HIF-1α在乳腺癌组织中的表达及与HER-2、Survivin表达的相互关系

背景与目的:H IF-1α、HER-2和Survivin是乳腺癌的重要预后因子,但其是否存在内在的联系尚不清楚。本实验研究H IF-1α在乳腺癌组织中的表达,并探讨其与HER-2、Survivin表达的相互关系。方法:免疫组化法检测51例乳腺癌组织中H IF-1α、HER-2、Survivin的表达。结果:①本组51例中,28例H IF-1α呈阳性表达,阳性率为55%;Survivin阳性率为69%;HER-2强阳性表达率为22%。②在H IF-1α阳性表达的样本中与H IF-1α阴性表达的样本中,HER-2的强阳性表达差异有非常显著性(P<0.01);但Survivin的表达差异无显著性(P>0.05)。结论:H IF-1α在乳腺癌中的表达水平与HER-2强阳性表达相关,与Survivin表达无关。

槲皮素对缺氧人肝癌细胞HepG2增殖及HIF-1α、VEGF的影响

目的探讨槲皮素对缺氧人肝癌细胞Hep G2增殖能力、HIF-1α以及VEGF表达的影响及其可能机制。方法实验的细胞分为正常对照组、缺氧组、槲皮素+缺氧组,采用Co Cl2法诱导缺氧环境。采用MTT法检测各组细胞增殖能力,实时定量PCR及Western blot检测各组细胞缺氧诱导因子HIF-1α和VEGF mRNA及蛋白表达。结果与正常对照组比较,缺氧组细胞在24、48、72 h增殖能力降低(P<0.05),与缺氧组比较,槲皮素+缺氧组细胞在24、48、72 h增殖能力显著降低(P<0.05),正常组在24、48、72 h的光密度值分别为0.640±0.016、1.287±0.025、1.738±0.027,缺氧组的光密度值分别为0.551±0.021、0.851±0.028、1.268±0.018,槲皮素+缺氧组的光密度值分别为0.435±0.023、0.717±0.013、0.984±0.037。与正常对照组比较,缺氧组细胞HIF-1α、VEGF的mRNA及蛋白表达上调(P<0.05),而槲皮素可下调缺氧细胞中VEGF mRNA及蛋白表达,对HIF-1αmRNA及蛋白表达无影响(P>0.05):正常对照组HIF-1α、VEGF的mRNA表达均为1.000±0.000,蛋白表达分别为0.616±0.016、0.831±0.034,缺氧组HIF-1α、VEGF的mRNA表达分别为2.298±0.031、2.065±0.090,蛋白表达分别为1.385±0.047、2.022±0.076,槲皮素+缺氧组HIF-1α、VEGF的mRNA表达2.326±0.027、0.990±0.077,蛋白表达分别为1.406±0.029、1.137±0.054。结论槲皮素可抑制缺氧肝癌细胞Hep G2增殖能力,这可能与槲皮素下调细胞中VEGF表达有关。

黄枇烟吸入对肺癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及其对HIF-1α、VEGF表达的影响

目的:观察黄枇烟吸入对肺癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及其对去氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达及肿瘤微血管密度(MVD)的影响。方法:建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,实验分为模型组、黄枇烟吸入低剂量组、高剂量组和顺铂组,每组10只。各组给药2周后,处死大鼠,取瘤称重,计算抑瘤率;免疫组化法检测瘤组织HIF-1α、VEGF的表达,光镜观察病记录MVD。结果:与模型组比较,黄枇烟吸入低剂量组、高剂量组和顺铂组均能够抑制肿瘤生长,而以化疗药顺铂组作用最强,黄枇烟吸入高、低剂量组次之。各给药组均能抑制肿瘤血管HIF-1α、VEGF因子的表达以及降低MVD计数,以顺铂组作用最明显,黄枇烟吸入高、低剂量组次之。结论:黄枇烟吸入可抑制肺癌小鼠肿瘤生长,其作用机制与下调HIF-1α、VEGF的表达及抑制肿瘤血管生成有关。

缺氧对人肝癌HepG2细胞HIF-1α、PCNA表达水平的影响

目的：探讨缺氧对人肝癌HepG2细胞中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响。方法：体外培养HepG2细胞，通过CoCl2化学模拟缺氧作用，采用实时荧光定量聚合酶链式反应实验（Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，PCR）检测基因HIF-1α、PCNA mRNA水平变化，蛋白质印迹（Western Blot，WB）检测HIF1-1α、PCNA蛋白表达水平的变化，细胞化学染色检测HIF-1α、PCNA蛋白表达变化。结果：CoCl2导致的化学缺氧可诱导人肝癌HepG2细胞HIF-1α、PCNA的上调表达。结论：缺氧可提高HIF-1α的表达，可能促进肝癌细胞的进一步增殖。

缺氧诱导因子-1α与绿色荧光蛋白在神经干细胞中的共表达

目的:以携带缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)及绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因的腺病毒转染大鼠神经干细胞(Neuralstemcells,NSCs),观察HIF-1α和GFP在NSCs中的表达以及对NSCs生物学特性的影响,为HIF-1α基因转染的NSCs移植治疗缺血性脑血管病提供物质基础。方法:利用携带HIF-1α和GFP基因的重组腺病毒转染NSCs,相差显微镜下观察NSCs的形态及在荧光显微镜下观察NSCs及其诱导分化后的GFP表达情况;观察HIF-1α基因在NSCs中的表达;并检测NSCs的细胞活性。应用免疫荧光技术检测神经干细胞及其诱导后分化细胞的特异性蛋白巢蛋白(Nestin)、神经微丝蛋白(Neurofilamentprotein)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。结果:重组腺病毒转染NSCs后外源性基因及绿色荧光蛋白有持续稳定表达;转染后的NSCs的形态学、细胞活性和分化能力等与未转染的NSCs无明显差异(P>0.05);检测神经元标志物神经微丝蛋白和胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白,证实转染后的NSCs仍然具有多向分化潜能。结论:NSCs转染携带HIF-1α和GFP基因的重组腺病毒后能够持续、稳定地表达HIF-1α和GFP,生物学特征正常。