大麦6H染色体特异性标记的筛选和鉴定

从大麦、小麦和小麦－大麦６Ｈ染色体附加系ＲＡＰＤ分析筛选出对６Ｈ染色体特异的２个 ＲＡＰＤ标记，转换为特异性ＰＣＲ标记，利用该标记对不同植物材料进行ＰＣＲ扩增鉴定。表明凡 含有大麦６Ｈ染色体的材料（Ｂｅｔｚｅｓ、Ｉｇｒｉ、ＣＳ ６Ｈ附加系）均能扩增出特异带；而不含６Ｈ染色体的 材料，包括小麦、黑麦、长穗偃麦草、中间偃麦草、簇毛麦以及含有其他大麦染色体的小麦附加系 均没有扩增出特异带。可见，２对ＰＣＲ引物具有大麦６Ｈ染色体特异性，表明用ＲＡＰＤ标记转换 为ＰＣＲ标记鉴定大麦特定染色体的方法可行。并通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证明这２个克隆片段分属 于大麦基因组特异的多拷贝重复序列和小麦与大麦基因组共有的寡拷贝序列。

不同固定液对性成熟前后蒙古马睾丸石蜡切片H.E.染色效果的影响

为了比较不同固定液对性成熟前后蒙古马睾丸石蜡切片H.E.染色效果的影响,试验采集1岁和10岁蒙古马睾丸组织,分别放入4%多聚甲醛(PFA)、波恩氏固定液(Bouin’s)和戴维森氏固定液(Davidson’s)中进行固定,再制作石蜡切片并进行H.E.染色,对H.E.染色效果进行显微镜观察及评分。结果表明:对于1岁蒙古马睾丸石蜡切片的H.E.染色,4%PFA固定效果更优,其染色效果评分在细胞形态清晰完整度及细胞核染色清晰度两项中,极显著高于Bouin’s和Davidson’s(P<0.01);而对于10岁蒙古马睾丸石蜡切片的H.E.染色,4%PFA和Bouin’s的固定效果相似,两者染色效果评分在细胞形态清晰完整度、细胞核染色清晰度、细胞质染色清晰度、核质对比明显度方面均极显著高于Davidson’s(P<0.01)。说明在蒙古马性成熟前,曲细精管内细胞较少的情况下,选择4%PFA固定液的效果最优;而在蒙古马性成熟后,曲细精管内细胞较多的情况下,选择4%PFA和Bouin’s固定液的效果均较优。

畜禽肠道组织H.E.染色石蜡切片制作要点及关键技术

通过研究畜禽肠道的发育,能够更好地了解机体的生长发育状况,对研制科学的饲粮配方具有指导意义。而组织切片就是检验肠道发育的一种基础且常规的实验室技术。近年来,虽然研究者对传统组织切片技术进行了全面的研究,但是因为动物品种和组织的差异、取样方法的不同,不同人制作的切片质量参差不齐。笔者参考大量文献资料,结合在试验过程中积累的经验,对畜禽肠道组织苏木精-伊红（H.E.）染色石蜡切片制作程序及各程序的注意事项进行综述,以期提高肠道组织切片的质量。

应用H.E染色的鼻咽癌细胞涂片进行DNA含量测定和EB病毒基因原位杂交的研究

分析鼻咽癌常规 H.E染色细胞涂片分别作 Feulgen染色检测 DNA含量和原位杂交检测 EB病毒编码 RNAs(EBERs)的效果 ;将常规 HE染色的 9例正常鼻咽细胞涂片和 38例鼻咽癌细胞涂片用 1%酸性酒精褪色 ,然后作 Feulgen染色 ,应用图象分析仪测定涂片细胞 DNA含量 ,并将 38例鼻咽癌细胞病例的阳性涂片进行 EBERs原位杂交检测 ;结果显示正常鼻咽细胞均为 DNA二倍体核型 ,38例癌阳性涂片中呈 DNA二倍体者 6例 ,DNA非二倍体者 32例 (84.2 % ) ,癌细胞核 EBERs阳性者 35例 (92 .1% ) ;结果表明 HE染色的鼻咽癌细胞学涂片经褪色后作 Feulgen染色和原位杂交检测 ,能较满意进行 DNA和 EBERs分析 ,表明常规 H.E染色和褪色处理均不影响 Feulgen染色和 EB病毒原位杂交的质量效果。本检测方法可靠、可行 ,适用于常规染色细胞学样本的回顾性研究和随访研究 。

H.E染色和普鲁氏染色在动物铁过负荷诊断的比较

本试验研究比较铁过负荷猪的淋巴结、脾脏、肝脏、肺脏、肾脏的H.E染色、革兰氏染色的变化。

大麦1H特异性CAPs标记和ASA标记的创制

选取大麦１Ｈ染色体的ＳＴＳ标记ＭＷＧ９１３特异性扩增小麦，把得到的片段进行克隆。用ＴａｑＩ酶切分类并测序，把得到的序列同大麦的序列进行比较。依据比较结果，选取对大麦特异的内切酶，用该酶来酶切大麦、小麦、黑麦、长穗倡麦草、中间偃麦草、簇毛麦的ＭＷＧ９１３扩增产物，获得对大麦１Ｈ染色体特异的ＣＡＰｓ标记。同时，依据酶切位点碱基的差异设计引物对扩增的产物进行第二次扩增，得到该位点的一对染色体特异性ＡＳＡ标记。

榆耳酸溶性多糖对肝癌H_(22)小鼠的抑瘤作用研究

目的:研究榆耳酸溶性多糖对小鼠H22移植瘤的生长抑制作用及其机理。方法 :以抑瘤率、肝指数、胸和脾脏指数、白细胞介素-2、γ-干扰素、肿瘤坏死因子-α等指标来考察榆耳酸溶性多糖对H22荷瘤小鼠肿瘤抑制作用,以H&E染色法观察肿瘤组织的病理改变,采用TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:榆耳酸溶性多糖3个剂量组能显著抑制肿瘤的增殖,提高荷瘤小鼠脾脏、胸腺指数以及血清细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α;肿瘤组织H&E染色和TUNEL实验表明,榆耳酸溶性多糖可以通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抑制肿瘤生长作用。结论:榆耳酸溶性多糖具有显著的抗肿瘤作用,其作用机制可能与免疫调节、促细胞凋亡、保护肝脏功能有关。

新疆毛驴肝脏、胰腺组织学观察及Ghrelin的分布

为了观察毛驴肝脏、胰腺组织学结构并检测Ghrelin在毛驴肝脏、胰腺的表达情况,试验以新疆毛驴的肝脏、胰腺为材料,通过制作石蜡切片、H.E.染色和免疫组化染色技术,对新疆毛驴正常状态下的肝脏、胰腺的组织形态学结构和Ghrelin阳性细胞的表达情况进行研究和分析。结果表明:肝脏由被膜和实质组成,肝小叶分界不明显,肝小叶以中央静脉为轴心向四周呈放射状排列形成肝索,肝细胞较大,细胞间的窦状隙明显;胰腺为复管泡状腺,外分泌部为纯浆液性腺,包括腺泡和导管,内分泌部的胰岛数量较少,胰岛周围由结缔组织与外分泌部呈不完全分开。Ghrelin阳性细胞在肝脏和胰腺中均有表达;在肝小叶和胰腺外分泌部Ghrelin阳性细胞着色较深,呈深棕黄色,阳性细胞数量较多;在肝门管区和胰腺导管周围也偶见Ghrelin阳性细胞,但着色较浅,呈浅棕黄色。

固定液对恒冷箱切片组织结构与染色效果的比较观察

对Ｗｉｓｔａｒ大鼠６种器官进行恒冷箱新鲜冰冻切片，采用９种固定液分别固定切片，在同等条件下做Ｈ．Ｅ染色，观察不同固定液对器官组织结构与染色效果的影响，以寻找适用于恒冷箱切片的最佳固定液．结果表明：１０％中性甲醛固定的切片，器官的组织结构清晰，染色好，镜下与石蜡切片相似，我们推荐在恒冷箱切片Ｈ．Ｅ染色时选用１０％中性甲醛作为固定液，这对提高恒冷箱切片染色技术和临床病理快速诊断的准确性，有一定指导意义。

三种不同染色方法在TCT(液基细胞学)检查中的应用

通过运用H-E、瑞氏、巴氏三种染色方法处理宫颈细胞学标本。经TCT检测,比较分析各自染色效果的优缺点,以利同行们选择自己喜好的染色方法。

ESTABLISHMENT OF A HUMAN T－LYMPHOMA CELL LINE（H－TL90） AND ANALYSIS OF ITS BIOLOGICAL CHARACTERISTICS

We established a human T-lymphoma cell line from the cancerous ascrtes of a male patient with prostate cancer which was named H-TL90. This cell line was characterized by its histological features, and by chromosomal and immunological analysis. Immunophenotypic analysis revealed that the cells expressed surface antigen CD3- CD4- CD7+ CD8-. Biological analysis revealed that the cell can promote lymphoryte proliferation. This suggested that the cell line has an autosecretion function. Cytogenetic analysis revealed that H-TL90 was a hyperdiploid with 47 chromosomes and had characteristic transloration between chromosome 3 and 11, and the deletion of the long arm of chromosome 6. These resuhs demonstrated the H-TL90 cell line can be a useful model for the study of human T-lymphoma.

不同毛色ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊皮肤组织中黑色素分布及ASIP蛋白的表达定位

为了研究ASIP基因在中国美利奴细毛羊被毛颜色形成过程中的作用机制,试验分别选取体况良好的3只野生型纯白色中国美利奴细毛羊,20只纯白色、8只棕色和10只黑色ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊背部的皮肤组织,通过H.E.染色对比样本皮肤组织结构及黑色素分布差异;采用免疫组织化学染色检测ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊白色、棕色、黑色3种皮肤组织中ASIP蛋白的表达定位情况。结果表明:野生型与ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊的皮肤均由表皮、真皮、皮下结缔组织3部分组成,且表皮层最薄,各毛色皮肤结构组成无差异;黑色素颗粒主要分布于黑色、棕色ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊皮肤组织的毛囊、毛干中,且黑色较棕色皮肤组织中分布的黑色素颗粒更为密集,而在白色被毛的野生型和ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊皮肤组织中均未发现黑色素颗粒;ASIP蛋白在白色被毛的ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊的表皮、毛囊外根鞘、毛乳头周围的毛基质中大量存在,在棕色、黑色皮肤组织中几乎不存在。说明ASIP蛋白在特定部位的表达情况与ASIP基因编辑中国美利奴细毛羊的白色被毛毛色的发生相关。

一重和三重脑震荡大鼠脑固缩的神经细胞定量变化研究

目的建立一重脑震荡(PCC)和三重脑震荡(MCC)大鼠模型,通过计数固缩的神经细胞数目变化,观察PCC和MCC鼠脑的神经细胞病理学变化规律,以探讨MCC大鼠脑损伤的累加效应.方法用自制金属单摆式闭合性脑损伤打击装置复制PCC和MCC大鼠模型96只,随机分为PCC鼠l d、2 d、4 d、8 d、16 d、24 d组和MCC鼠l d、2 d、4 d、8 d、16 d、24 d组(n=6)共12个实验组,另设一正常对照组(n=6).运用HE组织化学染色、尼氏染色,对中隔断面的前额叶皮质(PFC)、梨状皮质(Pi)r、尾壳核(CPu)、伏隔核(AcbC)、终纹床核(BST);背侧海马断面的无颗粒细胞皮质(RSA)、海马CA1-4区、上、下齿状回、丘脑背外侧核(LD);脑干白质以及被盖区等15个脑区进行固缩神经细胞计数.结果大鼠PCC和MCC后绝大多数脑区的固缩神经细胞数目均呈明显上升改变,且MCC后PFC、Pir、CPu、BST、RSA、LD和上齿状回部位的MIG数目上升变化比PCC鼠更加显著(P<0.05).结论大鼠PCC和MCC后绝大多数脑区的固缩神经细胞数目均呈上升性改变,而且MCC后小胶质细胞的升高变化比PCC更加显著,为MCC具有累积性损伤效应提供了病理学依据.

鸭呼肠孤病毒人工感染SPF鸡胚的病理学研究

【目的】前人研究表明禽呼肠孤病毒可以经卵垂直传播,禽呼肠孤病毒能引起雏禽的病毒性关节炎、呼吸道和肠道疾病、肝炎、心肌炎、免疫抑制等。以实验室分离的鸭呼肠孤病毒HP080421株为研究对象,该毒株引起病变主要以鸭软脚为主要临床特征,病鸭肝脏和脾脏表面有大量的白色坏死灶、肾脏肿大、出血为主要病变特点。鸭呼肠孤病毒对鸡胚的致病性研究,旨在通过雏鸡的病理变化特点,探讨所分离的HP080421鸭呼肠孤病毒株是否也可感染鸡群,为鸡场鸭呼肠孤病毒感染的防控提供理论依据。【方法】运用华中农业大学兽医病理学实验室分离鉴定的HP080421株鸭呼肠孤病毒通过尿囊腔接种SPF鸡胚,建立SPF鸡胚鸭呼肠孤病毒感染模型,培养鸡胚至雏鸡出壳,运用临床观察、病理剖检、H.E染色和免疫组织化学染色等病理组织学检查方法,对鸭呼肠孤病毒感染SPF鸡胚进行病理学研究和致病性分析。【结果】研究发现病毒感染鸡胚孵化培养至22—23日龄均啄壳,但不能自主出壳,需人工剥壳。病理剖检可见雏鸡的肝脏、脾脏肿胀质脆,表面及实质分布有黄白色坏死灶;脑部组织肿胀,并可见出血点和出血斑。H.E染色的组织病理学观察可见接毒组雏鸡肝脏、脾脏的坏死灶周围有大量淋巴细胞浸润;法氏囊的滤泡髓质部和胸腺的髓质部淋巴细胞减少、缺失;脑、肺脏、肾脏存在不同程度的淤血、出血和水肿;免疫组织化学染色结果表明:病毒阳性信号主要分布于肝脏、脾脏、肺脏和法氏囊等器官,并且位于上皮细胞和巨噬细胞的细胞质和胞核内。【结论】鸭呼肠孤病毒株HP080421能够在SPF鸡胚中复制增殖,并使雏鸡主要器官发生明显的病理变化,病理变化主要集中在肝脏和淋巴器官,因此鸭呼肠孤病毒可通过垂直传播感染鸡群,还可导致雏鸡免疫抑制。本研究通过SPF鸡胚鸭呼肠孤病毒感染模型,阐述了鸭呼肠孤病毒感染鸡群的可能性,因此在实际养殖过程中,养殖户要防止鸭呼肠孤病毒对鸡胚的污染,切断传播途径,以达到预防鸡群感染鸭呼肠孤病毒的目的。

青海玉树多目涡虫精巢组织结构的显微观察

利用连续石蜡切片(水平切、矢状切、横切)及H.E染色方法,对青海玉树多目涡虫精巢的组织结构进行了初步研究.结果表明:在光学显微镜下,多目涡虫精巢的组织结构与哺乳类睾丸中曲细精管的结构类似,但也有一些差别.提示:精巢的组织结构在动物的系统演化过程中是比较保守的,通过对不同进化类群动物精巢的组织结构进行比较研究,也许有助于对动物系统演化的探究.

猪瘟猪肺疫附红细胞体混合感染的诊治

就临床病例介绍了猪瘟猪肺疫附红细胞体混合感染的流行病学、剖检变化、组织病理学变化;应用简单、快捷的实验室诊断技术,及时对疫病做出了确切诊断,并为猪瘟猪肺疫附红细胞体混合感染提出了有效的治疗措施和预防方法。

日本三角涡虫生殖系统组织结构的观察

涡虫在动物系统演化史上占有十分重要的地位,雌雄同体,具有很强的再生能力,因此,对其生殖系统组织结构进行深入研究具有重要的意义。本文用3种染色方法(H.E染色、Masson染色、Van Gieson染色)显示了日本三角涡虫(Dugesia japonica)生殖系统的组织结构并对其进行了光镜观察。结果表明,该类涡虫生殖系统为雌雄同体。雌、雄性生殖系均由生殖腺和生殖管道构成,雌性生殖腺包括卵巢、卵黄腺和交配囊,生殖管道包括输卵管、交配囊柄;雄性生殖腺主要是精巢,生殖管道包括输精囊、输精管、球腔、射精管4部分。交配囊由单层柱状上皮构成,胞质强嗜碱性,胞核位于上皮基底面,游离面胞质呈现很多泡状结构;卵黄腺为单细胞腺,灯泡状,其核较小,位于柄部。因此,可以确定交配囊具有外分泌的功能;卵黄腺的数目存在周期性。

显示三角涡虫神经系统的三种方法

涡虫在动物系统演化史中占有十分重要的地位,同时又具有很强的再生能力,如何显示其正常组织结构,对研究涡虫的再生具有重要意义。本文用3种染色方法(H.E染色、Masson染色、Van Gieson染色)显示了日本三角涡虫(Dugesia japonica)的神经系统,结果表明,尽管3种方法都能很清晰地显示涡虫的神经系统,但在显示咽部神经时,只有Masson染色能够很清晰地显示。