小鼠肝、再生肝、H22_a腹水型肝癌细胞及荷癌鼠肝中脂质过氧化物水平与SOD及GSH-P_x酶活力

测定了再生鼠肝、H22_a 腹水型肝癌细胞及荷癌鼠肝中脂质过氧化物水平、SOD 及 GSH-Px 的活力,与正常鼠肝相比,再生鼠肝和荷癌鼠肝的脂质过氧化物水平增高,GSH-Px 活力降低,荷瘤鼠肝的 SOD 活力也高于正常鼠肝,去甲斑蝥素和斑蝥酸钠能使荷瘤鼠肝的 GSH-Px 活力上升,脂质过氧化物水平下降。

不同剂量H22肝癌细胞株对C57BL/6J小鼠原位肝癌造模的影响研究

目的:比较不同剂量H22传代小鼠腹水细胞构建原位肝癌移植模型小鼠的成瘤率、腹水率及存活率,以期构建和完善该模型。方法:115只C57BL6/J小鼠随机分为三组(10μL组、20μL组、30μL组),选取浓度为1×1013/m L的H22传代小鼠腹水细胞沿肝长轴直接注射接种到肝脏实质内,每组分别于第10、20 d随机选取15只给予麻醉后脱颈椎处死,肝脏称重,测量瘤体体积及重量,观察肝脏外观及病理学改变,每组预留5只观察其存亡天数,计算成瘤率、腹水率及存活率。结果:115只模型小鼠有114只均可见肿瘤,成瘤率99%;10μL组腹水率7%,20μL组腹水率46%,30μL组腹水率63%。结论:使用10μL浓度为1×1013/m L的H22传代小鼠腹水细胞悬液建立小鼠原位肝癌模型,其成瘤率高,腹水率低,存活时间较长,是较为理想的肝癌小鼠模型。

转种H22肿瘤细胞小鼠腹水骨钙素浓度初步研究

测定转种Ｈ２２肿瘤细胞小鼠的腹水骨钙素浓度，并与正常小鼠腹腔液对比。结果表明，转种１０ｄ和１３ｄ后，腹水骨钙素浓度明显下降，分别比正常对照组约低７７％和８３％，Ｐ＜００２。

八月札水提物对H22荷瘤小鼠突变型P53、Bcl-2和增殖细胞核抗原表达的影响

目的探讨八月札水提物对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞增殖的抑制作用及其机制。方法健康昆明种小鼠90只制备为荷瘤小鼠并随机分成6组。通过苏木精-伊红(HE)染色观察各组肝脏、肾脏和肿瘤组织细胞的病理改变,免疫组织化学法检测各组肿瘤组织细胞中突变型(m)P53、Bcl-2和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达。结果对照组和八月札水提物组肝脏和肾脏未见明显病理学改变,CTX组和联合用药组可见轻微病理改变。与对照组比较,CTX组、水提低组、水提高组和水提低+CTX组、水提高+CTX组肿瘤组织重量明显降低(P<0.01),肿瘤抑制率分别为44.0%、36.4%、38.0%、58.4%和60.0%。与对照组比较,八月札水提物能够显著降低H22荷瘤小鼠肿瘤组织中mP53、Bcl-2和PCNA蛋白的表达(P<0.01)。其中,以八月札水提低+CTX组肿瘤组织中mP53、Bcl-2和PCNA蛋白阳性率最低,分别为(33.18±5.89)%,(22.11±5.28)%,(19.28±7.12)%。结论八月札水提物能够阻止H22荷瘤小鼠肿瘤组织mP53蛋白的生成,下调抑制凋亡基因Bcl-2的表达,抑制PCNA蛋白的表达,从而达到抑制肿瘤组织细胞增殖的作用,且对CTX表现出一定的增效减毒作用。

银杏酚对SMMC-7721肝癌细胞和荷H22肝癌小鼠的抗癌作用

目的:研究银杏酚对体外SMMC-7721肝癌细胞的毒性作用,及对体内荷H22肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用。方法:MTT法测定银杏酚对SMMC-7721细胞的抑制作用,计算半数抑制质量浓度IC50。建立小鼠肝癌H22实体瘤模型,并随机分为模型对照组,环磷酰胺组,银杏酚20、40、80、160 mg/kg组,分别于腹腔注射生理盐水,环磷酰胺,20、40、80、160 mg/kg银杏酚,连续给药7 d。于末次给药后24 h,眼球采血后脱颈处死小鼠,剥离瘤体,分别摘取脾脏、胸腺,计算抑瘤率、脾指数和胸腺指数,并作血常规检测。结果:银杏酚作用于SMMC-7721细胞24、48和72 h的半数抑制质量浓度IC50分别为(15.33±1.19)、(12.20±1.08)、(10.88±1.03)mg/L。银杏酚20、40、80、160 mg/kg组的抑瘤率分别为8.96%、39.81%、48.51%和28.36%,除外40 mg/kg组,其余组与环磷酰胺组(42.94%)比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。银杏酚组的胸腺指数较模型对照组均明显降低(P均<0.05);银杏酚组的外周血淋巴细胞数明显高于模型对照组与环磷酰胺组(P均<0.05)。结论:银杏酚于体外能抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长,并呈时间和剂量依赖关系;于体内能显著抑制荷H22肝癌小鼠肿瘤生长,其抑瘤作用可能与调节机体的免疫功能有关。

鳖甲煎丸对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及对增殖细胞核抗原表达的影响

目的研究鳖甲煎丸对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及机制探讨。方法建立H22荷瘤小鼠动物模型,随机分成4组:鳖甲煎丸高剂量组、鳖甲煎丸低剂量组、阴性对照组、环磷酰胺组。连续用药15d。第15天处死小鼠,计算胸腺指数、脾指数;剥离瘤块称重并计算抑瘤率;用免疫组织化学方法检测各组荷瘤小鼠肿瘤组织的增殖细胞核抗原的表达强度。结果鳖甲煎丸有较好的抑瘤作用;鳖甲煎丸对H22荷瘤小鼠肿瘤组织的增殖细胞核抗原有显著的抑制作用。结论鳖甲煎丸抑瘤作用机制之一可能是通过抑制肿瘤组织的增殖细胞核抗原来实现的。

生物蜂王浆抑制腹水型肝癌细胞H_(22)生长的实验研究

目的 :观察生物蜂王浆对腹水型肝癌细胞 H2 2 体内生长的抑制作用。方法 :以不同的生物蜂王浆即 :经扶正抗癌 1号方、以毒攻毒 2号方、清热解毒 3号方喂养的蜜蜂所分泌的蜂王浆分别灌喂荷 H2 2 肿瘤小鼠后 ,观察其体内抗肿瘤效果 ,并以普通蜂王浆和生理盐水灌喂为对照。 结果 :在所有生物蜂王浆灌喂组中 ,1号生物蜂王浆有明显抑制肿瘤生长和延长生存期的作用 ;并能显著增加小鼠外周血白细胞数 ,升高血 IL- 2和 IFN- γ含量 ;组织学检查显示 ,肿瘤细胞大部分变性坏死 ,肿瘤周围有大量淋巴细胞、浆细胞浸润。 结论 :1号生物蜂王浆具有明显抗肿瘤作用 ,其机制可能与抑制或杀伤肿瘤细胞 ,提高机体的免疫功能有关。

中药调衡方对S_(180)与H_(22)荷瘤小鼠TNF与LAK细胞活性的影响

目的:研究调衡Ⅰ、Ⅱ号对S180与H22荷瘤小鼠抑瘤作用的免疫机制。方法:建立小鼠S180与H22实体瘤模型,用酶标仪检测S180与H22荷瘤小鼠外周血TNF(肿瘤坏死因子)及LAK细胞(淋巴因子激活杀伤细胞)的活性水平。结果:调衡Ⅰ、Ⅱ号方在31.5g/kg、42g/kg剂量下,对S180与H22荷瘤小鼠外周血TNF与LAK细胞活性水平有显著地增强作用。结论:调衡Ⅰ、Ⅱ号对S180与H22荷瘤小鼠的抑瘤作用机制可能与提高小鼠外周血TNF与LAK细胞的活性有关。

益气健脾方对H22肝癌腹水小鼠生存期及体重的影响

目的:探讨益气健脾方对于H22肝癌腹水的生存期及体重的影响。方法:取传代后的H22腹水接种于小鼠腹腔,造成H22肝癌腹水模型,随机分为4组:模型组、5-Fu组、益气健脾小剂量组、益气健脾大剂量组,每组10只,造模后开始给药,模型组予灌NS 0.4 mL;5-Fu组,予隔日灌胃0.2 mL/d;益气健脾大、小剂量组分别灌益气健脾方不同浓度0.4 mL/d,灌胃至空白组出现第1只死亡时停止灌胃,观察各组小鼠的生存时间及体重的变化。结果:其他3组小鼠体重增长情况较空白组有无显著差异;生存期大剂量组与小剂量组之间存在差异,5-Fu组生存时间最长,较其他3组有显著差异。结论:益气健脾方对于H22肝癌腹水小鼠模型的体重无明显有影响,对于小鼠的生存期存在剂量依赖性。

新型八核铜配合物乳剂对小鼠H_(22)腹水瘤的抑制作用

目的探讨新型八核铜配合物乳剂(Nanoporous Octanuclear Cu(Ⅱ),N-Cu)对接种H22腹水瘤小鼠的治疗作用。方法昆明种小鼠90只,腹腔内接种H22腹水瘤细胞株造模,随机分为6组,即生理盐水组、空白乳剂组、顺铂组(DDP 1.0 mg/kg)、低剂量N-Cu组(0.2 mg/mL)、中剂量N-Cu组(0.4 mg/mL)和高剂量N-Cu组(0.8 mg/mL)。H22腹水瘤模型建立24 h后,尾静脉注射0.2 mL/10 g治疗,1次/d,连续给药7 d,观察小鼠的生活状态。称动物体重、腹围及每组采食量,第7天给药后24 h,每组处死5只小鼠,抽取全部腹水,测量腹水体积。取心、肝、脾、肺、肾,肉眼观察,并做病理切片。剩余小鼠观察生存时间,并计算生命延长率。结果与生理盐水组相比,顺铂、不同剂量的N-Cu可显著抑制小鼠H22腹水的生成;各试验用药组较生理盐水组小鼠寿命延长,其中高剂量N-Cu组延长最明显(P<0.05);病理切片结果观察得知:N-Cu各剂量组能显著改善肝环境。结论 N-Cu能抑制小鼠H22腹水的生成,明显延长生存期。

化徵丸抗小鼠H22肝癌的效应及对淋巴细胞转化率的影响

目的:研究化丸对H2 2肝癌小鼠的抑瘤作用及免疫功能的影响,探讨中药化丸抑瘤作用的机制。方法:以接种H2 2细胞的昆明种小鼠为模型,随机分组,观察各组小鼠实体瘤病理组织变化,淋巴细胞转化率、存活时间、并测量瘤量、脾重、胸腺重,肿瘤最大直径和横径,计算抑瘤率。结果:化丸各组小鼠瘤重、脾重与盐水对照组相比差异均有显著性意义(P <0 . 0 1) ,随着化丸剂量的增加,小鼠瘤重逐渐降低,脾重随之增加。加高浓度剂量组抑瘤率可达74 .3 7%。化丸对H2 2小鼠淋巴细胞转化率与环磷酰胺组、盐水对照组相比均为P <0 . 0 1,差异有显著性意义。结论:化丸对H2 2肝癌小鼠的实体瘤具有较强抑瘤作用,并能显著提高机体免疫力,延长存活时间。

古草生机汤对H22荷瘤小鼠体内抑瘤及免疫调节作用的初步研究

目的:探究古草生机汤对H22荷瘤小鼠体内实体瘤的抑瘤功效和对机体的免疫调节作用机制。方法:本研究采用H22实体瘤动物模型,随机分为空白组、模型组、阳性药组、古草生机汤低、高剂量组,灌胃给药7 d,计算各组小鼠的体质量增长率、肿瘤抑制率、胸腺及脾指数,小鼠实体瘤病理切片苏木精-伊红(HE)染色观察瘤体组织和细胞形态,酶联免疫吸附试验法检测小鼠血清中γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、Fas、Fas配体、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的含量,实时荧光定量PCR测量小鼠瘤组织中Bax和Bcl-2mRNA的相对表达量。结果:古草生机汤有促进H22荷瘤小鼠体质量增长、抑制体内实体瘤增长和促进肿瘤凋亡坏死的作用,可提高小鼠的胸腺指数同时降低脾脏指数,可显著提高小鼠血清中IFN-γ、TNF-α、IL-2的含量并降低Fas、Fas配体、AST、ALT的含量(均P<0.01),能够上调小鼠瘤组织中Bax mRNA的表达并下调Bcl-2mRNA的表达。结论:古草生机汤具有明显的体内抗肝肿瘤药效,在抑制肿瘤生长、促进肿瘤细胞凋亡、调节机体免疫方面有一定作用。

枸杞多糖对H22荷瘤小鼠脾脏有核细胞CD11c^+、CD80^+表达的影响

目的观察枸杞多糖(LBP)对H22荷瘤小鼠脾脏有核细胞CD11c+、CD80+表达的影响。方法建立H22荷瘤小鼠模型,用LBP连续灌胃治疗两周后,小鼠脱颈处死,分离各组小鼠脾脏有核细胞,流式细胞仪检测CD11c+、CD80+的表达情况。结果肿瘤模型组及荷瘤LBP用药组,CD11c+、CD80+及双阳性细胞比例均较正常对照组升高,其中CD80+及双阳性细胞比例升高,差异具有显著性;双阳性细胞比例升高在荷瘤LBP高剂量组与肿瘤模型组间亦具有显著性差异。正常用药组与正常对照组比较,CD80+表达升高,差异具有显著性。结论LBP可以增强H22荷瘤小鼠脾脏中以DC细胞为主的抗原递呈细胞的功能,提示其抗肿瘤免疫作用机制可能与此有关。

供者淋巴细胞输注治疗小鼠H22肝癌的实验研究

目的:观察供者淋巴细胞输注(DLI)对小鼠H2 2肝癌的治疗作用。方法:荷瘤昆明小鼠分荷瘤对照组(A组)、5- 氟脲嘧啶(5 - FU)化疗组(B组)、DLI组(C组)及5 - FU加DLI组(D组) 4组。比较各组小鼠生存期、抑瘤率及瘤体病理检查结果,检测NK细胞及IL 2的活性。结果:B、C组生存时间长于A组(P <0 .0 1) ,D组长于C组(P <0 .0 1) ;B、C、D各组抑瘤率依次为61.3 %、3 4.7%、89.5 % ;C、D两组NK细胞及IL 2活性明显高于A、B组(P <0 .0 5 ) ;病理观察见C、D组大量炎性细胞浸润。结论:DLI对小鼠H2 2肝癌有治疗作用,是一种潜在可行的实体瘤细胞过继免疫治疗方法。

西松烷型二萜对小鼠H22肝癌腹水瘤的抑制作用及其机制

目的研究西松烷型二萜对小鼠H22肝癌腹水瘤抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法建立昆明小鼠H22肝癌腹水瘤模型,随机分为生理盐水组（Ⅰ组）、西松烷型二萜低剂量组（Ⅱ组）、中剂量组（Ⅲ组）、高剂量组（Ⅳ组）与环磷酰胺组（Ⅴ组）。建模后24 h开始给药,Ⅱ~Ⅳ组以不同剂量的西松烷型二萜连续灌胃给药7 d,对照组给予同体积生理盐水,Ⅴ组连续腹腔注射环磷酰胺7 d,末次给药24 h后处死半数动物。计算平均腹水量、腹水抑制率、腹水中瘤细胞数、瘤细胞存活率、细胞因子白细胞介素2（IL-2）、干扰素γ（IFN-γ）浓度。另一半小鼠继续观察生存状况,计算生存期及生存延长率。结果Ⅲ、Ⅳ组腹水量与Ⅰ组比较明显减少（F=28.37,q=2.91、4.76,P〈0.05）,腹水抑制率随药物剂量增加而升高。Ⅱ~Ⅳ组瘤细胞计数及瘤细胞存活率与Ⅰ组比较显著降低（F=7.21-19.13,q=2.92~4.76,P〈0.05）。Ⅱ~Ⅳ组小鼠平均生存期与Ⅰ组比较显著延长（F=35.77,q=2.91~4.75,P〈0.05）,延长率分别为20.21%、42.10%和51.02%。与Ⅴ组比较,Ⅱ、Ⅲ组小鼠在饮食、活动等方面状态较好。Ⅳ组用药期间食欲下降,活动少,停药后好转。Ⅱ~Ⅳ组IL-2和IFN-γ含量与Ⅰ组比较,差异均有显著性（F=21.17、35.47,q=2.93~4.77,P〈0.05）。结论西松烷型二萜对H22肝癌腹水瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制可能与影响细胞免疫功能有关,其有可能开发成为一种新的海洋源性抗肿瘤药物。

龙葵多糖对H_(22)荷瘤小鼠红细胞膜功能的影响

研究龙葵多糖对H22荷瘤小鼠红细胞膜功能的影响.采用DPH荧光探针标记荧光分光光度计测定红细胞膜的流动性,比色法测定红细胞膜表面膜封闭度、SA、SOD的含量.龙葵多糖各剂量组都能够降低H22荷瘤小鼠红细胞膜的微黏度,提高细胞膜脂流动性,提高红细胞膜重新封闭的能力,升高荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸及超氧化物歧化酶的含量.龙葵多糖可能通过改善和恢复H22荷瘤小鼠红细胞膜功能而达到抗肿瘤的作用.

黄芪注射液对H22荷瘤小鼠抑瘤作用的细胞免疫机制

目的探讨黄芪注射液体内抑瘤作用的细胞免疫机制。方法将昆明小鼠移植H22肝癌细胞后,分为五组:模型组,5-氟尿嘧啶组,黄芪注射液低、中、高剂量组。分别测定各组小鼠肿瘤生长抑制率(IR)和腹腔巨噬细胞的吞噬指数;采用MTT法测定各组小鼠脾淋巴细胞增殖指数。结果 5-氟尿嘧啶组和高、中剂量黄芪注射液实验组小鼠H22实体瘤IR分别为59.45%、50.62%和40.47%,与模型组比较有显著性差异(P<0.05);黄芪注射液实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分数、吞噬指数和脾脏淋巴细胞增值指数都明显高于模型组小鼠(P<0.05)。结论黄芪注射液在荷瘤小鼠体内具有一定的抑瘤作用,其机制可能与其提高荷瘤小鼠的细胞免疫功能有关。

不同单位保存的小鼠肝癌H_(22)细胞特性比较研究

目的 对不同单位保存的小鼠肝癌H2 2 细胞株的细胞特性进行比较研究。方法 从三个单位引进小鼠肝癌H2 2 瘤株 ,KM小鼠腹腔传代 ,然后进行染色体、DNA含量、细胞大小比较分析。结果 中国医学科学院药物研究所(北京H2 2 )、山东省医学科学院药物研究所 (山东H2 2 )和武汉大学典型培养物保藏中心 (武汉H2 2 )三个单位H2 2 瘤株的染色体均数分别为 (30 3± 8 9)条、 (33 0± 8 9)条、 (35 6± 10 1)条 ,方差分析表明不同单位瘤株间差异均有显著性 (P <0 0 1) ;直方图分析显示主流染色体范围分别为 2 7～ 2 9、 30～ 32、 33～ 35。武汉H2 2 瘤株细胞面积、长径、短径与北京H2 2 、山东H2 2 比较差异均有显著性。流式细胞术DNA含量分析表明北京H2 2 DNA含量最少 ,武汉H2 2 DNA含量最多 ,统计学分析表明不同单位瘤株间差异均有显著性 ;DNA指数结果表明武汉H2 2 为非整倍体肿瘤 ,北京H2 2 、山东H2 2 为近二倍体肿瘤。结论 不同单位保种和使用的H2 2 瘤株的细胞特性已存在显著差异。

人参二苓汤及其水提醇沉提取物对H22荷瘤小鼠脾胸腺指数及外周血细胞的影响

目的探讨人参二苓汤及其水提醇沉提取物对H22荷瘤小鼠脾胸腺指数及外周血细胞的影响。方法将60只健康昆明小鼠分为正常组、荷瘤模型组、阳性对照组(CTX组)、水提组(RSEL)、总多糖组(PRSEL)、小分子组(SRSEL),每组10只。建立H22荷瘤小鼠模型,造模成功后分别灌服人参二苓汤水提物、总多糖、小分子,实验结束后计算小鼠脾胸腺指数,抑瘤率及外周血细胞的检测。结果人参二苓汤水提物(RSEL)组和总多糖(PRSEL)组抑瘤率分别为37.80%和50.13%;CTX组为79.62%;CTX组及人参二苓汤水提组和总多糖组平均瘤重分别为(0.7611±0.1502)g、(2.3231±0.5324)g和(1.8642±0.5740)g,与荷瘤模型组平均瘤重(3.7352±0.4851)g比较,差异有统计学意义(P<0.01),小分子组瘤重与荷瘤组比较差异无统计学意义(P>0.05);与水提组比较,总多糖组瘤重差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,人参二苓汤总多糖(PRSEL)组能显著增强荷瘤小鼠脾和胸腺指数(P<0.05或P<0.01),且较人参二苓汤水提物(RSEL)组和小分子(SRSEL)组更为显著;人参二苓汤总多糖(PRSEL)组能改善荷瘤小鼠晚期白细胞的过度增高状态(P<0.01),优于人参二苓汤水提物组(P<0.05)。结论人参二苓汤总多糖(PRSEL)可以明显延缓荷瘤小鼠晚期类白血病样反应的发生,维持血细胞在一个相对稳定的状态,且抑制肿瘤生长作用较明显,可能与其改善荷瘤小鼠免疫器官功能相关。