将心肌闰盘特染和H-E染色整合的心肌纤维块染改进法

在组织学实验教学中,心肌纤维是要求学生重点观察和必须掌握的实验内容之一.据笔者了解,对于心肌纤维的观察,大多数医学院校需要2种切片标本来完成：使用常规H-E染色切片标本观察心肌的一般光镜结构,同时再配备心肌特染切片标本来观察其特化结构——心肌闰盘.制作2种切片,既费时费力,又增加了耗材量;实验课上,2种染色方法显示结果的差异,一定程度上可能会干扰学生对心肌结构的观察和理解.为此,本实验应用薄层火棉胶包被技术将心肌纤维的2种染色方法进行改进整合,在1张切片上能够清晰完整地显示原来两种切片的内容,同时又增加了两者原来不具备的优点.笔者认为该改进整合后的方法是一种具有广泛推广价值的心组织学实验教学切片制作染色法.

对H-E染色法的一点改进

H-E染色法是病理技术中最常用的一种方法,它具有细胞透明度好,核与浆对比鲜明,染色液的渗透性强,染色效果优秀等许多优点,因而在各级医院、学校或科研单位被广泛采用。稍嫌不足的就是步骤较烦琐,所以简化步骤就显得较为重要。 1 改进方法 笔者经反复思考和反复实践验证认为,染色步骤中“蓝化”一步完全可以省去。即在分化后彻底冲水,不必蓝化就入伊红染浆,能达到同样的染色效果和保存效果。 2 理论依据 分化后的片子变成红色,因此需要蓝化。

直接染色法观察组织工程心脏瓣膜构建中种植细胞的生长

为了快速观察组织工程心脏瓣膜构建中种植细胞的生长状况 ,采用去细胞猪主动脉瓣叶为支架 ,将新生牛主动脉内皮细胞种植于其上 ,第 3、7天取瓣叶行 H- E直接染色 ,并以常规切片 H- E染色和扫描电镜作为对照。结果发现 ,该 3种方法观察所见细胞第 3、7天的生长疏密状况基本同步。提示 ,瓣叶 H-

心肌切片的苏木精-伊红染色制作方法探讨

目的在H-E染色心肌切片上既能观察到心肌的组织结构变化,又能清楚的显示出心肌闰盘及横纹结构。方法对成年狗心脏采用含酸性固定液固定,按常规进行石蜡包埋切片,在苏木精染色液染色后不经盐酸乙醇分色,而直接入自来水进行蓝化,随后用伊红染色液复染,常规脱水、再透明、最后用中性树胶封片。结果心肌组织结构与心肌纤维上的横纹和纤维间的闰盘显而易见,结构清晰,色彩鲜明。结论以成年动物心脏为材料、以含酸性成分的固定液固定、苏木精染色后不经盐酸乙醇分色而直接蓝化,效果满意。

一种适用于染色机的沉淀酸化伊红染液

在常规H-E染色中,伊红染液往往用水溶性伊红Y,浓度为0.5～1%,但组织切片经水洗或低浓度酒精脱水后易脱色,特别是在染色机染色时,脱色更显著.现介绍一种适用于染色机染色的沉淀酸化伊红染液.

三种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果比较

目的比较3种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果,为选择合适的染色方法提供参考。方法选取出生后第5、7、14、21天的ICR小鼠,制备小鼠下颌第一磨牙冠状切片,采用H-E染色、Masson染色法和Gomori染色法进行组织形态学研究,比较染色结果。结果在小鼠出生后第5天(PN5)至PN7为牙根发育起始阶段,H-E染色显示:成牙本质细胞、成釉细胞及上皮根鞘细胞形态最为清晰; Masson染色法显示:图片色彩鲜艳,牙釉质、牙本质及前期牙本质间层次分明; Gomori染色方法显示:细胞核呈单一的蓝黑色,但软、硬组织对比度不佳。从PN14小鼠牙齿开始萌出到PN21牙根发育基本完成阶段,H-E染色显示:成釉细胞、成牙本质细胞及牙周膜成纤维细胞形态最为清晰; Masson染色法显示:牙骨质与牙槽骨间的胶原纤维排列规则,牙槽骨形态清晰;而Gomori染色效果总体不佳。结论在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期,3种染色方法各有优势。H-E染色适用于各类细胞形态的观察,Masson染色适用于牙体硬组织及骨组织的观察,Gomori染色法总体效果不佳。

小尾寒羊胚胎不同时期背最长肌的组织学研究

[目的]利用组织生物学方法对不同时期小尾寒羊背最长肌进行研究。[方法]以小尾寒羊为研究对象,利用组织切片技术从微观层面研究胚胎期不同阶段肌纤维生长发育的变化情况。[结果]肌纤维的密度随着时间的增长呈现下降的趋势,而肌纤维直径随着密度的降低而增加。胚胎前期胎儿增重不明显,而胚胎后期及出生后体重迅速增加,差异显著。[结论]该研究可为开展优质肉羊杂交育种工作积累基础性数据。

虹鳟斯坦尼氏小体·脾脏和鳃组织的显微结构研究

将体质健壮的虹鳟斯坦尼氏小体、脾脏、鳃取出,依次进行Bouin氏液固定、石蜡包埋、切片、H-E染色和显微摄像。经仔细观察:虹鳟斯坦尼氏小体有多个,位于中肾与后肾的沟腹内;脾脏中可见到细胞聚集成块,分布散乱,排列不紧密,组织间隙大;鳃丝间的间距较小,鳃小片上含有大量的黏液。

鹅免疫淋巴器官的发育

目的:观察不同时期鹅主要免疫器官的组织学形态结构。方法:采用H-E染色对6个不同发育时期鹅的胸腺、法氏囊和脾进行组织学观察,统计胸腺小体、淋巴滤泡和脾小结数目并进行单因素方差分析。结果:研究显示鹅胸腺小体、法氏囊淋巴滤泡、脾小结数目在不同时期差异显著。结论:为深入了解鹅主要免疫器官组织分化发育过程、家禽免疫学和胚胎相关领域的形态学研究提供依据。

南极磷虾中的氟对大鼠软组织的毒性评估

应用动物实验模型,通过喂食Wistar大鼠南极磷虾,并设置对照组和相同氟剂量的氟化钠组,来评估、比较磷虾中氟的毒性。染毒结束取大鼠组织,进行苏木精和伊红(H-E)染色,观察切片病理变化,结果显示:对照组、磷虾组、氟化钠组大鼠体重及脏器系数没有显著性差异;对照组大鼠肝脏、肾脏、脾脏、脑组织未出现病变,磷虾组大鼠这四种组织均表现出少量病变,氟化钠组大鼠这四种组织的病变更加显著,反映了磷虾氟的毒性确实相对较低;对照组、磷虾组、氟化钠组的睾丸组织也没有发现病变。这些结果表明尽管南极磷虾氟的毒性较氟化钠低,但直接大量食用南极磷虾仍会对大鼠的软组织有一定的毒害作用,南极磷虾在开发作为食物时需要进行脱壳等脱氟处理。

滑鼠蛇胃肠道组织结构

探究滑鼠蛇胃、肠道的显微组织结构与特征,以便为滑鼠蛇的人工养殖与野生保护提供理论依据。采用常规解剖方法、石蜡制片和H-E染色技术,对滑鼠蛇的胃、肠道进行光镜下的组织学研究。结果表明:滑鼠蛇胃部的黏膜上皮为单层柱状上皮,固有层内有泡状腺和单管状腺两种腺体;胃腺中Ⅱ型细胞为未分化的主细胞与壁细胞,肌层由内环行肌和外纵行肌两层构成。小肠褶皱发达;黏膜上皮由大量柱状细胞和杯状细胞构成;小肠缺乏肠腺与黏膜下腺。大肠存在褶皱,没有肠腺。滑鼠蛇胃肠道可容纳大量食物,其消化能力弱于哺乳动物。

中华竹鼠肝脏的组织结构

通过探究中华竹鼠肝脏的显微组织结构与特征,为中华竹鼠的人工养殖以及野生保护提供理论依据。试验采用常规解剖方法、石蜡制片和H-E染色技术,在光镜下对中华竹鼠的肝脏进行组织学研究。结果表明:中华竹鼠肝脏分为被膜和实质两部分。被膜覆盖在肝脏表面,由外层较薄的结缔组织和内层的单层扁平细胞构成。实质内肝小叶分界不明显,小叶内无清晰肝细胞索状结构;肝血窦内存在枯否氏细胞;中央静脉大小不一,分布不均匀;肝细胞呈多边形,有1~2个胞核;门管区明显可见,且有丰富的淋巴丛;小叶间静脉大小差异较大,小叶间动脉大小形状与小叶间胆管相似,部分门管区两者都不易找到。

中华竹鼠肺脏的组织结构

探究中华竹鼠肺脏的组织结构,掌握其组织学特征,为中华竹鼠的人工养殖和野生保护提供理论依据。采用常规解剖方法、石蜡制片和H-E染色技术,对中华竹鼠的肺脏进行组织学研究。结果表明:中华竹鼠的肺脏由被膜、实质和间质构成。被膜由外层的间皮和间皮内侧的嗜酸性较强的弹性纤维构成。实质由肺内小支气管的各级分支及终末大量的肺泡构成,其中各级小支气管均无软骨片;从小支气管到终末细支气管,黏膜上皮逐渐变薄,杯状细胞、血管、腺体逐渐减少,平滑肌相对增加。间质包括结缔组织、血管和淋巴管等,竹鼠肺间质大部分较发达,肺内小动脉管壁的平滑肌含量较少。

不同日龄犊牛的睾丸组织结构比较观察

本试验对不同日龄荷斯坦公犊睾丸组织发育情况进行组织学观察。将15、30、60和90日龄的犊牛睾丸制成石蜡切片,并进行H-E染色分析。通过切片观察,得出犊牛的曲精细管生成阶段为60日龄前,此后,曲精细管数量逐步固定,管腔内部的细胞略有增殖,管壁由单细胞层向多细胞层生长,但整体生长比较缓慢。

基于太赫兹光谱和成像的前列腺癌检测

目的:探讨太赫兹电磁波应用于前列腺癌的诊断。方法:抽取32例前列腺癌患者的石蜡组织块,同时行H-E染色和太赫兹反射式成像检测后,根据H-E病理结果,找出前列腺组织块样本的肿瘤区域、正常前列腺组织区域、平滑肌区域,然后再对这3个区域行太赫兹透射式光谱检测。结果:反射式成像识别和H-E染色找出的肿瘤区域之间形状和面积大小都存在相关性(P<0.001);3类组织区域透射式光谱测出的吸收系数和折射率存在显著差异(P<0.001);肿瘤组织对太赫兹光谱的吸收系数与细胞核百分比存在相关性(P<0.001);5组不同分级分组的肿瘤组织之间的吸收系数均存在差异(P<0.001)。结论:太赫兹成像能较准确地识别石蜡包埋的前列腺肿瘤组织轮廓;太赫兹光谱技术不仅能区分平滑肌、肿瘤和正常前列腺组织,而且还能识别不同分级分组的前列腺癌;肿瘤石蜡组织对太赫兹的光学反应与细胞核百分比有关。

白介素-1β在大鼠皮肤创伤后不同时段的表达

目的观察白介素-1β(IL-1β)在大鼠皮肤创伤后的表达变化。方法 15只SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分为1d,3d,7d组,每组5只,采用全层皮肤切除制作创伤修复动物模型,造模后测量伤口未愈面积,并通过HE染色和免疫组织化学染色方法观察损伤区域不同时间段的组织病理学改变和IL-1β的表达变化。结果大鼠皮肤创伤后1d、3d、7d大鼠创伤皮肤未愈合面积均逐渐缩小,3d后的创面修复速率(79%)明显高于3d前的修复速率(2%)。IL-1β在动物上皮组织、巨噬细胞、成纤维细胞中有表达,阳性反应物主要定位在胞核、胞浆和基质中。创伤后IL-1β表达逐渐增强,3d达到高峰值,随后表达逐渐减弱。损伤后3d组IL-1β表达强度高于1d、7d组(P <0.05)。结论大鼠创伤皮肤修复模型诱导了IL-1β的表达,IL-1β在修复过程中发挥着重要作用。

小鼠腺胃常规显微制片的技术优化

基于石蜡制片和H-E染色的常规显微制片技术在临床病理诊断及基础医学的教学科研中应用十分广泛。高质量的显微切片应能最大程度维持组织的形态，做到切片完整，厚度均匀，无显著人工假象，染色对比清晰等。要想从根本上提高制片质量，须依靠技术方法的标准化和制片条件的优化。以小鼠腺胃常规制片为例。小鼠的腺胃与人类的胃在层次结构和组织学特点上近似，常用于教学和科研观察。但小鼠胃制片时常见腺体结构不完整、标本显微结构不清晰、收缩较严重以及平滑肌层过度分离等人工假像。针对这些问题，本实验通过比较不同种类固定液的固定效果、改变pH值、渗透压等条件，确定小鼠胃最佳固定液配方；此外，对于胃不同取材部位，处死后取材延搁时间以及胃排空前后状态等制作条件下小鼠胃显微形态结构进行比较；减轻了胃显微制片中常见的人工假象，优化了制片流程。对于其他标本的显微制片具有普遍的借鉴意义。

贵州白山羊皱胃黏膜石蜡切片的观察与分析

为了解贵州白山羊皱胃组织的结构特点,给贵州白山羊皱胃提供组织学观察基础。本试验采用石蜡切片技术制作贵州白山羊皱胃切片,经H-E染色进行观察分析。结果表明贵州白山羊皱胃黏膜从内向外依次为黏膜上皮、固有膜、黏膜肌层。黏膜上皮柱状细胞排列整齐似柱状,细胞核位于细胞底部。黏膜肌层紧贴固有膜。表明贵州白山羊皱胃黏膜的显微结构与其他单胃动物类似。根据贵州白山羊皱胃黏膜组织结构,为皱胃黏膜组织学提供观察基础以提高皱胃引起的消化道疾病防治率。