罗汉松实多糖对小鼠肝癌H22细胞移植瘤生长的影响及其机制

目的 观察罗汉松实多糖(PSP)对小鼠肝癌H22细胞移植瘤生长的影响,并探讨其可能机制。方法 取昆明小鼠54只,均在右腋皮下接种H22细胞建立移植瘤模型,造模成功后,将小鼠随机分为PSP高、中、低剂量组(PSP-H组、PSP-M组、PSP-L组)及环磷酰胺(CTX)组、香菇多糖(LNT)组、模型组(每组各9只),另取9只正常昆明小鼠作为对照组。PSP-H组、PSP-M组、PSP-L组分别给予480、240、120 mg/kg的PSP,CTX组给予20 mg/kg的CTX,LNT组给予100 mg/kg的LNT,对照组、模型组均给予10 mL/kg的生理盐水,各组均灌胃给药,1次/天,连续给药14 d。末次给药16 h后,摘眼球取血,处死小鼠,取肿瘤、胸腺和脾脏,称重,计算肿瘤抑制率及胸腺和脾脏脏器指数;HE染色法观察肿瘤组织病理变化;MTT法检测脾组织T、B淋巴细胞增殖能力;ELISA法检测眼球血清IL-2、IL-6、TNF-α、INF-γ。结果 与模型组比较,PSP-L组、PSP-M组、PSP-H组、CTX组、LNT组肿瘤质量降低(P均<0.05);与LNT组比较,PSP-M组、PSP-H组肿瘤质量降低(P均<0.05)。与LNT组比较,PSP-H组肿瘤抑制率升高(P<0.05)。与对照组比较,PSP-H组脾脏指数及PSP-L组、PSP-M组、PSP-H组、LNT组、模型组胸腺指数升高,CTX组、模型组脾脏指数低降低(P均<0.05);与模型组比较,PSP-L组、PSP-M组、PSP-H组、LNT组脾脏指数及胸腺指数升高,CTX组脾脏指数降低(P均<0.05);与LNT组比较,CTX组胸腺指数降低(P<0.05);与CTX组比较,PSP-L组、PSP-M组、PSPH组、LNT组脾脏指数和胸腺指数升高(P均<0.05)。模型组肿瘤细胞生长状态良好,清晰可见,数量多,排列紧密,细胞核深染,坏死细胞较少;CTX组肿瘤细胞数量减少,排列松散,出现不同程度的坏死区域;LNT组和PSP各组肿瘤组织疏松,肿瘤细胞减少,细胞不同程度坏死,其中PSP-H组细胞坏死更明显。与对照组比较,其余各组(除CTX组外)T、B淋巴细胞增殖能力增强(P均<0.05);与模型组比较,PSP-H组、LNT组T淋巴细胞增殖能力和PSP-M组、PSP-H组、LNT组B淋巴细胞增殖能力增强,CTX组T、B淋巴细胞增殖能力减弱(P均<0.05);与CTX组比较,PSP-L组、PSP-M组、PSP-H组T和B淋巴细胞增殖能力增强(P均<0.05)。与对照组比较,模型组血清IL-6水平升高,血清IL-2、TNF-α、INF-γ水平降低(P均<0.05);与模型组比较,PSP-L组、PSP-M组、PSP-H组、LNT组血清IL-2、TNF-α、INF-γ水平和CTX组血清IL-2水平升高,CTX组血清TNF-α水平降低(P均<0.05);与LNT组比较,PSP-H组血清IL-2水平升高(P均<0.05);与CTX组比较,PSP-L组及PSP-M组血清TNF-α、INF-γ水平和PSP-H组血清IL-2、TNF-α、INF-γ水平升高(P均<0.05)。结论 PSP对小鼠肝癌H22细胞移植瘤生长有抑制作用,高剂量作用尤为明显,其机制可能是提高机体T、B淋巴细胞的增殖能力,升高血清IL-2、TNF-α、INF-γ水平,改善机体免疫功能。

肝癌复方对小鼠肝癌细胞移植瘤的抑制作用初探

目的探讨肝癌复方及其组方单味药材对小鼠肝癌细胞移植瘤的抑制作用。方法建立小鼠肝癌H22细胞移植瘤模型,造模小鼠随机分组后干预给药,考察给药周期中小鼠体质量的变化并测量移植瘤质量,计算药物抑瘤率。结果肝癌复方组小鼠体质量变化最接近空白对照组,且肝癌复方的抑瘤效果最好,抑瘤率为53.85%,优于本实验所选择的两个阳性对照药环磷酰胺和斑蝥的抑瘤率(分别为48.46%和17.69%)。结论肝癌复方对小鼠肝癌移植瘤具有较好的抑制作用,且副作用较小。本研究可为肝癌复方临床治疗应用提供实验依据。

大豆异黄酮诱导小鼠肝癌移植瘤细胞凋亡的机制

目的:探讨大豆异黄酮对小鼠肝癌移植瘤细胞凋亡的诱导机制。方法:建立小鼠H22肝癌皮下移植瘤模型,分为模型组、大豆异黄酮组和5-氟尿嘧啶组。采用DNA ladder法检测移植瘤细胞凋亡情况,蛋白印迹法检测移植瘤组织含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)-3、Caspase-8、Caspase-9、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、细胞色素c(cytochrome c,Cyt c)、细胞凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)、p53、Survivin和信号传导子及转录激活子(signal transducer and activator of transcription,STAT)3表达情况。结果:与模型组比较,大豆异黄酮组移植瘤质量减轻;肿瘤细胞凋亡特征性DNA片段增多;移植瘤细胞Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的活性片段增多;Bcl-2蛋白相对表达量降低,Bax蛋白相对表达量升高;胞浆Cyt c和AIF水平升高。同时,大豆异黄酮上调移植瘤组织p53蛋白表达,下调STAT3活化和Survivin蛋白表达。结论:大豆异黄酮诱导H22移植瘤细胞凋亡,其促凋亡机制可能与p53和STAT3有关。

蝎毒多肽提取物联合雷帕霉素增强H_(22)肝癌细胞自噬作用的机制研究

目的观察蝎毒多肽提取物(polypeptide extract from scorpion venom,PESV)联合雷帕霉素(Rapamycin)对H22肝癌肿瘤细胞自噬的增强作用并探讨其作用机制。方法 40只昆明小鼠,采用皮下接种H22肝癌肿瘤细胞悬液法建立荷瘤模型,随机分为荷瘤对照组、PESV高剂量组、PESV低剂量组及联合组(PESV高剂量加雷帕霉素),每组10只。PESV高、低剂量组分别予20 mg/kg、10 mg/kg的PESV灌胃,联合组予雷帕霉素(2 mg/kg)及PESV(20 mg/kg)灌胃,连续给药干预14天,隔日测量肿瘤体积,记录肿瘤生长曲线,计算抑瘤率。HE染色观察各组肿瘤组织病理变化。免疫组织化学法检测各组肿瘤组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammal target of rapamycin,m TOR)、UNC51样激酶1(UNC-51-like kinase-1,ULK1)、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,MAP1LC3A)及B淋巴细胞瘤蛋白质-2-相互作用蛋白质-1(Beclin1)蛋白表达水平。结果与荷瘤对照组比较,PESV高、低剂量组及联合组肿瘤生长受到明显抑制(P<0.05);与PESV高、低剂量组比较,联合组瘤重及体积明显减小(P<0.05),PESV高、低剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学法显示,与荷瘤对照组比较,PESV高、低剂量组及联合组m TOR表达水平降低(P<0.05),ULK1、MAP1LC3A及Beclin1蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01)。与PESV高剂量组比较,联合组ULK1、MAP1LC3A及Beclin1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论蝎毒多肽提取物联合化疗可能是通过抑制m TOR的活性,增强自噬相关蛋白ULK1、MAP1LC3A及Beclin1的表达,促进细胞自噬从而抑制肿瘤的发展。