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高效化学偶联的H1N1灭活病毒核酸适配体比色传感器
1
作者
潘雅杰
张巧巧
+1 位作者
王峥
娄新徽
《首都师范大学学报(自然科学版)》
2024年第3期87-96,共10页
以A型H1N1灭活流感病毒为例,建立一种高灵敏、高特异、便于产业化和高生物安全性的快速检测高传染性病原体的方法——磁交联沉淀-纳米金联用(MCP-GNP)比色法。首先,利用磁珠上活化的羧基与灭活病毒表面上蛋白质的一级胺基之间高效的化...
以A型H1N1灭活流感病毒为例,建立一种高灵敏、高特异、便于产业化和高生物安全性的快速检测高传染性病原体的方法——磁交联沉淀-纳米金联用(MCP-GNP)比色法。首先,利用磁珠上活化的羧基与灭活病毒表面上蛋白质的一级胺基之间高效的化学偶联实现对灭活病毒的捕获;其次,将核酸适配体与捕获了灭活病毒的磁珠进行孵育,核酸适配体特异性识别H1N1灭活病毒,磁性分离后热洗脱磁珠上结合的核酸适配体;再次,对热洗脱的核酸适配体进行聚合酶链式反应(PCR)扩增;最后,利用纳米金对单链引物和双链扩增产物吸附能力的差异,实现对H1N1灭活病毒的比色检测。以H5N1灭活病毒为阴性对照组,检出限(S/N=3)为1 ng/L,是本课题组之前报道的特异性电化学阻抗传感器检出限的1/900。利用上述方法首次实现了对低病毒载量临床H1N1灭活病毒阳性咽拭子样本的比色检测。未经优化的条件下,从灭活病毒捕获到检测的全流程在3 h内完成,初步展示了其临床应用价值。此外,文中所有比色检测结果均与荧光定量PCR技术的测量结果一致,证实了方法的可靠性。本文的核心创新点是利用化学偶联进行超低质量浓度灭活病毒捕获,无需对病毒核酸进行提取和富集,更加便捷。此外,本研究利用H1N1灭活病毒的DNA核酸适配体实现病毒的特异性检测,不直接检测活病毒,具有高生物安全性。
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关键词
h1n1灭活病毒
核酸适配体
化学偶联
纳米金
比色检测
荧光实时定量PCR
下载PDF
职称材料
接种甲型H_1N_1灭活流行性感冒病毒裂解疫苗引起过敏反应1例报告
2
作者
何梅
罗成
韩淑华
《中国疫苗和免疫》
CAS
2010年第6期540-540,共1页
患者,女,37岁。2009年11月24日到县疾病预防控制中心预防接种门诊,自愿要求接种甲型H1N1灭活流行性感冒(甲流)病毒裂解疫苗。经询问,无接种禁忌证、无过敏史、无预防接种异常反应史。填写好个案信息登记卡。
关键词
预防接种
甲型
h
1
n
1
灭
活
流行性感冒
病毒
裂解疫苗
过敏反应
原文传递
题名
高效化学偶联的H1N1灭活病毒核酸适配体比色传感器
1
作者
潘雅杰
张巧巧
王峥
娄新徽
机构
首都师范大学化学系
出处
《首都师范大学学报(自然科学版)》
2024年第3期87-96,共10页
基金
国家自然科学基金项目(22374104,21675112)。
文摘
以A型H1N1灭活流感病毒为例,建立一种高灵敏、高特异、便于产业化和高生物安全性的快速检测高传染性病原体的方法——磁交联沉淀-纳米金联用(MCP-GNP)比色法。首先,利用磁珠上活化的羧基与灭活病毒表面上蛋白质的一级胺基之间高效的化学偶联实现对灭活病毒的捕获;其次,将核酸适配体与捕获了灭活病毒的磁珠进行孵育,核酸适配体特异性识别H1N1灭活病毒,磁性分离后热洗脱磁珠上结合的核酸适配体;再次,对热洗脱的核酸适配体进行聚合酶链式反应(PCR)扩增;最后,利用纳米金对单链引物和双链扩增产物吸附能力的差异,实现对H1N1灭活病毒的比色检测。以H5N1灭活病毒为阴性对照组,检出限(S/N=3)为1 ng/L,是本课题组之前报道的特异性电化学阻抗传感器检出限的1/900。利用上述方法首次实现了对低病毒载量临床H1N1灭活病毒阳性咽拭子样本的比色检测。未经优化的条件下,从灭活病毒捕获到检测的全流程在3 h内完成,初步展示了其临床应用价值。此外,文中所有比色检测结果均与荧光定量PCR技术的测量结果一致,证实了方法的可靠性。本文的核心创新点是利用化学偶联进行超低质量浓度灭活病毒捕获,无需对病毒核酸进行提取和富集,更加便捷。此外,本研究利用H1N1灭活病毒的DNA核酸适配体实现病毒的特异性检测,不直接检测活病毒,具有高生物安全性。
关键词
h1n1灭活病毒
核酸适配体
化学偶联
纳米金
比色检测
荧光实时定量PCR
Keywords
h
1
n
1
i
n
activated virus
aptamer
c
h
emical crossli
n
ki
n
g
gold
n
a
n
oparticles
colorimetric detectio
n
real-time qua
n
titative PCR
分类号
O65 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
接种甲型H_1N_1灭活流行性感冒病毒裂解疫苗引起过敏反应1例报告
2
作者
何梅
罗成
韩淑华
机构
秭归县疾病预防控制中心
秭归县医院
出处
《中国疫苗和免疫》
CAS
2010年第6期540-540,共1页
文摘
患者,女,37岁。2009年11月24日到县疾病预防控制中心预防接种门诊,自愿要求接种甲型H1N1灭活流行性感冒(甲流)病毒裂解疫苗。经询问,无接种禁忌证、无过敏史、无预防接种异常反应史。填写好个案信息登记卡。
关键词
预防接种
甲型
h
1
n
1
灭
活
流行性感冒
病毒
裂解疫苗
过敏反应
分类号
R186 [医药卫生—流行病学]
R511.7 [医药卫生—内科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高效化学偶联的H1N1灭活病毒核酸适配体比色传感器
潘雅杰
张巧巧
王峥
娄新徽
《首都师范大学学报(自然科学版)》
2024
0
下载PDF
职称材料
2
接种甲型H_1N_1灭活流行性感冒病毒裂解疫苗引起过敏反应1例报告
何梅
罗成
韩淑华
《中国疫苗和免疫》
CAS
2010
0
原文传递
已选择
0
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