含硒桥联环糊精诱导体外培养H22小鼠肝癌细胞凋亡的作用

目的:研究含硒桥联环糊精(2-SeCD)对体外培养H22小鼠肝癌细胞凋亡的促进作用,探讨2-SeCD的抗肿瘤活性。方法:体外培养的H22细胞分别加入80、160、320和640μmol.L-12-SeCD作为实验组,并设阴性对照组。倒置相差显微镜观察细胞形态的变化;MTT法检测细胞生长抑制率,计算中效抑制浓度(IC50);流式细胞术(FCM)检测细胞周期和凋亡。结果:320和640μmol.L-12-SeCD组细胞生长抑制率分别为(25.90±2.13)%和(49.40±3.66)%,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),2-SeCD 48 h的IC50为611.29μmol.L-1;320和640μmol.L-12-SeCD组凋亡率分别为5.52%和12.47%,2-SeCD可使细胞阻滞于G0/G1期。结论:2-SeCD可抑制H22细胞增殖并促进其凋亡,2-SeCD对肝癌具有潜在的治疗价值。

猫爪草不同提取物对移植性肝癌H_(22)小鼠的抗肿瘤作用

目的:探讨猫爪草不同提取物对移植性肝癌H_(22)小鼠的抗肿瘤作用。方法:采用系统溶剂法提取分离猫爪草获得石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水5个提取物。建立移植性肝癌H_(22)小鼠模型后,检测各提取物灌胃给药10 d后的抑瘤率、生命延长率、肺脏指数、肝脏指数、脾脏指数和胸腺指数等。结果:石油醚提取物高、中、低剂量组对H_(22)小鼠的肿瘤生长均无明显的抑制作用。氯仿、乙酸乙酯、正丁醇提取物高、中、低剂量组的抑瘤率(%)依次分别为51．78,48．80,33．33;55．51,45．10,31．36;32．71,25．08,24．64;生命延长率(%)分别为10．58,60．09, 58．23;-1．05,56．91,45,09;60．98,59．76,50．84;水提物高、中、低剂量组的生命延长率(%)分别为74．98,74．76, 50．05。水提物可以增加脾脏指数和胸腺指数。结论:猫爪草氯仿、乙酸乙酯和正丁醇提取物具有一定体内抗肿瘤作用,而水提取物具有一定的免疫调节作用。

沙冬青提取物(JA1)对小鼠肝癌H_(22)细胞体外增殖和皮下移植生长的抑制

采用噻唑蓝(MTT)还原法测定梯度浓度的沙冬青提取物(JA1)对体外培养小鼠肝癌细胞株H22增殖的影响;同时对皮下移植肿瘤H22小鼠灌服不同剂量的JA1以检测抑瘤率,进一步采用流式细胞术、光镜和透射电子显微镜技术,检测和观察JA1对小鼠移植性肿瘤H22的诱导凋亡作用。结果显示,JA1可显著抑制体外培养小鼠肝癌H22细胞的增殖,并且这种抑制存在浓度和时间关系。同时,JA1对小鼠皮下移植性肿瘤H22也有明显的抑制作用。流式细胞分析表明,JA1灌胃试验组瘤组织细胞DNA直方图上见有明显的凋亡峰;在光镜和电镜下,JA1灌胃试验组也见有明显的瘤细胞凋亡,表明JA1对体内、外H22细胞的增殖抑制是以诱导凋亡为基础的。

地锦草对移植性肝癌H22小鼠抑瘤率和免疫功能的影响

目的研究地锦草对移植性肝癌H22小鼠抑瘤率和免疫功能的影响。方法将肝癌H22肿瘤细胞接种到小鼠皮下后,用高、中、低3个剂量的地锦草灌胃2 w,观察地锦草对移植性肝癌H22小鼠肿瘤生长的抑制率和脾指数的影响;ELISA法测定血清白介素(IL)-2的变化;采用HE染色,光镜下观察地锦草对肿瘤组织形态学的影响。结果与模型组比较,地锦草组瘤重明显减轻(P<0.05),但无剂量依赖效应;地锦草组小鼠肿瘤抑制率随剂量升高而增加(P<0.05),且高剂量组肿瘤抑制率达59.63%;地锦草组脾指数升高,但无显著差异(P>0.05);地锦草组血清IL-2水平升高(P<0.01);地锦草组肿瘤细胞数量明显减少,瘤组织的炎性细胞浸润增多。结论地锦草可抑制移植性肝癌H22小鼠的肿瘤细胞生长,与提高IL-2水平增加免疫力有关。

SPRIDA对小鼠H_(22)肝癌相关基因表达谱的影响

目的研究SPRIDA(施普睿达)对荷H22肝癌小鼠基因表达的调节差异,探讨SPRIDA治疗小鼠肝癌的可能机制。方法运用基因表达谱芯片技术检测SPRIDA对荷瘤小鼠的基因表达调节,并对差异基因进行Pathway聚类和统计分析。结果SPRIDA作用前后表达有差异的基因共358条(占芯片基因总数的8.74%),其中172条(172/4096,4.20%)基因表达上调,186条(186/4096,4.54%)基因表达下调。经Pathway聚类分析,表达差异基因主要属于细胞凋亡、细胞周期、NK细胞介导的细胞毒、细胞黏附分子、肿瘤生长因子β、Wnt等信号通路。结论SPRIDA主要是通过影响肿瘤细胞周期进程、调节肿瘤细胞凋亡和黏附相关基因的表达等多种途径抑制肿瘤的增殖和转移。

澳洲茄胺盐酸盐对小鼠肝癌H22抑制作用研究

目的研究观察澳洲茄胺盐酸盐对移植性实体型肿瘤小鼠肝癌H22的瘤重抑制率.方法本项研究采用肿瘤细胞悬液接种法制备小鼠移植性实体型肿瘤H22动物模型.腹腔注射给药,连续10 d.给药结束后,解剖小鼠,取瘤称质量,进行统计学处理及分析,观察药物作用,连续3次重复实验.结果经过研究发现：澳洲茄胺盐酸盐对移植性实体型小鼠肝癌H22抑制实验3次重复实验证实,在药物倍数剂量设置下,44 mg/kg剂量组与盐水对照组比较,有显著性差异;44 mg/kg剂量组瘤质量抑制率在55.1%～73.7%之间,平均抑瘤率为62.3%,P〈0.01.结论通过连续3次重复实验,澳洲茄胺盐酸盐对小鼠移植性实体型肿瘤肝癌H22有明显的抑制作用.

应用RAPD技术检测小鼠肝癌H22细胞克隆株的遗传学改变

目的：用RAPD技术检测小鼠肝癌H22细胞克隆株的遗传变异。方法：小鼠肝癌H22细胞的4个克隆株H22-H8D8、H22-H2G4、H22-H2E10、H22-H2C4，用47条随机引物经PCR扩增，对扩增产物进行电泳，凝胶分析系统观察结果并照相。结果：47条引物均能扩增出明显的条带，条带数多为4-10条，片段大小在200-2000bp之间。其中4条引物的扩增条带具有多态性，表现为带的有无、移动和强弱差异。结论：RAPD技术可以用来对小鼠肝癌H22细胞克隆株进行遗传检测。

小鼠肝癌H22细胞克隆株的RAPD分析

目的应用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术检测小鼠肝癌H22细胞克隆株的遗传变异。方法用47条引物对小鼠肝癌H22细胞的4个克隆株H22-H8D8,H22-H2G4,H22-H2E10,H22-H2C4基因组DNA进行RAPD分析。结果47条引物均能扩增出明显的条带,条带数多为4~10条,片段大小在200~2000 bp之间。其中4条引物的扩增条带具有多态性,表现为带的有无、移动和强弱差异。结论RAPD技术可以用来检测小鼠肝癌H22细胞克隆株基因组之间的差异。

山慈菇多糖对H22肝癌小鼠IL-2及p53蛋白表达的影响

研究山慈菇多糖对H22的体内抑制作用及其机制。建立小鼠H22腹水瘤和实体瘤模型观察山慈菇多糖的抑瘤作用,Elisa检测实体瘤小鼠外周血IL-2水平,HE染色法观察小鼠肿瘤组织的细胞形态,SABC免疫组化法检测p53蛋白表达情况。能改善腹水瘤小鼠的生存状态和延长生存天数,延长率为21.4%。实体瘤小鼠低、中、高剂量组抑瘤率分别为21.58%、32.76%、40.05%,IL-2的中高剂量组相对模型组都具有极显著性(P<0.01),增强了p53蛋白的表达水平。山慈菇多糖延长了腹水瘤小鼠生存时间,解剖观察可能是减少小鼠体内炎症反应;实体瘤小鼠此次试验中呈现了一定的剂量依赖性,其机制可能与提高小鼠IL-2含量从而提高小鼠免疫力有关,p53随着肿瘤细胞分化程度下降而表达增加。

低强度超声对小鼠肝癌H_(22)细胞抑制效应的初步研究

目的:观察低强度超声对小鼠肝癌H22细胞体外生长的影响。方法:以低强度超声辐照小鼠肝癌H22细胞,采用倒置显微镜观察和MTT法检测观察超声对小鼠肝癌H22细胞的抑制作用。结果:低强度超声波能够显著抑制小鼠肝癌H22细胞的增殖,并且跟辐照时间呈剂量依赖关系。辐照后24h其MTT光吸收值随着超声作用时间的延长而显著降低。结论:低频超声辐照对小鼠肝癌H22细胞体外生长具有明显的抑制作用。

MBP在小鼠肝癌H22荷瘤模型中的抗肿瘤作用

目的：探讨大肠杆菌麦芽糖结合蛋白（MBP）在小鼠肝癌H22荷瘤模型中的抗肿瘤作用及可能机制。方法：将12只6～8周龄的BALB/c小鼠皮下注射2×10^6个H22细胞,建立荷瘤模型,荷瘤后第2天将小鼠分为PBS组和MBP组,每组6只,并通过皮下瘤旁注射给药的方式进行干预,期间监测肿瘤体积和小鼠体重变化,测量肿瘤和各脏器质量,ELISA法检测脾细胞分泌IL-12和IFN-γ的水平,Real-time PCR检测肿瘤组织中IFN-γ和IL-17A mRNA的相对表达量。结果：MBP能抑制肿瘤的生长（P〈0.05）。与PBS组相比,MBP组小鼠脾细胞中IL-12、IFN-γ分泌量上升,肿瘤组织中IFN-γmRNA的表达量上升,IL-17A mRNA的表达量下降（P〈0.05）。结论：MBP能够有效抑制肝癌H22肿瘤生长,其作用可能是通过激活Th1型免疫反应和抑制Th17型免疫反应。

胸腺素原体内抑制小鼠肝癌细胞H22的研究

根据Parkin等报道,2000年全球新发癌症病例为1 010万例,死亡620万。在Ferlay等报道中最常见的癌症中致死率排列第三是肝癌。在我国肝癌的死亡率占全部恶性肿瘤死亡的18.8%,仅次于胃癌。因此，寻找和筛选有效的抗肝癌药物是目前医学界研究的热点。

化积益肝煎对小鼠肝癌H22细胞β-catenin和cyclin D1表达的影响

目的:观察化积益肝煎对小鼠肝癌H22细胞抑制作用,并探讨其对肝癌WNT信号传导通路上β-catenin和cyclin D1表达的影响。方法:将接种肝癌H22细胞的小鼠随机分为对照组、化积益肝煎(中药组)、环磷酰胺(西药组)、化积益肝煎+环磷酰胺(中西药组),连续给药15d后处死,剥离瘤组织称重;用免疫组化方法检测β-catenin和cyclin D1表达。结果:中药、西药、中西药合用可明显抑制小鼠肝癌的生长,抑瘤率分别为38.35%、55.48%、70.93%,具有统计学差异(P<0.05);中西药组抑瘤率(70.93%)高于西药组抑瘤率(55.48%),具有统计学差异(P<0.05);各用药组β-catenin和cyclin D1表达与对照组相比下降(P<0.05)。结论:化积益肝煎对小鼠肝癌有抑制作用,并对化疗药物有一定的协同增效作用;化积益肝煎可通过影响小鼠肝癌细胞WNT传导通路信号的传导,从而抑制小鼠肝癌细胞的增殖。

人参皂甙Rh_2注射液对荷肝癌(H_(22))小鼠免疫功能的影响

本研究以荷肝癌 (H2 2 )小鼠为实验模型 ,观察人参皂甙Rh2 注射液对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素、NK细胞毒活性和IL - 2免疫指标的影响。结果表明 :人参皂甙Rh2 注射液能提高荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、增加血清溶血素抗体生成能力、促进小鼠脾NK细胞杀伤活性和IL - 2活性。人参皂甙Rh2注射液明显提高荷瘤小鼠免疫功能。

半枝莲多糖SBP-2A对小鼠肝癌H22细胞增殖的抑制作用

目的探讨半枝莲多糖SBP-2A对小鼠肝癌H22细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养小鼠肝癌H22细胞分为阴性对照组(不加任何药物)、阳性对照组(黄芪多糖200μg/mL)、低剂量治疗组(半枝莲多糖SBP-2A 50μg/mL)、中剂量治疗组(半枝莲多糖SBP-2A 100μg/mL)、高剂量治疗组(半枝莲多糖SBP-2A 200μg/mL)。MTT比色法检测各组细胞增殖的抑制活性。HE染色观察各组细胞形态学变化。流式细胞术Annexin V/PI双染法检测各组细胞凋亡水平。蛋白质印迹法(Western blot,WB)检测各组细胞B细胞淋巴瘤2基因(B cell lymphoma 2 gene,Bcl-2)、BCL2关联X蛋白(BCL2-associated X protein,Bax)的蛋白表达水平。结果低、中、高剂量治疗组细胞增殖抑制率明显增加。低、中、高剂量治疗组均较阴性对照组出现一定程度的凋亡形态特征,且高剂量治疗组最为明显。高剂量治疗组细胞凋亡率显著高于阴性对照组及低、中剂量治疗组(P<0.05)。低、中、高剂量治疗组Bax蛋白表达水平均显著高于阴性对照组(P<0.05);中、高剂量治疗组Bcl-2蛋白表达水平均显著低于阴性对照组(P<0.05)。结论半枝莲多糖SBP-2A可显著抑制小鼠肝癌H22细胞增殖,其作用机制可能与调控Bax、Bcl-2蛋白表达水平从而促进细胞凋亡有关。

重组纤粘连蛋白多肽CH50对小鼠H22肝癌移植瘤的治疗作用

目的探讨尾静脉转染CH50多肽真核表达载体pCH510对肿瘤的治疗作用及其可能的分子机制。方法尾静脉注射CH50多肽真核表达载体pCH510，RT-PCR检测该质粒在BALB／c小鼠肌肉和肝脏中的表达，以H22肝癌细胞接种于小鼠右后腿肌肉内，建立小鼠肝癌移植瘤模型，将小鼠分成3组，经尾静脉分别注射pCH510（C组）、pcDNA3．1（P组）和生理盐水（S组），肿瘤接种后第2天开始，每隔2天对小鼠进行治疗。HE染色观察治疗后肿瘤生长、侵袭和血管形成的改变。RT-PCR比较经CH50多肽处理的肿瘤细胞中口αv、β83和cdc2的mRNA表达。结果小鼠肌肉和肝脏内均可检测到CH50多肽的表达，持续表达48-72h。治疗后C组的小鼠移植肿瘤湿重为（0．80±0．18）g，小于P组的（1．75±0．23）g，也小于S组的（2．02±0．38）g，均有显著性差异（P〈0．05），P、S组间无显著性差异。CH50多肽治疗可抑制肿瘤细胞侵袭生长和肿瘤血管生成。CH50多肽可下调H22细胞的αv、β3、cdc2基因的表达水平。结论非定向转染表达CH50多肽有较好的肿瘤治疗作用，这可能与CH50多肽干扰了αvβ3的功能有关。

杜梨果实热水提取物对H_(22)小鼠的抗肿瘤作用

目的探讨杜梨果实热水提取物对H22小鼠的抗肿瘤作用。方法以H22(肝癌实体型)移植小鼠为模型研究杜梨果实热水提取物体内抗肿瘤作用,以及对脾脏、胸腺指数的影响。结果杜梨果实热水提取物对H22有显著的抑制作用,使荷瘤小鼠的脾脏、胸腺指数明显升高。结论杜梨果实热水提取物具有一定的抗肿瘤活性。

熊果酸对H22荷瘤小鼠抗肿瘤及免疫调节作用

目的探讨熊果酸(UA)对H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用及免疫功能的影响。方法皮下移植建立H22荷瘤小鼠模型,腹腔注射不同剂量UA,检测抑瘤率和免疫器官指数,MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,流式细胞术检测CD4+、CD8+T细胞亚群含量及比例,ELISA法检测血清细胞因子IL-2、IL-4和TNF-α的表达量。结果 UA对小鼠皮下移植性肿瘤H22有显著的抑制作用,可降低免疫器官中异常增大的脾指数,增强脾脏中T、B淋巴细胞增殖能力,提高淋巴细胞亚群CD4+T细胞表达及CD4+/CD8+T细胞亚群比例,促进血清IL-2、TNF-α表达,降低IL-4表达。结论 UA可抑制小鼠肝癌H22肿瘤生长,体内可以提高荷瘤小鼠的免疫能力,其抗肿瘤作用可能与机体的免疫调节作用相关。

益生菌Lb. casei Zhang对H22荷瘤小鼠化疗的减毒增效作用

目的:研究益生菌Lb.casei Zhang对荷H22肿瘤小鼠化疗的减毒增效作用。方法:以荷H22肝癌化疗小鼠为模型,以腹腔注射环磷酰胺(CTX)联用Lb.casei Zhang活菌制剂高、中、低三个剂量灌服小鼠12d后,计算脾指数和肿瘤生长抑制率,采用碘化丙啶(PI)染色利用流式细胞仪检测肿瘤细胞细胞周期和凋亡率。结果:益生菌Lb.casei Zhang对荷瘤鼠化疗所引起的免疫功能低下具有明显的恢复作用,Lb.casei Zhang具有协同增强CTX将肿瘤细胞周期阻滞于S期,抑制肿瘤细胞的增殖。结论:益生菌Lb.casei Zhang能够拮抗化疗所引起的免疫抑制,可以改善化疗荷瘤小鼠一般状况,提高其生存质量,协同增强化疗药物的抗肿瘤作用,具有明显的化疗减毒增效作用。