H&T-GC-MS法快速测定苹果香气物质的优化研究

采用顶空捕集-气相色谱-质谱(H&T-GC-MS)法测定苹果中香气物质,通过对顶空捕集的平衡温度、平衡时间以及色谱柱的优化,优化结果为:顶空平衡温度50℃,平衡时间40 min,毛细管色谱柱Rtx-1(30 m×0. 25 mm×0.25μm)。试验结果显示,从泰安红富士中分离鉴定出49种香味物质,本方法简单、迅速,不添加有机溶剂,测定结果更真实地反映了其香气物质的组成,对其它水果也有一定的借鉴作用。

部分包覆T形蜂窝钢-混凝土组合梁受弯性能试验研究

进行了2个主钢件为T形蜂窝钢的部分包覆钢-混凝土组合梁(PECCS-T梁)的静力单调弯矩加载试验研究,并将其与已有的部分包覆H形蜂窝钢-混凝土组合梁(PECCS梁)的试验研究结果进行对比,考察主钢件受压翼缘对组合梁受弯性能的影响,并研究用钢量相近情况下增大蜂窝式主钢件截面扩张比对PECCS-T梁受弯性能的影响。研究结果表明:PECCS-T梁的破坏模式与PECCS梁的破坏模式不同,表现为受拉钢翼缘屈服后受压区混凝土被压碎。组合梁中的受压钢翼缘能有效地约束混凝土,显著提高组合梁的抗弯承载力、变形能力和延性。PECCS-T梁按主钢件最大削弱截面计算得到的理论值Mu与试验值Mtest比较接近。增大T形主钢件的截面扩张比,能够有效提高PECCS-T梁的抗弯承载力,且保持变形能力不降低。

小鼠VCAM-1表达载体的构建及稳定高表达间充质干细胞系C3H10T 1/2的建立

本研究旨在构建小鼠血管细胞粘附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)的逆转录病毒载体,通过转染建立稳定高表达VCAM-1的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC),并初步探讨VCAM-1基因过表达对MSC免疫学特性的影响。以小鼠脾脏组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增小鼠VCAM-1基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的cDNA片段插入PMSCVmigr-1逆转录病毒载体,构建重组逆转录病毒表达质粒PMSCVmigr-1-mVCAM-1,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染技术转染293细胞,收获含有病毒颗粒的上清;用病毒上清感染间充质干细胞系(C3H10T 1/2)并检测其表达。采用3H-TdR掺入法测定高表达VCAM-1的MSC在淋巴母细胞转化实验中对淋巴细胞增殖的抑制作用。结果表明:酶切和测序鉴定证实,正确构建了小鼠VCAM-1的重组逆转录病毒表达质粒。逆转录病毒上清感染MSC后流式细胞术检测到目的基因VCAM-1在MSC表面高表达。高表达VCAM-1的MSC对刀豆素A诱导的淋巴细胞增殖具有显著抑制作用,且呈剂量效应关系。结论:成功构建了小鼠VCAM-1基因的重组逆转录病毒质粒并使其在MSC中稳定高表达。高表达VCAM-1的MSC对体外淋巴细胞增殖具有很强的抑制效果。本课题为进一步研究VCAM-1基因调控MSC干预免疫相关性疾病奠定了实验基础。

基于M-H-th建立改进的水蒸气状态方程

对新的马丁-侯状态方程(简称M-H-th方程)特征常数求解算法进行了优化改进,使特征常数不随蒸发点的选取而改变,把M-H-th方程优化改进的特征常数算法应用于水蒸气,得到了基于M-H-th的水蒸气状态方程。新的水蒸气状态方程只有10个特征常数,精度高于原水蒸气马-侯状态方程,可以应用新的水蒸气状态方程计算水蒸气焓、熵,适用于水蒸气(汽轮机)建模。

激动型抗4-1BB抗体3H3交联促进CD8^+ T细胞中Akt激酶活性

目的:研究4-1BB信号促进CD8+T细胞增殖、存活及Akt活性的变化。方法:利用小鼠CD8α+T细胞磁珠负性分选试剂盒制备高纯度CD8+T细胞,并通过体外抗CD3单克隆抗体(mAb)刺激活化CD8+T细胞。再通过流式细胞术(FCM)分析3H3交联与否,四唑盐(WST-1)/ECS检测CD8+T细胞的增殖程度,Annexin V检测抗凋亡能力,免疫印迹法分析胞内Akt磷酸化水平及Akt激酶活性。结果:3H3交联可以明显促进活化的CD8+T细胞增殖和存活,并且3H3介导的4-1BB信号可明显促进CD8+T细胞内Akt磷酸化水平及Akt激酶活性。结论:Akt途径可能参与了3H3交联介导的4-1BB信号对CD8+T细胞增殖与存活的调节效应。

受体相互作用蛋白激酶-3参与甲型H1N1流感病毒感染小鼠记忆性CD8^+T细胞的应答

受体相互作用蛋白激酶-3(receptor-interacting protein kinase 3,RIPK3)是坏死复合体的关键成分之一,介导细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)的发生。前期研究发现流感抗原特异性CD8^+T细胞的初次应答部分依赖于RIPK3分子,为探讨其在记忆性CD8^+T细胞应答中的作用,对初次感染后的C57BL/6小鼠在免疫记忆阶段进行了再次感染,并用流式细胞仪检测了流感病毒特异性的记忆性CD8^+T细胞的表型和功能。结果发现小鼠初次感染甲型H1N1流感病毒株A/Puerto Rico/8/34后37d,RIPK3敲除小鼠的CD8^+T细胞比例及分泌细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的能力均显著低于野生型小鼠;在再次感染相同病毒时,RIPK3敲除小鼠流感病毒特异性CD8^+T细胞比例及分泌细胞因子IFN-γ的能力依旧显著低于野生型小鼠;而CD8^+中枢型记忆性T细胞(TCM)比例显著高于野生型小鼠,效应型记忆性T细胞(TEM)或效应性T细胞(TEff)比例却显著低于野生型小鼠。提示RIPK3分子参与调节流感病毒特异的记忆性CD8^+T细胞诱生数量和分泌细胞因子功能,并影响其TCM与TEM/TEff的比例,为深入探索病毒特异的记忆性CD8^+T细胞应答的分子机制提供了新线索。

TX1-35t/h锅炉前置式脱硫型煤机的优势分析

TX系列锅炉前置式脱硫型煤机 ,能将块煤和粉煤自动分离 ,粉煤挤压成型然后与块煤分层直接铺与链条炉上燃烧 ,同时解决了制造型煤和分层燃烧的两大问题。设计新颖实用 。

化学致癌剂3-4苯并吡诱发C_(3)H/10T1/2细胞恶性转化的研究

本文用C_(3)H/10T(1/2)细胞作为靶细胞,研究了化学致癌剂3-4苯并吡(BP)诱发其恶性转化的发生。结果证明,在BP作用后7~9周出现转化灶。从转化灶中分离的细胞,失去了在培养中的接触抑制,能在软琼脂培养基中形成集落。接种于免疫抑制动物,能够形成肉瘤,表现出恶性细胞的生长特性。上述结果说明,CH_(3)/10T(1/2)细胞对研究致癌剂诱发体外培养细胞的恶性转化是有用的。染色体分析结果表明:恶性转化细胞的染色体数目和结构,都发生了明显的变化。说明化学致癌剂诱发的恶性转化,与其对细胞DNA的损伤有密切关系。

gp96-肽复合物体外诱导CTL反应及其抗肿瘤效应研究

目的研究小鼠肝癌腹水瘤H22细胞来源的gp96-肽复合物体外诱导小鼠脾淋巴细胞特异性细胞毒T细胞(CTL)的产生及其抗肿瘤效应。方法利用蛋白提取纯化技术、Western blot法、细胞培养技术、流式细胞术、CCK-8法、RT-PCR法等研究gp96-肽复合物体外诱导扩增CTL及其抗肿瘤效应。结果流式细胞仪检测表明,经gp96-肽复合物诱导后的CD8^+T细胞比例达到近70％,远远高于对照组的35％、26％。该活化的CTL细胞在效靶比为50：1时的肿瘤细胞杀伤率达72％与对照组相比具有统计学意义；将活化的CTL细胞回输小鼠体内能产生对该肿瘤细胞良好的过继性免疫保护,延长荷瘤小鼠的生存时间；RT-PCR法检测该活化的脾细胞较正常脾淋巴细胞高表达IFN-γ mRNA。结论小鼠肝癌腹水瘤H22细胞来源的热休克蛋白gp96-肽复合物能诱导小鼠脾淋巴细胞的CTL反应,并增强脾细胞IFN-γ mRNA的表达,该CTL具有特异性抗H22肿瘤细胞的免疫作用。

流感病毒-金黄色葡萄球菌共感染小鼠模型建立及达菲的干预作用研究

目的 模拟临床常见的流感病毒+金黄色葡萄球菌(金葡菌)共感染建立小鼠模型,评价达菲干预后的药效及对淋巴细胞和炎症因子调控作用。方法 (1)通过筛选不同滴度的PR8流感病毒、金葡菌,建立共感染小鼠模型。(2)选用雄性BALB/c小鼠,随机分为6组。第0天滴鼻流感病毒(0.25 TCID_(50),每只20μL),第3天滴鼻感染2.5×10^(7)CFU金葡菌20μL。感染病毒24 h后灌胃给药达菲,连续7 d。末次给药24 h后处死,计算脏器指数,RT-qPCR检测流感病毒M基因相对表达量,流式细胞术检测CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞含量及IL-6等13种炎症因子的分泌水平,以气泡图的形式显示每组促炎平均值和促炎细胞因子之和。结果 (1)0.25 TCID_(50)的流感病毒感染后体重下降相对平缓,小鼠没有出现死亡;(2)2.5×10^(7)CFU的金葡菌共感染后半数致死,体重下降相对平缓,作为后续共感染组的剂量;(3)共感染组小鼠体重下降较大,胸腺指数明显下降(P<0.05),肺指数明显升高(P<0.05)。与流感组相比,共感染组M基因表达量显著升高(P<0.05);与金葡组相比,细菌载量显著升高(P<0.05);与流感组和金葡组相比,小鼠淋巴细胞绝对含量明显降低(P<0.05),炎症因子含量显著增加(P<0.05)。达菲及时干预共感染小鼠后延缓了体重的下降,显著升高了胸腺指数(P<0.05),降低了肺指数(P<0.05);显著降低了M基因的表达和细菌载量(P<0.05);淋巴细胞含量显著升高(P<0.05);显著降低炎症因子的表达(P<0.05)。气泡图显示共感染组小鼠体内促炎症因子的平均值以及促炎因子之和均远远高于其他各组,达菲及时干预后有较好的回调作用。结论 本研究建立了符合临床特征的共感染小鼠模型,采用达菲干预治疗,可以减轻后续继发病毒-细菌混合感染对机体的损伤。

YC/T 207-2014标准变更说明和重点分析

YC/T 207-2014《烟用纸张中溶剂残留的测定顶空-气相色谱/质谱联用法》(以下简称“新版标准”)于2014年12月24日发布,2015年1月15日正式实施,实施8年的旧版标准YC/T 207-2006《卷烟条与盒包装纸中挥发性有机化合物的测定顶空-气相色谱法》(以下简称“旧版标准”)同步作废。

执行GB/T2975-1998有关问题的探讨

分析、探讨了执行GB/T 2 975 - 1998时遇到的有关问题。

细胞氧化损伤时8-羟基鸟嘌呤的测定

利用Ｈ２Ｏ２易通过细胞膜而到达核这一特点，初步探讨了不同浓度Ｈ２Ｏ２对ＨＬ６０细胞ＤＮＡ的氧化损伤程度．发现Ｈ２Ｏ２浓度在０４ｍｍｏｌ／Ｌ以上时，作用８～２４ｈ可以用气相色谱／火焰离子检测器（ＧＣ／ＦＩＤ）检测到氧化损伤标志产物———８羟基鸟嘌呤（８ｏｈＧ），并观测到在０４～０８ｍｍｏｌ／ＬＨ２Ｏ２作用一定时间时。

人类T型钙通道α1H和α1G基因在精索静脉曲张患者精子中的差异表达

目的:探讨精索静脉曲张(VC)患者精子中T型钙通道α1H和α1G基因的表达与精索静脉曲张的关系。方法:根据WHO标准用计算机辅助精液分析(CASA)方法对所取精液进行检查,根据检查结果分为正常精液组(20例)、VC精液正常组(16例)、VC精液异常组(44例),用Percoll非连续梯度离心法对精液进行分离,应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别检测3组精子T型钙通道α1H和α1G mRNA的表达。结果:与正常精液组相比较,VC精液正常组α1H和α1G mRNA的表达差异无显著性(P>0.05);VC精液异常组α1H和α1GmRNA的表达差异具有极显著性(P<0.01)。结论:T型钙通道α1H和α1G基因表达异常可能是导致VC患者精液质量下降从而不育的原因之一,此为VC不育的病因及治疗提供了新的方向。

多用途基因捕获C3H/10T1/2细胞阳性克隆库的构建及鉴定

目的：以10T1／2细胞为间充质干细胞模型，构建用于间充质干细胞分化及恶性转化分子机制等研究的基因捕获阳性克隆库．方法：Dra I线性化逆转录病毒基因捕获载体ROSAFARY后，与pIRES2-EGFP用脂质体共转染phoenix细胞，LacZ染色证明转染成功后收集病毒上清感染10T1／2细胞．经潮霉素筛选获得阳性克隆，为排除假阳性克隆用LacZ部分片段PCR进行鉴定．结果：ROSAFARY脂质体转染phoenix细胞后48h，GFP指示的转染效率约为20％～30％，LacZ染色有大约10％的阳性率．150mg／L潮霉素筛选病毒感染的10T1／2细胞，挑取药物抗性克隆，PCR鉴定后获得43个阳性克隆，LacZ染色5个为捕获基因高表达细胞克隆．结论：基因捕获技术建立非胚胎干细胞的克隆是可行的，成功建立的基因捕获阳性克隆库为应用基因捕获技术揭示成体干细胞分化及恶性转化分子机制奠定了基础．

氖原子与H_2(D_2、T_2)分子碰撞分波截面的理论计算

用Tang -Toennies势模型和公认精确度较高的密耦近似方法计算了不同能量下惰性气体原子Ne与H2 及其同位素D2 、T2 替代碰撞体系的转动激发碰撞截面 .通过分析Ne H2 、D2 、T2 各碰撞体系分波截面的差异 ,总结出在H2 分子的对称同位素替代情形下Ne H2 (D2 、T2 )碰撞体系分波截面的变化规律 .结果表明 ,体系的约化质量及入射原子相对碰撞能量的变化均给体系的碰撞截面带来不同程度的影响 .

关于无限广义块Toeplitz+Hankel矩阵的求逆

利用无限广义块 (IGB)矩阵的生成函数和ω 结构矩阵方法给出无限广义块Toeplitz plus Hankel(IGB(T +H) )矩阵的求逆公式 。

gp96-肽复合物体外诱导脾淋巴细胞及其抗肿瘤效应

目的研究H22肿瘤细胞来源的热休克蛋白gp96-多肽复合物在体外诱导小鼠脾淋巴细胞的特异性的细胞毒性T细胞(CTL)的产生及其抗肿瘤效应。方法利用蛋白提取纯化技术、细胞培养技术、流式细胞术、CCK-8法、免疫荧光技术等。结果经鉴定获得纯化的热休克蛋白;流式细胞仪检测表明,经gp96-肽复合物诱导后的CD8T细胞比例达到近70%,远远高于对照组的35%、26%;该活化的CTL细胞在效靶比为50∶1时的肿瘤杀伤率达72%与对照组相比具有统计学意义;激光共聚焦显微镜观察证实实验诱导组的培养上清能诱导H22肿瘤细胞凋亡的形态学改变。结论肿瘤来源的热休克蛋白gp96-肽复合物能诱导小鼠脾淋巴细胞的CTL反应,该活化的CTL具有特异性抗H22肿瘤细胞的免疫保护作用并能分泌免疫活性物质诱导H22肿瘤细胞凋亡。

急性期川崎病IL-4基因组蛋白甲基化的改变及意义

目的探讨急性期川崎病(KD)患儿IL-4基因组蛋白甲基化改变及其在KD Th2细胞异常机制中的作用。方法 KD患儿急性期及IVIG治疗4~5 d后取血备检,同年龄健康儿童为对照组。采用流式细胞术检测外周血Th2比例及CD4^+ T细胞IL-4、pSTAT6和GATA3蛋白水平;染色质免疫共沉淀分析外周血CD4^+ T细胞IL-4基因CNS1、HSⅡ、HSVa组蛋白甲基化H3K4me3及GATA3、MLL1结合水平;荧光定量PCR分析CD4^+ T细胞IL-4、IL-5、IL-13、IL-4Rα、IL-2Rγ、SOCS5 mRNA水平;双抗体夹心ELISA检测血浆细胞因子IL-4、IL-5和IL-13蛋白浓度。结果 KD组42例,对照组36例。①KD患儿急性期Th2细胞比例,功能相关分子(IL-4、IL-5和IL-13)mRNA表达,血浆蛋白水平,IL-4基因CNS1、HSⅡ、HSVa位点组蛋白甲基化H3K4me3修饰水平均明显增加(P<0.05),且冠状动脉损伤组(CAL)前述指标均高于无冠状动脉损伤组(NCAL)(P<0.05),经IVIG治疗后明显降低(P<0.05);②KD患儿急性期外周血CD4^+ T细胞转录因子GATA-3、组蛋白甲基化酶MLL1与IL-4基因CNS1、HSⅡ、HSVa结合水平显著增高(P<0.05),且MLL1与IL-4基因CNS1、HSⅡ、HSVa结合水平与IL-4 mRNA表达显著正相关(r分别为0.42、0.33和0.39,P均<0.05),经IVIG治疗后均表现不同水平的恢复(P<0.05)。其中CAL组MLL1、GATA-3与IL-4基因CNS1、HSⅡ、HSVa结合水平明显高于NCAL组(P<0.05);③KD患儿急性期血浆IL-4浓度和CD4^+ T细胞IL-4Rα、IL-2Rγ、pSTAT6、GATA-3、SOCS5表达显著增高(P<0.05),其中CAL组血浆IL-4浓度和CD4+T细胞IL-4Rα、IL-2Rγ、pSTAT6、GATA3表达均高于NCAL组、SOCS5表达低于NCAL组(P<0.05),经IVIG治疗后均表现不同水平的下调(P<0.05)。结论 IL-4基因组蛋白甲基化修饰异常可能是导致KD患儿急性期Th2细胞异常的始动因素之一。

贵州铝厂热电厂2台130t／h循环流化床锅炉的安装检验

1设备概况 贵州铝厂热电厂选用中国东方电气集团公司东方锅炉厂制造的130t／h循环流化床锅炉2台，型号为DG130／9．8—3，其主要技术参数如下：