H101腺病毒对K562白血病细胞的作用

目的探讨E1B缺陷型腺病毒(H101)对K562白血病细胞的生长抑制作用。方法选用不同浓度H101腺病毒,体外感染K562白血病细胞株,通过白血病细胞感染率、细胞生长曲线、台盼蓝蓝染细胞数、MTT法检测细胞抑制率等检测细胞的增殖受抑和细胞毒作用情况。结果H101腺病毒转导K562细胞随浓度增加而有所增加,但为很低的转染率;诱导K562白血病细胞株死亡效率很低,仅在高剂量组达到30%的死亡率;对K562细胞的生长有一定的影响,与未转染组比较,随剂量加大,生长受抑制程度逐渐明显,高剂量组第4天为19.5%;MTT法测定细胞抑制率提示随剂量加大,对K562细胞抑制程度逐渐加大,高剂量组抑制率为22.7%。结论E1B缺陷型腺病毒(H101)在体外人白血病细胞K562的生长有一定的抑制作用,但是杀伤作用不显著。

基因工程腺病毒(H101)瘤内注射联合化疗治疗头颈部及食管鳞癌的Ⅲ期临床研究

背景与目的:H101是利用基因重组技术得到的一种删除了E1B部分基因片段的溶瘤腺病毒,其在一定剂量范围内对肿瘤有明显的抑制作用。本研究目的是比较H101瘤内注射联合顺铂(cisplatin,DDP)+5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)或阿霉素(adriamycin,ADM)+5-FU方案化疗与单纯化疗对头颈、食管鳞癌的治疗效果及毒副作用。方法:160例入选患者,根据过去化疗史分别选定不同化疗方案。未用过PF方案化疗或用过PF方案有效者采用PF方案化疗,已用过PF方案无效者则采用AF方案化疗。采用多中心随机对照分组,分别加用(A组)或不加用(B组)肿瘤浅表病灶内注射H101。两组均为21天一个周期,所有患者至少接受2个周期的治疗。结果:完全符合方案标准的病例123例,A1组(PF+H101)有效率为78.8%,B1组(PFonly)为39.6%,A2组(AF+H101)为50%(7/14),B2组(AFonly)50%(2/4)。A1、B1组间以及A1+A2、B1+B2组间疗效差异有显著性(P=0.000)。45.7%病例出现轻～中度发热,28.3%出现注射局部反应,9.8%出现流感样症状。结论:H101注射液瘤内局部注射联合化疗的客观有效率比单纯化疗组高,显示H101瘤内注射对于头颈、食管鳞癌具有明确的治疗作用,且具有较高的安全性。

重组人5型腺病毒H101联合索拉非尼对肝癌细胞株HepG2的体外抑制作用

目的:探讨重组人5型腺病毒H101联合索拉非尼(sorafenib)体外对人肝癌细胞株Hep G2增殖及凋亡的影响。方法:将重组人5型腺病毒H101和索拉非尼分成单用组及联合用药组,作用于Hep G2细胞,另设不加药对照组。CCK-8法检测Hep G2细胞存活率,流式细胞术及DAPI染色检测Hep G2细胞凋亡。结果:重组人5型腺病毒H101及索拉非尼均可显著抑制Hep G2细胞增殖并诱导其凋亡;与重组人5型腺病毒H101或索拉非尼单用相比,两药联合对Hep G2细胞增殖抑制及诱导凋亡作用更为显著(均P<0.05)。结论:重组人5型腺病毒H101、索拉非尼单用及联用均能体外抑制Hep G2细胞增殖并诱导其凋亡,且在特定索拉非尼浓度范围内两药联合存在协同作用。

重组人5型腺病毒对B16黑色素瘤生长的抑制作用

目的研究瘤内直接注射重组人5型腺病毒H101对B16黑色素瘤生长以及对手术后再次接种B16黑色素瘤细胞后肿瘤生长的影响。方法建立小鼠B16黑色素瘤动物模型。瘤内直接注射H101腺病毒,测量肿瘤体积,切除肿瘤,再次接种B16黑色素瘤细胞,观察肿瘤生长情况。结果细胞接种8 d后,全部小鼠均长出肿瘤。H101注射组肿瘤的体积在给药后3,6,9 d,都显著小于对照组。再次接种B16黑色素瘤细胞后,H101注射组肿瘤的生长速度也显著小于对照组。结论瘤内直接注射H101对B16黑色素瘤生长具有抑制作用,对手术后再次接种的肿瘤生长也具有抑制作用。

索拉非尼与重组腺病毒H101对肝癌细胞株HepG2的作用及机制研究

目的:研究索拉非尼与重组腺病毒H101对肝癌细胞株HepG2的作用并分析其具体机制。方法:选择索拉非尼、重组腺病毒H101分别组成重组腺病毒H101组、索拉非尼组、两药联合组以及空白对照组,并分别作用于购自中国科学院上海细胞生物研究所细胞库的肝癌细胞株HepG2。采用流式细胞技术检测HepG2细胞的凋亡情况;采用Western blot法检测细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)以及髓样细胞白血病-1(Mcl-1)蛋白相对表达量;采用酶联免疫吸附法检测不同组别细胞培养上清液中的血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果:重组腺病毒H101组、索拉非尼组、两药联合组的G0-G1期与G2-M期细胞均明显低于空白对照组,S期细胞均明显高于空白对照组,且两药联合组较重组腺病毒H101组与索拉非尼组更明显,差异均有统计学意义(均P<0.05);重组腺病毒H101组、索拉非尼组、两药联合组的HepG2细胞凋亡率明显高于空白对照组,而两药联合组又明显高于重组腺病毒H101组与索拉非尼组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。重组腺病毒H101组、索拉非尼组、两药联合组的p-ERK1/2、Mcl-1蛋白相对表达量和VEGF表达均明显低于空白对照组,而两药联合组又明显低于重组腺病毒H101组与索拉非尼组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:索拉非尼、重组腺病毒H101均可抑制肝癌细胞株HepG2的增殖,并诱导其凋亡,控制VEGF表达,联合应用具有更明显的效果,其主要机制可能与二者协同作用有效抑制p-ERK1/2、Mcl-1蛋白表达有关。