H11蛋白基因对p38MAPK磷酸化的影响及其对烧伤后心肌损伤的保护作用

目的探讨H11蛋白基因对p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）磷酸化的影响及其对烧伤后心肌损伤的保护作用。方法选取36只雄性Wistar大鼠,建立大鼠重度烧伤模型,随机抽取24只纳入烧伤组,对烧伤组进行1～18 h的缺氧刺激,缺氧6～18 h的纳入D1组（12例）,缺氧1～6 h的纳入D2组（12例）,正常大鼠纳入D3组（12例）。烧伤处理后提取心肌细胞RNA,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测法分析烧伤后1 h、3 h、6 h、12 h、18 h各时间点H11蛋白基因mRNA表达情况,同时采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测缺氧刺激后5h D1、D2组血清p38MAPK磷酸化水平、核因子-κB（NF-κB）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。结果 D1、D2组H11蛋白基因mRNA水平随时间延长较D3组显著增加（P〈0.05）,烧伤后6～12 h时H11蛋白基因mRNA水平达峰值;D1组刺激后p38MAPK磷酸化水平（0.21±0.12）μg/L、NF-κB（0.14±0.12）μg/L、TNF-α（0.28±0.04）μg/L水平显著低于D2组（P〈0.05）。结论 H11蛋白基因可抑制p38MAPK磷酸化,且能减轻烧伤后心肌损伤,具有保护心肌作用。

抗捻转血矛线虫天然H11蛋白单克隆抗体的制备及特性分析

为制备捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)天然H11蛋白的单克隆抗体,以伴刀豆球蛋白(Concanavalin A,Con A)凝集素提取的天然H11蛋白为免疫原,免疫4~6周龄雌性BALB/c小鼠,3次免疫后分离小鼠脾细胞并将其与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA方法筛选,获得2株能稳定分泌抗H11蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为A1E3和A10E1。通过亚型鉴定和免疫学分析显示,2株单克隆抗体的重链均属于IgG1,轻链均为κ型,并且这2株单抗均能识别虫体天然抗原H11。免疫组化定位和体外幼虫发育抑制试验表明,mAb A1E3可以定位到成虫的肠道微绒毛部位,该抗体能够抑制四期幼虫的生长发育。单抗的成功制备不仅为研究H11蛋白保护性抗原表位以及开发表位疫苗奠定基础,也为单抗治疗动物捻转血矛线虫病提供了潜在的应用前景。