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胆汁螺杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立
被引量:
3
1
作者
伍妙梨
袁文
+5 位作者
饶丹
王静
朱余军
尹雪琴
黄韧
郭鹏举
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2015年第10期59-63,共5页
目的建立快速、敏感、特异的胆汁螺杆菌(Helicobacter bilis,H.bilis)Taq Man探针实时荧光定量PCR检测方法,对胆汁螺杆菌进行定量检测。方法 PCR扩增H.bilis保守基因P17序列全长ORF435 bp,进行TA克隆,构建质粒标准品p MD-HBP17。通过...
目的建立快速、敏感、特异的胆汁螺杆菌(Helicobacter bilis,H.bilis)Taq Man探针实时荧光定量PCR检测方法,对胆汁螺杆菌进行定量检测。方法 PCR扩增H.bilis保守基因P17序列全长ORF435 bp,进行TA克隆,构建质粒标准品p MD-HBP17。通过对p MD-HBP17标准品的定量分析,优化反应体系,检测Taq Man探针实时荧光定量PCR方法的灵敏度、特异性及重复性;用所建立的q PCR方法检测77份临床样品,并与普通PCR的检测结果作比对。结果所建立的q PCR检测方法,质粒DNA浓度在10^8-10^1拷贝之间表现出较好的线性和相关性,所得标准曲线的斜率为-3.46,相关系数为0.999,检测灵敏度达到20个拷贝,对77份临床样品的检出率为14.3%,较普通PCR(7.8%)的检出率高。结论建立的H.bilis q PCR检测方法特异性好、敏感性高、稳定性强,可用于胆汁螺杆菌的定量及定性检测。
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关键词
胆汁螺杆菌(
h.bilis
)
荧光定量PCR(q
PCR)
TAQ
Man探针
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职称材料
题名
胆汁螺杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立
被引量:
3
1
作者
伍妙梨
袁文
饶丹
王静
朱余军
尹雪琴
黄韧
郭鹏举
机构
广东省实验动物监测所
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2015年第10期59-63,共5页
基金
国家科技支撑计划(2013BAK11B01)
文摘
目的建立快速、敏感、特异的胆汁螺杆菌(Helicobacter bilis,H.bilis)Taq Man探针实时荧光定量PCR检测方法,对胆汁螺杆菌进行定量检测。方法 PCR扩增H.bilis保守基因P17序列全长ORF435 bp,进行TA克隆,构建质粒标准品p MD-HBP17。通过对p MD-HBP17标准品的定量分析,优化反应体系,检测Taq Man探针实时荧光定量PCR方法的灵敏度、特异性及重复性;用所建立的q PCR方法检测77份临床样品,并与普通PCR的检测结果作比对。结果所建立的q PCR检测方法,质粒DNA浓度在10^8-10^1拷贝之间表现出较好的线性和相关性,所得标准曲线的斜率为-3.46,相关系数为0.999,检测灵敏度达到20个拷贝,对77份临床样品的检出率为14.3%,较普通PCR(7.8%)的检出率高。结论建立的H.bilis q PCR检测方法特异性好、敏感性高、稳定性强,可用于胆汁螺杆菌的定量及定性检测。
关键词
胆汁螺杆菌(
h.bilis
)
荧光定量PCR(q
PCR)
TAQ
Man探针
Keywords
Helicobacter bilis
QPCR
Taq Man probe
分类号
R-332 [医药卫生]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
胆汁螺杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立
伍妙梨
袁文
饶丹
王静
朱余军
尹雪琴
黄韧
郭鹏举
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2015
3
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