贵州省麻疹疫苗强化免疫后麻疹野病毒基因特征分析

目的了解贵州省麻疹疫苗强化免疫后麻疹野病毒的基因型特征,为麻疹消除提供科学依据。方法将收集的咽拭子或尿液标本接种到单层Vero/SLAM细胞,获取阳性分离物后提取其病毒RNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对麻疹病毒核蛋白(N)基因羧基(COOH)末端676个核苷酸片段进行扩增,对扩增产物进行核苷酸序列测定和分析。以C末端456个核苷酸片段构建基因亲缘性关系树,分析毒株间相互关系。结果2007年贵州省共分离到11株麻疹野病毒,与H1a参考株China 9344的核苷酸差异为0.9%～1.4%,同属于H1a基因亚型。分离的麻疹野病毒包括2个亚支(即GZ07-1与GZ07-3,GZ07-6～12),分属不同的病毒传播链。GZ-06～12为相同麻疹野毒株引起的传播,GZ07-1、GZ07-3和GZ04-5是来源于一个祖先病毒的传播,为同一麻疹野毒株不同年份的传播。结论贵州省麻疹强化免疫后流行的麻疹野病毒为H1a基因亚型,与中国的优势株保持一致,未见强化免疫前存在的H1b基因亚型流行。存在相同麻疹野毒株引起的传播和同一麻疹野毒株不同年份的传播,需加强麻疹疫苗覆盖率和病毒分子流行病学监测。

甘肃省麻疹野病毒流行株分离鉴定研究

目的应用Vem，sLAM细胞培养技术，分离鉴定麻疹病毒。方法Veto／SLAM细胞形成单层后接种标本，于5％CO2条件下培养，出现典型融合性细胞病变（CPE）者为阳性，盲传3代后仍无病变者，为病毒分离阴性。应用RT-PCR（逆转录－聚合酶链反应）对麻疹病毒株进行基因型别检测、研究、分析。结果应用Veto／SLAM细胞，首次分离鉴定出的甘肃省麻疹野病毒流行株，其基因测序属H1a基因型，是本土麻疹野病毒流行株。结论Veto／SLAM细胞对麻疹病毒高度敏感，应在麻疹病毒分离中推广使用。

2015-2019年北京市麻疹病毒分子流行病学分析

目的分析2015-2019年北京市麻疹病毒(measles virus,MV)分子流行病学特征,为消除麻疹提供实验室依据。方法通过北京市麻疹实验室网络收集2015-2019年麻疹病毒阳性咽拭子标本,提取病毒核酸后采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增麻疹病毒N基因C末端450个核苷酸片段,对扩增产物进行核苷酸序列测定,获得基因序列同WHO麻疹病毒基因型代表株、中国和其他国家D8基因型参考株构建系统进化树,分析核苷酸和氨基酸同源性;对D8和B3基因型麻疹病例进行描述性分析。结果2015-2019年全市麻疹病毒基因型鉴定株546株,其中H1a基因型531株,疫苗株5株,B3基因型1株,D8基因型9株,其中8株为2019年流行株。本土株H1a基因型MV核苷酸和氨基酸同源性为91.5%~100.0%和73.6%~100.0%。2019年8例D8基因型麻疹病例均为成人,其中2例为一起暴发疫情,其余6例为散发病例。结论输入性D8基因型成为2019年北京市MV主要流行基因型;2015-2019年随着麻疹发病下降,本土基因型H1a已经不占优势,而其他不同基因型输入,形成混合流行的趋势,建议在消除麻疹工作中,不仅要努力阻断本土麻疹病毒传播,更要防控非本土基因型病毒输入和持续传播,避免其逐渐演化为优势毒株而建立本土传播的风险。

云南省2009～2015年边境地区麻疹病毒分子流行病学监测

对2009~2015年在云南省边境地区流行的麻疹病毒进行分子流行病学研究,为边境地区麻疹防控策略的制定提供重要的实验室数据。本研究使用Vero/SLAM细胞对云南边境地区麻疹患者中采集的临床标本进行麻疹病毒分离,使用RT-PCR方法扩增阳性病毒核蛋白羧基末端的676个核甘酸,并进行序列测定和分析,随后基于N基因羧基末端450个核苷酸序列进行基因分型以及核苷酸和氨基酸变异分析。云南省自2004年开始开展麻疹病毒学监测,2009~2015年在边境地区共检测到麻疹病毒99株,其中H1a基因型病毒39株(39.4%),为本土流行株;A基因型3株(3.0%),为疫苗相关病例毒株;D9基因型51株(51.5%),D11基因型6株(6.1%),D基因型的比例高达分离毒株的57.6%,均为境外输入的基因型毒株。境外D9和D11型流行株的输入,对边境地区的麻疹疫情防控带来了一定的影响,特别是D9基因型一定时间段内在云南边境形成了持续流行,应引起足够的重视。

2013年北京市大兴区麻疹检测分析

目的分析2013年大兴区麻疹实验室检测结果,了解大兴区麻疹的流行状况,野病毒基因型特征。方法疾控中心采集麻疹疑似病例的血液标本117件,进行麻疹IgM抗体检测;133件咽拭子或尿液标本,以及这些标本的病毒分离物,提取核酸后进行基因分型检测。结果 117件血液标本中,IgM抗体阳性的43件,阳性率36.75%。分型检测产生21株麻疹H1a基因型,占全部核酸阳性的23.08%;4株麻疹D8基因型,占全部核酸阳性的4.40%。结论 2013年大兴区麻疹优势流行基因型为H1a,与北京地区的流行趋势基本相同,D8基因型为北京市新发现的基因型,大兴区出现D8基因型麻疹野毒株,具有一定的研究价值。同时,发现单一的血清学检测分析已经不能全面的说明当地麻疹流行状况,应结合分子生物学技术提高麻疹病原学监测的敏感性。