MiR-21-5p通过下调电压门控钾离子通道Kv1.1表达减轻大鼠三叉神经痛

目的:三叉神经痛(trigeminal neuralgia,TN)是一种临床上常见的神经病理性疼痛。电压门控性钾通道(voltage-gated potassium channel,Kv)已被证实参与TN的发生、发展,但具体机制仍不明确。微RNA(microRNA,miR)可通过调节三叉神经节(trigeminal ganglion,TG)上Kv通道的表达及神经元兴奋性,参与神经病理性疼痛。本研究旨在探索TN模型中TG上Kv1.1和miR-21-5p的关系,评估miR-21-5p是否对Kv1.1有调控作用,为TN的治疗提供新的靶点。方法:将48只SD大鼠随机分为6组:1)假手术组(sham组,n=12),大鼠仅在术侧切口缝合,不结扎神经;2)Sham+agomir NC组(n=6),sham大鼠通过脑立体定位注射方法于术侧TG微量注射agomir NC;3)Sham+miR-21-5p agomir组(n=6),sham大鼠通过脑立体定位注射方法于术侧TG微量注射miR-21-5p agomir;4)TN组(n=12),采用铬肠线慢性缩窄性眶下远端神经损伤(chronic constriction injury of the distal infraorbital nerve,dIoN-CCI)法构建TN大鼠模型;5)TN+antagomir NC组(n=6),TN大鼠通过脑立体定位注射方法于术侧TG微量注射antagomir NC;6)TN+miR-21-5p antagomir组(n=6),TN大鼠通过脑立体定位注射方法于术侧TG微量注射miR-21-5p antagomir。检测术后各组大鼠面部机械痛阈变化。采用蛋白质印迹法和实时反转录聚合酶链反应检测术后大鼠术侧TG中Kv1.1和miR-21-5p的表达情况。利用双荧光素酶报告基因确定Kv1.1和miR-21-5p是否存在靶标关系,即miR-21-5p是否可以直接影响KCNA1的3'端非翻译区(3'-untranslated region,3'-UTR)。通过免疫荧光法测定,对脑立体定位注射的效果进行评价,随后分别将miR-21-5p的类似物(agomir)和agomir NC通过脑立体定位仪注射至sham组大鼠TG内,使miR-21-5p过表达;向TN组大鼠TG内分别注射miR-21-5p的抑制剂(antagomir)和antagomir NC,抑制miR-21-5p表达。观察给药前后大鼠行为学变化,检测干预后大鼠TG内miR-21-5p和Kv1.1表达的变化。结果:与基础痛阈值相比,TN组大鼠在术后第5至15天,面部机械痛阈值显著降低(P<0.05),sham组大鼠面部机械痛阈值稳定在正常水平,证明dIoN-CCI模型构建成功。与sham组相比,TN组TG中Kv1.1 mRNA和蛋白质表达均下调(均P<0.05),miR-21-5p的表达上调(P<0.05)。双荧光素酶报告结果显示:与转染mimic NC和野生型KCNA1(KCNA1 WT)组相比,共转染6 nmol/L或20 nmol/L的rno-miR-21-5p mimics的KCNA1 WT组的荧光素酶活性显著降低(P<0.001);与6 nmol/L rno-miR-21-5p mimics共转染组相比,较大剂量(20 nmol/L)的rno-miR-21-5p mimics共转染组的荧光素酶相对活性显著降低(P<0.001)。免疫荧光法结果显示通过脑立体定位可以将药物准确注入TG。TN组抑制miR-21-5p表达后,大鼠面部机械痛阈升高,TG中Kv1.1 mRNA及蛋白质的表达水平升高;sham组过表达miR-21-5p后,大鼠面部机械痛阈降低,TG中Kv1.1 mRNA及蛋白质的表达降低。结论:Kv1.1和miR-21-5p均参与TN的发生、发展,miR-21-5p可以通过结合KCNA13'-UTR来调控Kv1.1的表达,进而影响TN。

超极化激活的环核苷酸门控通道1参与七氟烷诱导的顺行性遗忘作用的机制研究

目的旨在探讨超极化激活的环核苷酸门控通道1(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channel 1,HCN1)在七氟烷诱导的顺行性遗忘中的作用机制。方法采用雄性SPF级C57BL/6J野生型小鼠(WT组,n=60)和HCN1基因全身敲除(HCN1-/-)小鼠(HCN1-/-组,n=60)。将两组小鼠分别暴露于不同浓度的七氟烷(0%、0.1%、0.2%、0.4%、0.6%和0.8%)下,每个浓度10只小鼠。随后进行条件性恐惧实验,计算两组小鼠七氟烷抑制条件性恐惧记忆的半数效应浓度(median effective concentration,用EC50表示)。采用全细胞膜片钳技术记录0.125mmol/L七氟烷浓度灌流液对转染HCN1的人胚肾293细胞(HEK293-HCN1)上HCN1电流的影响,比较七氟烷处理前(Control组)和处理后(Sevoflurane组)HCN1电流的变化。结果与-/-WT组小鼠相比,HCN1组小鼠在七氟烷抑制场景恐惧记忆和声音恐惧记忆中的EC50值升高,差异有统计学意义(场景恐惧记忆:0.18%比0.26%,P<0.001;声音恐惧记忆:0.47%比0.49%,P<0.001)。全细胞电生理记录显示,与基础值相比,0.125mmol/L七氟烷抑制HEK293-HCN1细胞在﹣90~﹣140mV范围内的电流幅度(P值均<0.05),并增加了半最大激活电压(V1/2a)值[(﹣108±2.9)mV比(﹣100.1±3.0)mV,(P<0.001)]。结论HCN1电流的抑制可能参与了七氟烷诱导的顺行性遗忘作用。

电压门控性阳离子通道的分子结构与机能

通过eDNA克隆和测序,已揭示了电压门控性阳离子通道的一级结构,对其二、三级结构也进行了探讨。已知这类通道的主亚单位由四个同源结构域组成,在空间上以近似对称方式排列,中间形成选择性离子孔道。每一同源重复体含6个跨膜片断(S1～S6),还有两个附加片段SS1和SS2位于S5和S6之间。S4能“感受”跨膜电位变化,使带正电荷的残基向外旋转移动,产生瞬时门控电流,引起构型变化使通道打开。通道的失活则与重复体Ⅲ、Ⅳ之间带正电荷的胞浆侧结构有关。它在去极化构型变化之后产生继发的变化,从胞浆侧阻断已打开的通道口。SS1和SS2则与通道的选择性和门控机制有关。

重金属调控非选择性阳离子通道生理功能的研究进展

非选择性阳离子通道(NSCCs)是生物膜上能同时允许不通价态的阳离子通过的多种通道蛋白的集合体,参与了细胞的营养吸收、膨压控制、信号传导等许多生理过程。NSCCs能够快速转运Ca^(2+)、K^+、Mg^(2+)等细胞代谢必需的营养元素,也能转运有毒重金属离子。了解重金属离子与NSCCs的互作关系,对于调控植物对污染环境中有害重金属的吸收和转运过程具有重要意义。本文综述了重金属离子类型和浓度影响NSCCs门控机制的研究进展,为探索新型离子通道调控剂及其调控机理提供参考。

15-羟廿碳四烯酸对缺氧性肺血管收缩电压门控性K^+通道的作用机制

缺氧性肺血管收缩(HPV)是机体的一种保护功能,但其机制至今尚不完全清楚。15-羟廿碳四烯酸(15-Hydroxyei-cosatetrienoic acid,15-HETE)是15-脂质氧化酶(15-LO)代谢花生四烯酸(AA)的产物,其对肺动脉平滑肌细胞(PSMVC)电压门控性K+通道(Kv)有抑制作用,使细胞去极化,细胞内钙离子浓度增加,进而导致细胞收缩,产生HPV,故15-HETE可能是形成HPV的始发介质。

电压门控性钾通道在急性髓系白血病细胞增殖及凋亡中的作用

目的研究电压门控性钾通道在急性髓系白血病(acute myelocytic leukemia,AML)细胞增殖及凋亡中的作用。方法通过台盼蓝拒染法检测AML细胞株THP-1生存活力;应用Annexin V/PI双标法和DAPI荧光染色法检测细胞凋亡;应用流式细胞术检测[Ca2+]i变化。结果电压门控性钾通道抑制剂4-氨基吡啶(4-aminopyrine,4-AP)作用72 h后,THP-1细胞生存活力明显下降,IC50为3.68 mmol/L。药物作用72 h后,DAPI荧光染色示4-AP 2 mmol/L组、4 mmol/L组细胞凋亡率分别为(14.38±1.82)%、(32.91±3.47)%,与对照组(6.35±0.29)%比较差异显著(P<0.05);Annexin V/PI双标记法示4-AP 2 mmol/L组、4 mmol/L组细胞凋亡率分别为(16.89±2.49)%、(38.26±4.03)%,与对照组(6.06±0.32)%比较差异均显著(P<0.05)。2及4 mmol/L 4-AP作用1 min后,THP-1细胞内Fluo-3/AM荧光强度分别为(378.36±10.84)、(391.31±24.78),与对照组(57.24±7.18)相比具有显著性差异(P<0.05)。结论电压门控性钾通道阻滞剂4-AP抑制AML细胞生存活力并可诱导其凋亡,提示电压门控性钾通道可能是AML治疗的潜在靶点。

家族性窦性心动过缓与心脏起搏离子通道突变相关

We found that sinus bradycardia in members of a large family was associated with a mutation in the gene coding for the pacemaker HCN4 ion channel. Pacemaker channels of the sinoatrial node generate spontaneous activity and mediate cyclic AMP(cAMP)-dependent autonomic modulation of the heart rate. The mutation associated with bradycardia is located near the cAMP-binding site; functional analysis found that mutant channels respond normally to cAMP but are activated at more negative voltages than are wild-type channels. These changes, which mimic those of mild vagal stimulation, slow the heart rate by decreasing the inward diastolic current. Thus, diminished function of pacemaker channels is linked to familial bradycardia.

澜沧江-湄公河流域埃及伊蚊电压门控钠离子通道击倒抗性基因研究进展

埃及伊蚊是澜沧江-湄公河流域登革热、基孔肯雅热、寨卡病毒病等疾病的重要传播媒介,目前普遍对拟除虫菊酯类杀虫剂产生了抗药性。击倒抗性(kdr)是蚊虫对拟除虫菊酯杀虫剂产生抗性主要机制之一,埃及伊蚊电压门控钠离子通道各位点kdr基因突变在澜沧江-湄公河流域国家分布较为明显,且各国kdr突变频率差异显著。本文就近年来澜沧江-湄公河流域埃及伊蚊kdr基因突变检测方法和分布特点研究进展进行综述,为该地区杀虫剂敏感性监测及其管理提供参考。

Kv3．4通道参与15-羟二十碳四烯酸诱导的大鼠肺动脉收缩

通过组织浴槽血管环方法观察Kv3．4通道特异阻断剂BDS-Ⅰ对15-羟二十碳四烯酸(15-hydroxyeicosatetraenoic acid,15- HETE)收缩肺动脉血管的影响:通过酶法分离、培养Wistar大鼠肺动脉血管平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells, PASMCs),RT-PCR和Western blot技术观察15-HETE对大鼠PASMCs上Kv3．4通道表达的影响,以探讨Kv3．4通道在15- HETE收缩肺动脉过程中的作用。结果如下:(1)15-HETE以浓度依赖方式使肺动脉环张力增加,对缺氧组大鼠肺动脉环张力作用更为明显,与正常对照组相比差异显著:(2)除去肺动脉内皮后,15-HETE引起血管收缩的强度较内皮完整时增强,呈剂量依赖性收缩反应;(3)阻断Kv3．4通道可抑制15-HETE收缩肺动脉;(4)15-HETE下调PASMCs膜上Kv3．4通道 mRNA及蛋白质表达。上述观察结果提示Kv3．4通道参与由15-HETE引起的缺氧肺动脉血管收缩(hypoxic pulmonary vasoconstriction,HPV)。

伊伐布雷定对慢性心力衰竭伴室性心律失常兔模型HCN通道的影响

目的 观察伊伐布雷定对慢性心力衰竭伴室性心率失常兔模型超级化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN)的影响.方法 纳入由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供的80只健康成年大白兔为研究对象,随机分为正常对照组(20只,予以0.9%生理盐水)和慢性心力衰竭组(60只,经耳缘静注异丙肾上腺素0.3 mg·kg-1·d-1).待慢性心衰组造模满意后将BW-200生理无线遥测心电系统芯片植入兔皮下,将其分为模型组(30只,0.9%生理盐水,洗胃,持续2周)和伊伐布雷定组(30只,伊伐布雷定7 mg·kg-1·d-1,持续2周).分别于起搏前(0周)、起搏4周、6周(药物干预2周后),观察四组心率(HR)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室射血分数(LVEF)、心室有效不应期(ERP)、ERP离散度(dERP)、室性心律失常(VA)诱发率、心室颤动阈值(VFT)变化,并分析HCN2、HCN4通道表达水平.结果起搏4、6周后,慢性心力衰竭组HR、LVEDD、LVESD、ERP、dERP、VA诱发率均显著高于起搏前及正常对照组(P<0.05),LVEF显著低于起搏前及正常对照组(P<0.05);其中,起搏4周后,伊伐布雷定组HR、LVEDD、LVESD、LVEF、ERP、dERP、VFT较模型组均未见统计学差异(P>0.05);起搏6周后,伊伐布雷定组HR、LVEDD、ERP、VA诱发率显著低于模型组(P<0.05),VFT显著高于模型组(P<0.05),但LVESD、LVEF、dERP较模型组均未见统计学差异(P>0.05).慢性心力衰竭组HCN2通道和HCN4通道的mRNA、microRNA-1、microRNA-133及蛋白表达水平均显著高于正常对照组(P<0.05);其中,伊伐布雷定组上述指标均显著低于模型组(P<0.05).结论 伊伐布雷定能有效降低慢性心力衰竭兔心率,缩短ERP值,诱导慢性心力衰竭兔室性心律失常诱发率下降,改善心室颤动阈值,并降低慢性心力衰竭兔心室肌HCN2通道和HCN4通道表达水平,有助于指导慢性心力衰竭伴室性心率失常临床治疗.

Kv通道亚型在15-HETE收缩肺动脉过程中的作用

目的从组织功能及细胞分子水平研究电压门控型钾通道(Kv通道)亚型在15-羟化二十碳四烯酸(15-HETE)致大鼠肺动脉收缩过程中的作用。方法采用组织浴槽血管环法,使用Kv通道阻断剂,确定受15-HETE调控大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)膜上Kv亚型;使用RT-PCR和W estern b lotting技术观察受15-HETE调控PASMCs膜上Kv亚型。结果阻断Kv1.1,Kv1.2,Kv1.3和Kv1.6通道并不影响15-HETE诱导肺动脉血管收缩;15-HETE不影响PASMCs膜上Kv1.1和Kv1.2通道蛋白质表达;15-HETE下调PASMCs膜上Kv1.5和Kv2.1通道mRNA和蛋白质表达。结论缺氧可能是通过15-HETE这一介导因子抑制Kv1.5和Kv2.1通道,减少PASMCs膜上功能性Kv1.5和Kv2.1通道数量,导致PASMCs收缩。

miR-1调控靶基因HCN4在风湿性心脏病心房颤动中的作用

目的通过检测风湿性心脏病(风心病)心房颤动(房颤)患者右心耳组织miR-1及其靶基因HCN4表达,探讨miR-1参与风心病房颤的可能机制。方法 36例风心病患者根据是否存在房颤,分为房颤组(AF组)和窦性心律组(SR组),术前均进行心脏彩超、心电图检测,术中取右心耳组织,应用荧光定量PCR技术检测miR-1及靶基因HCN4的表达,免疫组化、Western Blot方法检测HCN4蛋白表达,应用膜片钳技术检测右心耳心肌细胞起搏电流(If)。结果 AF组miR-1基因表达小于SR组[(0.005 0±0.000 7)vs.(0.009 4±0.002 5),P <0.05];而HCN4基因表达水平AF组高于SR组[(0.255 2±0.019 4)vs.(0.159 2±0.013 1),P <0.05];免疫组化AF组HCN4蛋白表达较窦性心律组增强;Western Blot检测HCN4蛋白表达水平AF组高于SR组[(1.170 2±0.055 98)vs.(0.360 6±0.017 78),P <0.05];右心耳心肌细胞起搏电流改变,AF组半稳态激活电压(V1/2)为(-88±5.9)mV,稳态激活曲线斜率(K)为(8.2±1.8);SR组V1/2为(-97±4.5)mV,K为(11.4±2.6)。结论风心病房颤患者miR-1表达降低,调控HCN4基因、蛋白表达增高,导致房颤心肌细胞起搏电流的改变,可能参与风心病房颤的发生。

儿童原发性肾病综合征血清PLCE1、TRPC6、CD2AP、ACTN4检测的意义

目的探讨检测外周血磷脂酶CE1(PLCE1)、瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)、CD2相关蛋白(CD2AP)、α-辅肌动蛋白4(ACTN4)在儿童原发性肾病综合征(PNS)、激素敏感型肾病综合征(SSNS)、激素耐药型肾病综合征(SRNS)、激素依耐型肾病综合(SDNS)及不同病理类型表达的临床意义。方法采集原发性肾病综合征外周血清标本,采用双抗体夹心ELISA法检测样本中目PLCE1、TRPC6、CD2AP、ACTN4表达浓度。结果PNS组、SSNS组、SRNS组、SDNS组PLCE1、TRPC6、CD2AP、ACTN4表达与健康组比较降低,差异均有统计学意义(P<0.05),SRNS组、SDNS组表达与SSNS组比较降低,差异均有统计学意义(P均<0.05),SRNS组与SDNS组比较差异均无统计学意义(P>0.05);FSGS组、IgAN组血清PLCE1、TRPC6、CD2AP、ACTN4表达与MCD组比较降低,差异均有统计学意义(P<0.05),FSGS组、IgAN组分别与MsPGN组、MPGN组比较降低,差异均有统计学意义(P<0.05),MsPGN组与MPGN组比较差异无统计学意义(P>0.05),FSGS组与IgAN组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论①血清中PLCE1、TRPC6、CD2AP、ACTN4作为足细胞裂孔隔膜分子、足细胞信号分子、骨架分子等正常表达,对维系肾小球滤过膜的功能完整性起关键作用,一旦表达异常降低,可能导致肾病综合征发生、对激素治疗耐药或依耐;②血清中PLCE1、TRPC6、CD2AP、ACTN4表达与肾病综合征病理类型有关;③临床上检测血清中PLCE1、TRPC6、CD2AP、ACTN4表达水平对判断是否为难治性肾病、病理类型、指导用药及预测预后具有重大意义。

大鼠背根神经节神经元H^＋-门控离子通道电流分型及其基因型组成

目的根据大鼠背根神经节（DRG）神经元所记录的天然H^＋-门控离子通道电流特征将其进行分型，并探讨各型天然H^＋-门控离子通道与其基因型组成的酸敏感离子通道（ASICs）亚基间的相关性。方法采用全细胞膜片钳技术记录急性分离的大鼠DRG神经元H^＋-门控离子通道电流，结合单细胞免疫组化方法检测其基因型组成的ASICs亚基。结果依据H^＋-门控离子通道电流的激活及失活动力学、电流形状特点、细胞直径大小、pH依赖性等及其它参数可将H^＋-门控离子通道电流分为T-型、S．型、B-型和O-型。测定了四种类型H^＋-门控离子通道电流的激活（10%-90％21升时间）与细胞直径大小的相关性，其中T-型、B-型和O-型三种类型的激活动力学与细胞直径有关（r=0．69，P〈0．01），而S-型电流与细胞直径无关（r=0．12，P〉0．05）。对S-型电流（pH5．0）的浓度一效应关系进行了分析，其阈值在pH6．0左右，最大浓度〉2．0；在pH4．5-2．5之间出现-外向电流，浓度-效应曲线呈钟形。提供了Hi门控离子通道电流表型与其基因型的关系：T-型为ASIC1，ASIC2a，ASIC3；S．型为ASIC2a，ASIC4；B-型为ASIC1，ASIC3；O-型为ASIC1．ASIC3和ASIC4。结论大鼠DRG神经元天然H^＋-门控离子通道随着其亚基组构的改变．其电流特征也发生改变，推测系通道内向移动离子的选择性发生改变所致：其中T-型、B-型和O-型受体的神经元分布与其胞体直径相关。

大鼠背根神经节神经元S-型与O-型H^＋ -门控离子通道外向电流研究

目的在前期工作的基础上，从药理学敏感性的角度出发，初步探讨S-型与O-型H^＋ -门控离子通道外向电流的离子成分及其药理学特性。方法采用全细胞膜片钳技术记录急性分离的大鼠背根神经节神经元H^＋ -门控离子通道电流，测定S-型与O-型离子通道外向电流的药理学特性，分析其成分组成。结果高浓度的胞外K^＋、CsCl、BaCl2、4-氨基吡啶（4-AP）、四乙基溴化铵（TEABr）、CdCl2、阿米洛利等抑制S-型与O-型H^＋ -门控离子通道外向电流，而Ca^2＋络合剂EGTA和高浓度的胞外Ca^2＋则增强该外向电流；胞外Na^＋浓度的变化对该外向电流无明显影响。结论S-型和O-型H^＋ -门控离子通道电流的外向电流离子成分可能为钙依赖性钾电流。

氯化铯对大鼠学习记忆功能及突触可塑性的影响

目的探讨氯化铯对大鼠学习记忆功能及突触可塑性的影响。方法大鼠腹腔注射氯化铯30d(120mg.kg-1,每天一次)建立一种动物模型,然后运用在体电生理技术记录该模型大鼠海马CA3区群峰电位,给予高频刺激后观察诱发长时程增强(LTP)的情况,同时观察对照组大鼠(腹腔注射生理盐水)的LTP诱导情况;运用Morris水迷宫检测不同组大鼠空间学习记忆能力;在电镜下观察各组动物海马CA3区超微结构的改变;运用高效液相色谱法测定不同组大鼠海马组织内兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸的含量。结果①氯化铯组的LTP诱导率为33.33%,对照生理盐水组为100%;②Morris水迷宫检测发现氯化铯组学习记忆能力受到一定程度的损害。学习训练结束时,氯化铯造模组较对照组逃避潜伏期延长;空间探索实验发现,氯化铯造模组、生理盐水组在原平台所在象限穿梭时间占探索总时间百分比分别为(14.76±2.87)%、(38.58±6.99)%;③电镜下观察到经高频刺激后生理盐水组CA3区突触结构中突触前膜的突触小泡明显比正常大鼠未经过高频刺激组增多,而氯化铯组经过高频刺激后CA3区突触结构中突触前膜的突触小泡较生理盐水组经过高频刺激后突触小泡的数量显著减少;④海马组织氨基酸含量的改变:NS组大鼠经高频刺激后,海马组织谷氨酸和γ-氨基丁酸、天冬氨酸、甘氨酸以及牛磺酸的含量均明显高于未经过高频刺激的正常对照组(Normal组)(P值均小于0.05),而CsCl组大鼠经过高频刺激后上述5种氨基酸含量均少于经过高频刺激后的NS组,但有谷氨酸、γ-氨基丁酸和甘氨酸有显著性差异(P<0.05),而天冬氨酸和牛磺酸含量则没有显著性差异。结论氯化铯可使大鼠的空间学习记忆能力受到明显损害,而且阻碍LTP现象的诱导,其作用机制可能为通过阻断超极化激活-环核苷酸门控的起搏阳离子通道(HCN)而发挥作用。

肌阵挛-站立不能性癫痫的临床特征及其电压门控性钠通道α1亚基基因突变检测

目的探讨肌阵挛-站立不能性癫痫（MAE）的临床特点、药物疗效及可能的分子遗传学机制。方法根据2001年国际抗癫痫联盟癫痫综合征分类标准对自2006年至2008年在广州医学院第二附属医院神经内科就诊的MAE患者进行诊断，收集患者的临床资料及外周血DNA，采用高效液相色谱分析和直接测序法对电压门控性钠通道α1亚基（SCNIA）基因突变进行筛查，并对其临床治疗情况随访1年以上。结果共收集10例MAE患者，其中散发8例，有热性惊厥或癫痫家族史者2例；起病年龄介于5～39个月间；有多种全面性发作形式；2例曾出现癫痫持续状态；起病后精神发育迟滞者7例。对其中8例患者进行SCNIA基因突变筛查，均未发现突变。丙戊酸、氯硝安定和左乙拉西坦疗效最好．部分患者托吡酯和拉莫三嗪治疗亦有效。结论MAE是少见的癫痫综合征，分子遗传学机制不明，丙戊酸、氯硝安定和左乙拉西坦治疗有效，但预后较差。

风湿性心脏病心房颤动患者HCN2mRNA的表达

目的通过风湿性心脏病(简称风心病)心房颤动(简称房颤)患者右心耳组织超极化激活环核苷酸门控阳离子通道-2(HCN2)基因mRNA表达检测,探讨其与房颤的可能关系。方法 28例风心病患者根据是否存在房颤,分为房颤组和窦性心律(简称窦律)组,术前均行心脏彩色多普勒超声检测,术中取右心耳组织,应用半定量聚合酶链式反应技术检测HCN2mRNA表达。结果房颤组右房径大于窦律组((59.2±10.9 mm vs 41.7±15.5mm,P<0.05);HCN2mRNA表达水平高于窦律组(0.911 9±0.7052 vs 0.4735±0.3909,P<0.05)。结论HCN2mRNA表达异常增高,可能与风心病房颤的发生相关。

氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠海马电压门控性Ⅰ型钠通道的变化

目的研究氯化锂-匹罗卡品癫痫模型大鼠海马Ⅰ型电压门控性钠通道α亚基蛋白(Nav1.1)及其钠通道功能的变化。方法建立氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠模型。采用免疫组织化学染色法(IHC)检测实验大鼠海马Nav1.1的表达;采用全细胞膜片钳技术检测钠通道功能(电流-电压曲线、激活曲线、失活曲线及失活后恢复曲线)的变化。结果1.成功复制氯化锂-匹罗卡品大鼠模型。观察到实验大鼠行为学3期(急性期、潜伏期和慢性期)的表现,而空白组未见发作。2.IHC结果:致痫大鼠海马CA1区和DG区神经元结构基本正常,且Nav1.1的表达变化不明显。在CA3区,神经元变性、坏死明显,Nav1.1在神经元变性、坏死部位染色变浅,甚至消失;在变性、坏死神经元周围的正常组织中染色增强,与空白组比较,模型组大鼠Nav1.1的表达增高(0.235±0.008比0.210±0.002),差异有统计学意义(t′=-7.426,P<0.05)。3.全细胞膜片钳技术记录钠电流结果:与空白组比较,模型组的钠电流密度明显增加[(-319.70±28.24)pA/pF比(-229.06±26.01)pA/pF,t=8.178,P<0.05]、激活曲线阈值下降(4.15±0.80比4.50±0.85,t=11.020,P<0.05)、失活曲线阈值上升(7.47±0.53比6.24±0.31,t=6.940,P<0.05)、失活后恢复时间缩短[(1.36±0.15)ms比(1.86±0.21)ms,t=6.712,P<0.05],差异均有统计学意义。结论反复癫痫发作可以导致Nav1.1代偿性表达增多,钠通道电流密度明显增高,而激活曲线阈值下降、失活曲线阈值上升、失活后恢复时间缩短,最终引起大鼠神经元兴奋性增高,更易引起癫痫发作。