阶段,鳃Na+/K+-ATP酶趋于平稳。

外源多胺对低氧胁迫下黄瓜幼苗根系生长及H^+-ATP酶和H^+-焦磷酸酶活性的影响

采用营养液水培方式,研究了根际低氧胁迫下外源多胺对黄瓜幼苗植株根系生长,内源多胺含量与质膜H+-ATP酶、液泡膜H+-ATP酶和焦磷酸酶活性的影响。结果表明,根际低氧胁迫显著抑制黄瓜幼苗根系的生长,外源Put(腐胺)和Spd(亚精胺)可缓解低氧胁迫对根系的生长抑制,多胺主要以Spd的形式发挥促进性的生理作用,Put通过转化为Spd发挥作用;低氧胁迫下黄瓜根系内源多胺含量略有提高,外源多胺处理可增加内源多胺的含量;低氧胁迫下外源Put和Spd处理后质膜H+-ATP酶活性显著提高,外源多胺对黄瓜根系液胞膜H+-ATP酶和H+-焦磷酸酶活性没有明显影响,说明低氧胁迫下外源多胺主要通过提高质膜H+-ATP酶活性而发挥生理作用。

卵磷脂对花尾胡椒鲷幼鱼Ca^(2+)-ATP酶和Na^+,K^+-ATP酶活性的影响

为探索卵磷脂影响幼鱼生长存活的作用机制 ,采用不同卵磷脂添加量的配合饲料投喂花尾胡椒鲷(Plectorhynchuscinctus)幼鱼 ,采用孔雀绿比色法同步测定幼鱼的Ca2 + ATP酶和Na+,K+ ATP酶活性。结果表明 ,饲料中添加适量卵磷脂可显著提高花尾胡椒鲷幼鱼Ca2 + ATP酶和Na+,K+ ATP酶活性 ,且卵磷脂含量为3 %的配合饲料投喂的花尾胡椒鲷幼鱼Ca2 + ATP酶活性最高 ,而卵磷脂含量为2 %的Na+,K+

NaCl对咸海卡拉白鱼血清离子、皮质醇和组织Na^+,K^+-ATP酶活性的影响

将卡拉白鱼(Chalcalburnus chalcoides aralensis)在分别含NaCl 0,2,4,6,8 g/L的水体中饲养30 d后发现,NaCl质量浓度2 g/L和4 g/L组鱼相对增重率与对照组相比无显著性差异,生长良好;6 g/L和8 g/L组鱼相对增重率低于对照组(P<0.05),生长受抑制。血清渗透压随盐度升高而增高(P>0.05);NaCl 4,6,8 g/L组血的Na+,Cl-浓度高于对照组(P<0.05);6 g/L和8 g/L组血K+浓度低于对照组(P<0.05);鳃Na+,K+-ATP酶活性除8 g/L组下降外,其余各组鱼均高于对照(P<0.05);血清皮质醇水平随NaCl的升高而呈线性增加的趋势(P>0.05)。

喹乙醇对鲤鳃组织Na^+、K^+-ATP酶活性及血浆生化指标的影响

用含不同喹乙醇剂量的饲料饲喂健康鲤鱼种,研究饲料中不同喹乙醇剂量对鲤体成分含量、血浆生化指标以及鲤鳃组织Na+、K+ ATP酶活性的影响,探讨喹乙醇对鲤的生化毒性。试验分成6 个喹乙醇处理组(0、200、400、800、1 600、3 200 mg/kg),试验期60 d。试验结束时分别从各组中采血、取全鱼样和鱼鳃样,进行不同指标测试。结果表明,喹乙醇使鱼体脂肪含量轻度上升,使灰分沉积量显著降低,并呈现剂量-反应关系。与对照组比较,在较高喹乙醇剂量下,谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)活性降幅较大,血浆中葡萄糖(GLU)、胆固醇(CHO)、总胆红素(T-B)、直接胆红素(D-B)、高密度脂蛋白(HDL)、白蛋白(ALB)、K+、Ca2+、P含量升高, 肌酐(CRE)和CO2含量降低,其他测定指标变化不明显。鳃组织中Na+、K+ ATP酶活性随喹乙醇剂量的升高而呈逐渐下降的趋势,呈现剂量效应关系,喹乙醇剂量达1 600 mg/kg以上时,Na+、K+ ATP酶活性显著降低。结论:1 600 mg/kg以上的喹乙醇剂量可以明显干扰鲤的正常生化代谢功能。

辣椒碱对小菜蛾的驱避活性及其体内谷胱甘肽-S-转移酶和Na^+,K^+-ATP酶活性的影响

采用常规生测方法和酶活力测定方法,初步研究了辣椒碱对小菜蛾Plutella xylostella L.的产卵忌避和拒食作用,及其对小菜蛾体内谷胱甘肽-S-转移酶、Na+,K+-ATP酶活性的影响,以期阐明辣椒碱对害虫的作用机制。结果表明,辣椒碱对小菜蛾表现出较强的产卵忌避活性和拒食活性。在6.25×104mg/L浓度下,处理24h辣椒碱对小菜蛾的非选择性产卵忌避率达96.55%,选择性产卵忌避率为84.30%;在相同浓度下,处理48h辣椒碱对小菜蛾的非选择性拒食率达81.47%,选择性拒食率为69.69%。另外,经1.25×105mg/L辣椒碱不同时间处理后,小菜蛾体内的谷胱甘肽-S-转移酶酶活力和Na+,K+-ATP酶活力与对照相比均产生了波动,处理18h时小菜蛾体内GSTs活力最高,为152.01U·mg-1pro·min-1,处理1h时小菜蛾体内Na+,K+-ATP酶活力最高,为19.99U·mg-1pro·min-1。结果说明辣椒碱能够影响小菜蛾产卵和取食行为,并且对其体内的酶系也产生了影响。

家兔循经组织不同温度改变对Na^+/K^+-ATP酶活性及P物质含量的影响

目的 :观察循经温度现象与Na+/K+ ATP酶活性变化及血管调控物质SP功能活动的关系。方法 :①用红外热像技术观察循经出现的温度变化。② )用酶学方法测定Na+/K+ ATP酶活性 ,放射免疫方法测定P物质 (SP )含量。结果 :①左后肢外侧和右后肢内侧循经高温区组织Na+/K+ ATP酶活性均高于对照区组织 (P <0 .0 5、P <0 .0 1 ) ;②左后肢外侧和右后肢内侧循经高温区组织的SP含量较对照区组织有升高趋势 ,但均无统计学差异 (P >0 .5,>0 .1 )。结论 :①家兔循经出现温度较高组织的Na+/K+ ATP酶活性较非高温区组织的代谢活跃 ;②家兔循经高温区组织P物质水平有一定增高 。