H-2半相合CD34^+和TK^+T细胞移植建立急性移植物抗宿主病模型及丙氧鸟苷疗效观察

目的 探讨HSV TK/GCV对H 2半相合CD34+ 细胞和TK+ T细胞混合移植急性移植物抗宿主病 (GVHD)的疗效。方法 从亲代雄性供鼠骨髓分离CD34+ 细胞 ,同时取脾脏T细胞转染tk基因。4 8只受鼠随机分为 6组 ,第 1组输入CD34+ 细胞 (1× 10 5) ;第2、3组输入CD34+ 细胞和T细胞 (1× 10 7) ;第 4～ 6组输入CD34+ 细胞和TK+ T细胞 (1× 10 7)。第 1组不予任何处理 ;第 2、4组于d0～d14给予PBS 0 2ml/d;第 3、5、6组于d7、d0、d7开始给予丙氧鸟苷(GCV)治疗 ,剂量为 5 0mg/ (kg·d)× 7天腹腔注射。结果 第 1组受鼠全部长期存活 ,无急性GVHD发生。 2～ 6组均发生急性GVHD ,病理表现典型。 2～ 4组 3周内均死于急性GVHD ,第 5、6组生存时间分别为 2 6 6± 4 8天和 4 0 5± 8 4天 ,与 2～4组相比差异显著 (P <0 0 1) ,第 6组生存时间长于第 5组(P <0 0 5 )。结论 H 2半相合CD34+和TK+ T细胞移植能够建立急性GVHD模型 ;TK/GCV系统对急性GVHD有较好治疗作用 ;GCV给予时间不同则疗效有差异。

TK/GCV治疗H-2半相合CD34^+和TK^+T细胞移植急性移植物抗宿主病研究(英文)

目的探讨TK/GCV对H-2半相合CD34+细胞和TK+T细胞混合移植急性移植物抗宿主病(graftversushostdiseaseGVHD)疗效,为临床应用提供实验依据。方法从亲代雄性供鼠骨髓分离CD34+细胞,同时取脾脏T细胞转染TK基因。两者混合移植雌性F1代受鼠,每只受鼠输入CD34+细胞和TK+T细胞分别为1×105和1×107。移植0天或移植7d给予丙氧鸟苷(Ganciclovir,GCV)治疗,剂量为50mg/kg·d×7d腹腔注射。结果F1受鼠全部发生急性GVHD,对照组小鼠3周内全部死亡;GCV治疗组与对照组相比差异显著,P<0.01。移植0天或移植7d应用GCV小鼠生存时间分别为(26.6±4.8)d和(40.5±8.4)d。移植7d给予GCV疗效较好,P<0.05。结论TK/GCV系统对H-2半相合CD34+和TK+T细胞混合移植急性GVHD有较好治疗作用;GCV给予时间不同疗效有差异。

H-2半相合小鼠CD34^+细胞和TK^+T细胞移植建立急性GVHD模型(英文)

目的建立H-2半相合小鼠CD34+细胞和TK+T细胞混合移植急性GVHD模型。方法自亲代雄性代鼠骨髓分离CD34+细胞,同时取脾脏T细胞转染tk基因,两者移植雌性F1受鼠,每只输入CD34+细胞和TK+T细胞分别为1.0×105和1.0×107。单纯照射组和CD34+细胞组作对照。结果CD34++TK+T细胞组均发生急性GVHD,生存时间13.3±1.2天,受鼠死亡前外周血白细胞1.76±0.25×109/L,病理表现与单纯照射组明显不同。单纯照射组小鼠生存时间6.5±0.8天,与CD34++TK+T细胞组比较,P <0.05。CD34+细胞组和CD34++TK+T细胞组小鼠外周血检查可见Y染色体。结论H-2半相合CD34+细胞和TK+T细胞混合移植能建立急性GVHD模型。

优化H-2半相合造血干细胞移植物治疗急性白血病的实验研究

目的 探讨H 2半相合造血干细胞移植物中分离移植物抗宿主病 (GVHD)与移植物抗白血病 (GVL)作用的T淋巴细胞阈值。方法 建立 (C5 7BL 6× 6 15 )F1(H 2 b)白血病鼠模型作为受者 ,以C5 7BL 6 (H 2 b)小鼠为供鼠 ,应用免疫磁珠 (MiniMACS)纯化供鼠的CD34+ 和CD3+ 细胞 ,纯度分别为 ( 81.5± 2 .4) %和 ( 95 .4± 2 .9) %。 6 9只受鼠分为 7组 ,A为白血病自然生存组 ,其余各组均经6 0 Co 9GyTBI,除B组单纯TBI外 ,其余各组均经尾静脉输注供鼠CD34+ 细胞 10 5 只 ,D、E、F、G组移植物中还分别混合CD3+ 细胞每只 10 7,5× 10 7,10 8和 1.5× 10 8,饲养 6 0d ,根据病理确定死因。结果 E组 10 0 %存活 >6 0d ,明显长于其它组 (P <0 .0 0 0 1) ;生存 >6 0d者异性染色体为 10 0 %,D、E组因白血病复发死亡者明显少于C组 (P <0 .0 0 1) ,G组因GVHD死亡者明显高于E、F组 (P <0 .0 0 1)。结论 单纯CD34+ 细胞移植组白血病复发率最高。移植物中CD3+ 细胞 >10 8时因GVHD死亡者最多 ;5× 10 7 只时能够分离重度GVHD和GVL。

白血病负荷与胸苷激酶/丙氧鸟苷分离急性GVHD和GVL效应的关系

目的研究白血病负荷与胸苷激酶（TK）／丙氧鸟苷（GCV）分离急性移植物抗宿主病（aGVHD）和移植物抗白血病效应（GVL）的关系。方法选择雄性C57BIJ6小鼠为供鼠，雌性F1小鼠为受鼠，进行H-2半相合CD三细胞和TK^＋T细胞移植。将48只受鼠随机分为3个接种组，接种EL9611红白血病细胞（H-2^d）分别为10^5、10^6、10^7个。每组受鼠经。Co9．0Gy照射后，输入cD三细胞和TK^＋T细胞分别为10^5、10^7；再随机分为对照组和GCV组。GCV组腹腔注射GCV50mg／（kg．d），连用7d，根据病理结果确定死因。结果第1、2接种组中的对照组均死于急性GVHD；GCV组30％～40％死于白血病，其余长期生存。GCV组生存时间较对照明组显延长（P〈0．05）。第3接种组均死于白血病，其对照组和GCV组生存时间无统计学差异。结论TK^＋T细胞数量不变时，白血病负荷是影响TK／GCV分离急性GVHD和GVL效应的重要因素。