中枢组织胺H3受体在睡眠-觉醒调节中的功用及作为治疗睡眠障碍药物干预靶点的依据

中枢组织胺(组胺)神经元位于下丘脑后部并广泛投射到全脑各部,在维持上行觉醒方面发挥重要作用。组胺H3受体调节组胺合成、释放及组胺神经元的活动,还参与调节脑内其它神经递质释放。凭借广泛区域表达和对多种神经递质的调节,H3受体近年备受重视并成为睡眠调节和对抗睡眠-觉醒障碍的有力药物干预靶点。随着对H3受体研究的深入及其在临床领域的应用,有必要对H3受体在睡眠觉醒调节中的作用作一综述,这对进一步探索H3受体的生理功能和临床药理学研究具有重要意义。

H3受体拮抗剂的筛选及评价

目的建立H3组胺受体拮抗剂体外筛选模型,对定向结构改造的目标化合物进行筛选,发现和寻找活性更强的H3组胺受体拮抗剂.方法通过在人骨肉瘤细胞（U2OS细胞）中共转染组胺H3受体、β-内酰胺酶、β-arrestin,建立能够稳定表达组胺H3受体的U2OS细胞系,利用荧光能量共振转移（FRET）技术检测β-内酰胺酶活性,从而评价化合物与H3的结合.基于该模型对定向合成的化合物进行筛选.结果通过对233个定向合成的化合物进行筛选,发现有24个化合物对H3具有较高的抑制活性.进一步的复筛和评价,发现化合物H0369和H0434抑制H3的IC50分别为0.06和0.09μmol·L^-1,且它们结构新颖,符合类药特征,具有进一步研究的价值.结论本研究建立了稳定表达的H3_blaU2OS细胞模型,初步发现了数个对H3组胺受体具有抑制活性的化合物,为以H3受体为靶点的中枢神经系统功能紊乱相关疾病的药物研发提供了基础.

非咪唑类组胺H3受体拮抗药的研究进展

组胺H3受体是新近发现的一种组胺受体的新亚型。近年来,以组胺H3受体作为靶点,设计和开发出的一些候选的H3受体拮抗药在治疗一些中枢神经系统疾病(如阿尔茨海默病、帕金森病)等方面有一定的应用前景。目前H3受体拮抗药研究的重点已从经典的咪唑类H3受体拮抗药逐步向非咪唑类的H3受体拮抗药转变。

组胺H3受体激活剂高通量筛选细胞模型的研究

目的:建立基于报告基因的组胺H3受体(H3R)激活剂的高通量筛选模型,用此模型对收集到的中草药化合物组分进行筛选,以发现新的组胺H3R激活剂。方法将H3R基因质粒(H3R/pCDNA3.1-hygro)与报告基因质粒(3XCRE-LUC)按3∶1的比例共转染入HEK293细胞,建立了稳定的H3R配体的报告基因筛选细胞株。激活剂与细胞表面H3R结合后,激活相应的信号通路,调节Forskolin刺激后的报告基因的表达,通过测定荧光素酶报告基因表达水平的变化,评估激活剂影响H3受体的生物活性。结果通过对筛选条件,如激活剂孵育时间、Forskolin终浓度、化合物溶剂的选择、溶剂DMSO终浓度等的优化,建立了可靠的筛选方法。该模型的Z因子可达到0.5以上,稳定性可保持20代,完全符合高通量筛选需求。利用该细胞模型对多种中草药萃取物进行了筛选,找到了两种对H3R有活性的中药组分。结论建立的细胞模型可以有效的应用于以组胺H3受体为靶点的高通量药物筛选。

组胺H3受体在精神分裂症阴性症状和认知功能中的研究进展

精神分裂症是一种严重的神经精神障碍,阴性症状和认知功能是精神分裂症的核心症状,其发病机制与各种神经递质系统的失调有关。组胺H3受体及拮抗剂在中枢神经系统中发挥独特且关键的作用,可以作为重要的药物干预靶点。目前,H3受体拮抗剂/反向激动剂对改善精神疾病的阴性症状和认知功能的结论不一致。因此,本文对组胺能H3受体及其拮抗剂在精神分裂症阴性症状和认知功能中的作用作一阐述,并对H3受体及其拮抗剂在精神分裂症阴性症状和认知功能治疗中的潜在用途进行展望。

组胺H3受体降低电激发收缩的小鼠成肌细胞胞浆中钙离子浓度

目的:探讨组胺H3受体(H3R)在小鼠成肌细胞C2C12成肌分化过程及分化后的横纹肌细胞中的表达和可能发挥的作用。方法:诱导C2C12细胞成肌分化,测量H3R和分化晚期标志物肌球蛋白重链mRNA和蛋白的表达;分化过程中加入H3R拮抗剂ciproxifan,测量分化早期标志物desmin、中期标志物myogenin和肌球蛋白重链mRNA的表达。Fluo-4结合剂标记分化后的横纹肌胞内钙离子,测量双极交流电200 m A刺激下,H3R激动剂甲基组胺(RMe HA)对胞浆中钙离子浓度的影响。结果:H3R和肌球蛋白重链在成肌分化过程中表达量逐渐增加。Ciproxifan在成肌分化过程中对3种分化标志物mRNA的表达与对照组相比无差异(P>0.05)。RMe HA在浓度10 nmol/L^100μmol/L刺激细胞5~20 min,可呈钟形降低因交流电引起的肌浆钙离子浓度的升高(P<0.05),其中RMe HA 100 nmol/L在10 min和20 min对电刺激细胞中Ca2+的抑制百分率最高。相同浓度的RMe HA在20 min和10 min时对Ca2+的抑制率比其在5 min时高(P<0.05)。结论:H3R可能在成肌分化过程中的作用不大,而在分化成熟细胞中可以降低电刺激引起的胞浆钙离子浓度的升高。

H3受体在5-羟色胺诱导大鼠瘙痒初级传入通路中作用

目的观察H3受体激动剂(R-α-甲基组胺)和拮抗剂(噻普酰胺)对5-羟色胺(5-HT)诱导大鼠搔抓行为的影响,并探讨H3受体在大鼠瘙痒初级传入通路中的作用。方法29只SD大鼠随机分为4组,分别在颈背部皮内注射生理盐水(生理盐水组)、2%5-HT(5-HT组)、R-α-甲基组胺+5-HT(甲基组胺组)、噻普酰胺+5-HT(噻普酰胺组),摄像并计数注射后1 h内搔抓次数。取大鼠C3-C5及其相应节段的背根神经节(DRG)作H3R免疫组化染色。结果5-HT组大鼠的搔抓次数明显多于生理盐水组(P<0.01),而R-α-甲基组胺或噻普酰胺预处理可分别减少或增加大鼠搔抓次数(P<0.01)。5-HT组大鼠脊髓后角浅层中H3受体表达与生理盐水组相比差异无显著性(P>0.05),而R-α-甲基组胺或噻普酰胺预处理可分别减少或增加H3受体表达(P<0.01-0.05)。各组动物DRG内,H3受体阳性中、小型神经细胞的比值差异无统计学意义(P>0.05)。结论在5-HT诱导大鼠急性瘙痒模型中,脊髓背角胶状质区内H3受体激活可减弱瘙痒,但DRG内中、小型神经细胞上H3受体表达可能不参与瘙痒信号的传导。

组胺H3受体拮抗剂的研究进展

组胺H3受体是G蛋白偶联受体超家族成员之一,调节组胺及其他多种神经递质的合成与释放。以组胺H3受体为靶点设计开发的组胺H3受体拮抗剂对于临床治疗阿尔茨海默病、帕金森病、嗜睡症等中枢社经系统疾病具有一定应用前景。组胺H3受体拮抗剂已成为当今抗组胺药物研究的一个热点领域,并已成功研制出大量高效、高选择性H3受体拮抗剂,部分化合物已进入临床研究。本文对近年来H3受体拮抗剂的研究进展进行综述。

组胺H3受体的研究进展

目前已发现4种组胺受体，即H1、H2、H3、H4受体；这些受体均为G蛋白偶联受体，广泛分布在中枢和周围神经系统，在一些非神经细胞上也有表达，参与机体多种生理功能的调节。早在20世纪80年代初，就有研究发现组胺可抑制大鼠的大脑皮层自身组胺的合成和释放，而应用H1和H2受体激动剂或拮抗剂对该现象无影响，提示新型组胺受体的存在；

吗啡成瘾不同阶段大鼠伏核组胺H3受体水平的研究

目的研究吗啡成瘾不同阶段大鼠伏核中组胺H3受体水平,探讨组胺H3受体与吗啡成瘾的关系。方法将大鼠分成5组:生理盐水组、吗啡组、戒断组、脱毒组和复吸组,用条件性位置偏爱(CPP)法判定动物模型是否成功建立,Western法检测大鼠伏核中组胺H3受体的表达水平。结果戒断组大鼠(戒断48h后)伏核中组胺H3受体的水平较其他组明显增高(P<0.05)。结论急性戒断吗啡促使大鼠伏核中组胺H3受体水平增高,其可能促进大鼠位置偏爱的形成。

组胺H_3受体对心血管系统的调控作用

综述了组胺H3受体的细胞内信号转导途径 。

组胺H_3受体激动剂与拮抗剂

组胺Ｈ_３受体激动剂与拮抗剂罗晓星，谭月华（第四军医大学药理教研室，西安７１００３２）组胺受体药理学研究方面曾经有过两次重大突破：１９３７年Ｂｏｖｅｔ首先发现了经典的＂抗组胺药＂（亦即现在的Ｈ１受体拮抗剂）［１］，１９７２年Ｂｌａｃｋ创制成功Ｈ２受体?..

组胺H_3受体配体研究进展

目的阐述组胺H3受体配体的研究进展。方法结合国内外文献简述组胺H3受体配体及其构效关系的发展,组胺H3受体配体的治疗应用前景以及H3受体配体发展的新方向。结果与结论选择性的H3受体激动剂及拮抗剂具有广泛的生物活性,是目前抗组胺药物研究开发中的一个新的热点领域,随着对H3受体配体研究的深入,极有希望开发出可用于临床的新药。

大鼠孤束核内H_3受体对哮喘发作时脑组织中Fos蛋白表达的影响

目的:探讨大鼠孤束核(NTS)内组胺H3受体对哮喘发作时大脑Fos蛋白表达的影响及其意义。方法:取健康雄性SD大鼠制备哮喘模型并诱发哮喘发作,采用中枢立体定位及微量注射技术,分3组分别在NTS内微量注射无菌生理盐水、H3受体激动剂R--αmethylhistamine(RMHA)以及H3受体拮抗剂thioperamide(Thio)加RMHA,用SABC免疫组织化学方法测定大鼠哮喘急性发作后1 h Fos蛋白在丘脑至延髓平面各核团的分布情况。结果:与哮喘组相比,哮喘大鼠NTS内微量注射1μg RMHA,丘脑室旁核、下丘脑室旁核、室周核、NTS等核团Fos蛋白表达减少,阳性细胞数降低,差异有显著性(P<0.01);而用Thio 5μg预处理则可拮抗RMHA的上述效应。结论:NTS内H3受体可能通过丘脑室旁核、下丘脑室旁核和室周核等脑区相关神经元参与对哮喘的神经调控,从而可能抑制哮喘发作。

组胺H_3受体拮抗剂对缺血缺氧性脑病新生大鼠神经保护作用及其机制研究

目的探讨组胺H3受体拮抗剂硫丙咪胺对缺血缺氧性脑病新生大鼠的保护作用及其机制。方法将生后7天Wistar大鼠分为正常对照组、缺血缺氧脑病(HIE)模型组、治疗组;HIE模型组和治疗组应用左侧颈动脉结扎后缺氧方法制备HIE大鼠,治疗组进一步分为H3治疗组、H3+H1治疗组和H3+H2治疗组。H3治疗组给予5 mg/kg Thio腹腔注射;H2组先给予Dhp 5 mg/kgip,30 min后ip Thio 5 mg/kg;H1组先给予Cim100 mg/kgip,30 min后ip Thio 5 mg/kg;模型组和正常对照组给予生理盐水腹腔注射。并于注射完毕后6 h、24 h和72 h留取脑组织标本,对脑组织含水量、海马区组胺、MDA、SOD的含量进行检测。结果在给药后6 h、24 h和72 h的检测时间内,各组6 h与24 h脑组织含水量、MDA结果比较明显增高(P<0.05),SOD、海马区组胺结果比较明显减少(P<0.05);H3+H2组与模型组比较,脑组织含水量、MDA明显减少(P<0.05),SOD、海马区组胺明显增加(P<0.05);H3+H1组与H3组比较中,脑组织含水量、MDA明显增高(P<0.05),SOD、海马区组胺明显减少(P<0.05)。结论在颈动脉结扎后24 h,神经元损伤达到高峰。组胺H3受体拮抗剂对新生大鼠缺血缺氧性脑病神经元损伤具有保护作用。组胺H3受体拮抗剂对新生大鼠缺血缺氧性脑病神经元损伤的保护作用主要是通过组胺H2受体来实现的。

中枢组胺H_3受体对哮喘豚鼠呼吸运动的影响

目的:探讨中枢组胺H3受体与哮喘发病的关系。方法:动物经侧脑室插管给药后,记录膈肌放电活动(DA)和呼吸频率(RR)。免疫组织化学方法检测下呼吸道内SP样免疫反应物的含量。荧光分光光度法测定脑内组胺含量。结果:①静脉注射卵蛋白(0.1mg/kg)诱发哮喘急性发作后,动物RR加快,DA幅度减小,同时下呼吸道内SP样免疫反应物的数量明显增加(P<0.01),下丘脑和皮质内组胺含量增多(P<0.01)。②哮喘急性发作后,侧脑室注射H3受体激动剂RAMH(5μg)后,与哮喘组相比,RR明显降低,DA幅度明显增加(P<0.01)。下呼吸道内SP样免疫反应物的数量明显减少(P<0.01)。③哮喘缓解期,侧脑室注射组胺H3受体拮抗剂THIO(20μg)后,RR明显加快,DA幅度减小。下丘脑和皮质内组胺含量均高于对照组(P<0.05)。结论:脑内组胺H3受体参与了对哮喘发作的神经性调控过程。

组胺H_3受体对垂体瘤AtT-20细胞分泌ACTH的调节作用

目的 观察组胺受体激动剂对 At T- 2 0细胞分泌ACTH的影响 ,并探讨 G蛋白在组胺 H3受体信号转导机制中的作用 .方法 选用文献报道的高表达组胺 H3受体的垂体细胞瘤 At T- 2 0作为观察系统 ,用放免分析法测定给予组胺受体激动剂后各时间点细胞上清液中 ACTH分泌量的变化 ,并观察药物对细胞增殖的影响 .结果 组胺 H3受体激动剂R- (α) - Me HA(0 .1μmol· L- 1 )作用 8h能明显促进 ACTH的释放 ,释放量为 192 0 μg· L- 1 ,与同时间对照组 (780 μg·L- 1 )相比 ,明显增高 (P<0 .0 1) ;H1 和 H2 激动剂则无此作用 .且 R- (α) - Me HA引起 ACTH分泌的效应能被 H3受体特异性拮抗剂 thioperamide所拮抗 ,而 H1 受体和 H2 受体拮抗剂均不影响 R- (α) - Me HA的效应 .R- (α) - Me HA作用 8和 2 4h,对细胞增殖无明显影响 .用 G蛋白失活剂 NEM预先处理细胞后 ,取消了 R- (α) - Me HA增强 At T- 2 0细胞 ACTH分泌的效应 .结论 特异性激动组胺 H3受体后能引起兴奋 -分泌耦联过程 ,其信号转导过程中有 G蛋白的参与 .

哮喘豚鼠脑内组胺含量的变化及中枢组胺H_3受体的调节作用

目的 检测豚鼠哮喘急性发作时脑内组胺含量的变化 ,观察中枢组胺H3受体在哮喘未发作时对脑内组胺含量的影响。方法 哮喘急性发作组豚鼠给予腹腔注射卵蛋白致敏 ;阴性对照组豚鼠给予腹腔注射等量生理盐水 ;THIO组豚鼠在哮喘未发作期侧脑室内注射H3受体拮抗剂thioperamide (2 0 μg) ;生理盐水组豚鼠在哮喘未发作期侧脑室内注射等量生理盐水。断头处死动物后 ,在冰台上迅速分离出下丘脑、大脑皮质和海马 ,称重 ,匀浆 ,荧光法测定组胺含量。结果 哮喘急性发作组 ,下丘脑和大脑皮质中的组胺含量高于阴性对照组 ,差异有显著意义 (P <0 0 1) ;海马内组胺含量差异无显著意义 (P >0 0 5 )。哮喘未发作期侧脑室注射thioperamide后 ,下丘脑和大脑皮质中的组胺含量均升高 ,与生理盐水组比较差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ,海马内组胺含量无显著变化 (P >0 .0 5 )。结论 中枢组胺含量与哮喘发作有关 。