肝细胞癌组织H2AFY表达变化及其临床意义

目的探讨肝细胞癌(HCC)组织H2A组蛋白家族成员Y(H2AFY)表达变化及其临床意义。方法选择HCC患者142例,取手术切除的HCC组织及其癌旁正常组织,采用免疫组化法检测H2AFY表达。比较HCC组织与癌旁正常组织H2AFY表达,分析H2AFY表达与HCC患者临床病理特征的关系。术后随访3年,比较不同H2AFY表达者3年累积生存率。结果HCC组织H2AFY高表达84例、低表达58例,癌旁正常组织H2AFY高表达12例、低表达130例。HCC组织H2AFY高表达率显著高于癌旁正常组织(χ^(2)=81.574,P<0.01)。H2AFY表达与年龄、肿瘤最大径、微血管浸润、TNM分期有关(P均<0.05),而与性别、合并肝硬化、HBsAg阳性、肿瘤数目及血清白蛋白、AFP水平无关(P均>0.05)。术后随访3年,H2AFY高表达者与低表达者分别死亡26、9例。H2AFY高表达者与低表达者术后3年累积生存率分别为69.0%、84.5%,H2AFY高表达者术后3年累积生存率显著低于H2AFY低表达者(χ^(2)=4.635,P<0.05)。结论HCC组织H2AFY高表达,其高表达可能参与肿瘤的发生、发展,并与患者预后不良密切相关。

血清miR-24-3p、H2AFX与肝癌患者临床病理特征及术后复发的关系研究

目的探讨血清微RNA(miR)-24-3p、H2A组蛋白家族成员X(H2AFX)与肝癌患者临床病理特征及术后复发的关系。方法选取2018年3月至2022年3月南通大学附属肿瘤医院收治的108例肝癌初诊患者为研究对象(肝癌组), 另选取同期于本院就诊的86例肝脏良性病变患者作为良性病变组, 行体检的64例健康者为对照组。采用荧光定量PCR法检测并分析各组受试者血清miR-24-3p、H2AFX水平, 对复发和未复发肝癌患者血清miR-24-3p、H2AFX水平进行比较, 对不同血清miR-24-3p、H2AFX水平肝癌患者临床病理特征进行比较, logistic回归分析肝癌患者术后复发的影响因素。结果至随访结束, 108例肝癌患者46例复发。对照组、良性病变组、肝癌组血清miR-24-3p水平分别为1.01±0.23、0.79±0.21、0.55±0.13, 差异有统计学意义(F=125.86, P<0.001), 良性病变组、肝癌组患者血清miR-24-3p水平均低于对照组(均P<0.05), 肝癌组患者血清miR-24-3p水平低于良性病变组(P<0.05);3组血清H2AFX水平分别为1.02±0.25、1.27±0.31、1.59±0.37, 差异有统计学意义(F=65.40, P<0.001), 良性病变组、肝癌组患者血清H2AFX水平均高于对照组(均P<0.05), 肝癌组患者血清H2AFX水平高于良性病变组(P<0.05)。miR-24-3p、H2AFX高水平与低水平肝癌患者TNM分期(χ^(2)=7.85, P=0.005;χ^(2)=6.32, P=0.012)、分化程度(χ^(2)=11.59, P=0.001;χ^(2)=9.92, P=0.002)差异均有统计学意义。与未复发肝癌患者相比, 复发患者血清miR-24-3p水平明显降低(0.44±0.12比0.64±0.14), H2AFX水平明显升高(1.87±0.42比1.38±0.33), 差异均有统计学意义(t=7.79, P<0.001;t=6.79, P<0.001)。单因素分析显示, TNM分期(OR=1.57, 95%CI为1.05~2.35, P=0.029)、分化程度(OR=2.20, 95%CI为1.20~4.02, P=0.011)、miR-24-3p水平(OR=0.66, 95%CI为0.45~0.95, P=0.026)、H2AFX水平(OR=1.73, 95%CI为1.14~2.60, P=0.009)均是肝癌患者术后复发的影响因素;多因素分析显示, TNM分期(OR=2.10, 95%CI为1.14~3.86, P=0.017)、分化程度(OR=1.58, 95%CI为1.12~2.23, P=0.009)、miR-24-3p水平(OR=0.76, 95%CI为0.63~0.92, P=0.005)、H2AFX水平(OR=1.90, 95%CI为1.20~2.99, P=0.006)均是肝癌患者术后复发的独立影响因素。结论不同血清miR-24-3p、H2AFX水平的肝癌患者肿瘤TNM分期、分化程度差异均有统计学意义, 血清miR-24-3p、H2AFX水平是肝癌患者术后复发的影响因素。

CLIC4-RNAi对H_2O_2诱导的U251损伤细胞中线粒体膜电势的影响

作为细胞内氯通道家族成员之一的细胞内氯通道4（CLIC4）也称之线粒体细胞内氯通道（mtCLIC）,是细胞内氯通道家族中唯一在线粒体上表达的氯通道,最近大量研究表明CLIC4也参与了细胞凋亡过程。本实验通过过氧化氢（H2O2）复制神经胶质瘤（U251）细胞损伤模型,检测线粒体膜电势的改变,探讨CLIC4-RNAi对H2O2诱导的U251损伤细胞的线粒体膜电势的影响及其相关机制。

基于生物信息学数据库的肺腺癌组织中HMGB1表达及相关下游通路分析

目的:通过生物信息技术探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)促进肺癌进展的潜在关键通路和环节。方法:UALCAN数据库分析HMGB1表达相关的基因和相关基因的生存分析。STRING数据库分析蛋白质-蛋白质相互作用。AnimalTFDB3.0和JASPAR数据库预测转录因子以及结合位点。KEGG数据库分析相关信号通路。结果:生物信息分析结果显示细胞周期蛋白依赖激酶1(CDK1)、H2A组蛋白家族成员Z(H2AFZ)与HMGB1的表达在肺腺癌(LUAD)中呈正相关关系,且CDK1和H2AFZ与LUAD的不良预后有关。预测到SOX2和SP1是CDK1或H2AFZ的转录因子。信号通路分析结果显示Akt和ERK可以调控SOX2的表达。结论:CDK1、H2AFZ可能是HMGB1参与LUAD进展的重要节点,HMGB1-Akt/ERK-SOX2-CDK1/H2AFZ可能是HMGB1促进LUAD进展的关键通路。

JMJD6通过正向调控H2A.XY39ph促进三阴性乳腺癌发生发展

JMJD6(Jmjc domain-containing 6)具有组蛋白精氨酸去甲基化酶和赖氨酸羟基化酶活性,在包括乳腺癌在内的多种肿瘤中高表达,并与肿瘤发生发展密切相关。但是,JMJD6在乳腺癌的三阴性亚型中的表达状况以及在三阴性乳腺癌发生发展过程中的作用尚不十分明确。本研究经三阴性乳腺癌患者样本的免疫组织化学分析发现,JMJD6在三阴性乳腺癌组织中的表达水平高于配伍癌周组织,而且与H2A.XY39ph水平呈正相关。在三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中,经瞬时转染JMJD6过表达质粒或小干扰RNA分子,通过Western blot检测证实了JMJD6能够正向调控H2A.XY39ph修饰水平。本研究进一步通过CCK-8和Transwell实验证实JMJD6高表达能够促进MDA-MB-231细胞增殖、迁移能力,并呈现时间依赖性和计量依赖性。随后又通过小鼠成瘤实验证实JMJD6能促进裸鼠体内三阴性乳腺癌的发生发展。但是,H2A.XY39位点去磷酸化能够减弱JMJD6的上述功能。综上,本研究结果提示,JMJD6通过促进H2A.XY39位点磷酸化正向调控三阴性乳腺癌发生发展,为乳腺癌机制研究提供了新思路。

口腔白斑癌变DNA损伤修复相关基因的芯片检测及表达验证

目的·研究口腔白斑(oral leukoplakia,OL)患者病损发生发展中的DNA损伤修复基因表达谱,并验证关键基因共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia-telangiectasia mutated,ATM)和组蛋白2A变异体家族成员X(histone variant H2A family member X,H2AX)的mRNA和蛋白表达。方法·利用Affymetrix HTA 2.0芯片对口腔正常黏膜(n=3)、低危白斑(n=4)、高危白斑(n=4)、早期鳞状细胞癌(鳞癌,n=6)进行转录组学的高通量检测,利用基因本体数据库(Gene Ontology,GO)富集分析筛选出生物学功能为DNA损伤修复的相关基因[差异倍数(fold change,FC)对数的绝对值(|log_(2)FC|)≥2.0且P<0.05],利用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)和蛋白质印迹法分别对人正常口腔黏膜角化细胞(HOK)、白斑细胞系(Leuk1)和鳞癌细胞系(HN13)中的关键基因ATM和H2AX进行mRNA和蛋白表达验证。结果·DNA损伤修复基因在白斑发生发展中存在异常表达,从正常黏膜发展到低危白斑有7个|log_(2)FC|≥2.0的基因,从低危白斑发展到高危白斑有7个|log_(2)FC|≥2.0的基因,从高危白斑发展到鳞癌有52个|log_(2)FC|≥2.0的基因。qPCR对关键基因验证结果显示,ATM和H2AX基因在HOK细胞、Leuk1细胞和HN13细胞中的表达量均呈阶梯式升高(P<0.05)。蛋白质印迹法结果显示,磷酸化H2AX(γ-H2AX)蛋白在HOK细胞、Leuk1细胞和HN13细胞中亦逐步上调(P<0.05)。ATM蛋白在Leuk1细胞中的表达比在HOK细胞中表达明显增强(P<0.05),但在HN13细胞中的表达明显降低(P<0.05)。结论·DNA损伤修复基因ATM和H2AX参与OL的发生发展。

去甲基化酶UTX的作用机制

组蛋白H3第27位赖氨酸的2和3甲基化(di-and tri-methylated histone 3 lysine 27,H3K27me2/3)是抑制性组蛋白标记,在发育、增殖分化调控中起关键作用。赖氨酸特异性去甲基化酶6A(lysine-specific demethylase 6A,KDM6A),也称UTX(the ubiquitously transcribed tetratricopeptide repeat on chromosome X),是特异性催化H3K27me2/3去甲基化的酶,参与了转录激活、调控基因表达的过程。研究发现,除了参与H3K27me2/3去甲基化过程外,UTX还参与形成了COMPASS复合体、SWI/SNF复合体以及与转录因子相互作用等生物学过程,具有多种复杂的酶促和非酶促功能。基因敲除实验证明,UTX是干细胞诱导及胚胎发育调控所必需的,而UTX在疾病中的作用及机制也日益受到重视。由于UTX参与了增殖分化调控,较多的研究关注UTX在肿瘤中的作用。在不同的肿瘤类型中,UTX可能起到致癌或抑癌的双重作用,但其内在分子机制仍需进一步探讨。心血管疾病中,UTX参与心肌再生激活,可能起到保护作用;然而UTX又通过激活病理性基因表达,促进肾脏疾病的发生发展等。鉴于UTX在发育及相关疾病中的重要作用,其靶点药物研发也成为了研究热点。因此,本文就UTX的作用机制最新研究进展作一综述。