软骨藻酸对H4细胞氨基酸释放和Ca^(2+)浓度的影响

目的 研究软骨藻酸 (domoicacid)对H4细胞的兴奋性、抑制性氨基酸释放和胞内游离Ca2 + ( [Ca2 + ]i)浓度的影响。方法 应用高效液相色谱 (HPLC)和荧光分光光度计检测 0、0 0 64、0 64和 6 4μmol/L软骨藻酸作用于细胞 2h后的兴奋性、抑制性氨基酸释放和 [Ca2 + ]i浓度。结果 天冬氨酸和谷氨酸 :中、高剂量组均高于对照组 ,差异有显著性(P <0 0 5 ) ;甘氨酸 :仅高剂量组高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;γ 氨基丁酸 :低、中和高剂量组均低于对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;兴奋性氨基酸 /抑制性氨基酸 :低、中和高剂量组均高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。胞内[Ca2 + ]i :低、中和高剂量组分别为 ( 2 0 8 65± 11 0 1)、( 3 42 3 1± 15 0 8)和 ( 5 81 3 6± 17 2 4)nmol/L ,高于对照组 [( 14 3 2 5±11 97)nmo1/L] ,差异有显著性 (P <0 0 1)。兴奋性氨基酸与 [Ca2 + ]i浓度有显著的正相关性 (r =0 93 2 0P <0 0 1)。结论 软骨藻酸能引起H4细胞兴奋性和抑制性氨基酸释放和胞内 [Ca2 + ]i变化 。

α7 cDNA真核表达载体的构建及其在H4细胞中的表达

目的 构建一个含α7 cDNA的真核表达载体,并在人神经胶质瘤细胞H4中进行表达。方法 采用分子克隆技术将经测序证实的人α7 cDNA同真核表达载体pNASS-CMV-Neo连接,克隆PCR及酶切筛选出阳性重组体,并采用脂质体转染法将其导入H4细胞,免疫印迹、免疫染色、标记钙法检测α7的表达。结果 α7 cD-NA连接至pNASS-CMV-Neo载体,并在H4细胞中获得表达。结论 含人 α7 cDNA的真核表达重组体可在人神经胶质瘤细胞中有效而稳定地表达。

PFKFB3在胶质瘤组织中的表达及其对H4细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨恶性胶质瘤组织中糖酵解限速酶6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)的表达水平及PFKFB3抑制剂PFK15对胶质瘤H4细胞增殖、迁移、克隆形成和体内成瘤的影响。方法:采集2015年2月1日至2016年1月31日安康市中医医院神经外科手术切除的31例恶性脑胶质瘤及相应瘤旁组织标本,应用免疫组化技术和Western blotting检测胶质瘤和瘤旁组织中PFKFB3的表达水平。用不同浓度的(1.25、2.5、5.0μmol/L)PFK15抑制胶质瘤H4细胞的PFKFB3表达,通过MTT法、EdU细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验、克隆形成实验和裸鼠体内成瘤实验分别观察PFK15对H4细胞增殖、迁移、侵袭、克隆形成和体内成瘤的影响。结果:PFKFB3在胶质瘤组织中阳性率显著高于瘤旁组织[(80.60±8.98)%vs(41.57±10.16)%,P<0.05]。MTT和EdU实验结果显示,PFK15可明显抑制H4的增殖活性(P<0.05),且抑制作用具有浓度依赖性。PFK15处理后的H4细胞迁移、侵袭和克隆形成能力明显低于对照组(均P<0.05)。注射PFK15的裸鼠H4细胞移植瘤体积明显小于对照组裸鼠[(254.15±154.25)vs(801.52±224.25)mm3,P<0.01]。结论:PFKFB3在恶性胶质瘤组织中高表达,下调PFKB3可显著抑制胶质瘤H4细胞的恶性生物学行为和体内成瘤,PFKFB3可作为恶性胶质瘤生物治疗潜在的分子靶点。

六溴环十二烷(HBCD)对H4细胞和SK-N-AS细胞脱碘酶2和3表达的影响

六溴环十二烷(hexabromocyclododecane,HBCD)与多溴联苯醚(polybrominated diethyl ethers,PBDEs)复合污染体系,对人类健康尤其神经系统所造成的潜在危害及其机制一直是笔者课题组的研究方向。HBCD是广泛使用的溴化阻燃剂,与PBDEs一样,会通过干扰内分泌系统、影响甲状腺激素分泌及损伤神经系统,对生物体产生发育神经毒性。作为系列研究之一,本研究以H4人脑神经胶质瘤细胞和SK-N-AS人神经母细胞瘤细胞为体外生物模型,通过观察HBCD对H4细胞Ⅱ型脱碘酶(Dio2)和SK-N-AS细胞Ⅲ型脱碘酶(Dio3)表达的调控,初步探讨了HBCD对神经系统局部甲状腺激素水平的潜在影响。H4细胞和SK-N-AS细胞分别暴露于0、1、3和9μmol·L^-1HBCD24h后,采用MTT法检测细胞活力,Western Blot和RT-PCR法分别分析Dio2和Dio3蛋白和基因的表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测H4细胞脑源性神经细胞营养因子(BDNF)的分泌。结果表明,HBCD以剂量依赖方式降低H4细胞和SK-N-AS细胞生存率,引起H4细胞Dio2蛋白和基因表达下调,而致SK-N-AS细胞Dio3蛋白和基因表达上调。此外,HBCD还降低H4细胞BDNF的分泌。这表明,HBCD很可能通过影响神经和胶质细胞脱碘酶的表达,影响脑局部甲状腺激素水平,从而引起神经系统损伤及发育神经毒性。

十二碳烯酸对人H4细胞毒性作用研究

目的探讨十二碳烯酸对人H4细胞的毒性作用机制。方法采用MTT法、流式细胞仪检测十二碳烯酸对人H4细胞的毒性作用。结果分别给予人H4细胞0.3,0.9,2.7 mg·L-1十二碳烯酸培养48 h,十二碳烯酸对人H4细胞增殖抑制率分别为41.64%,70.97%,81.52%,半数抑制浓度(IC50)为0.40 mg·L-1,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);凋亡率分别为10.16%,18.22%,24.06%。结论十二碳烯酸对人H4细胞具有显著的毒性作用,其机制可能与损伤线粒体结构,抑制细胞分裂等有关。

苍耳子药物血清对H4细胞毒性作用的实验研究

目的探讨苍耳子药物血清对人脑神经胶质瘤细胞(H4细胞)的毒性作用。方法将日本大耳白兔分别于给药前灌胃生理盐水5ml/kg(给药前对照组)及灌胃苍耳子药物血清3.6g/kg(低浓度组)、7.3g/kg(中浓度组)和15.0g/kg(高浓度组),2h后从心脏抽血2ml/kg,离心取血清冻存。对H4细胞给予给药前对照组血清、不同浓度苍耳子药物血清及5-氟尿嘧啶(阳性对照组)培养48h后,用MTT法根据光密度值(OD)计算其对H4细胞的生长抑制率,用流式细胞仪检测其对H4细胞凋亡的影响。结果对H4细胞分别给予低、中、高浓度苍耳子药物血清和5-氟尿嘧啶,细胞生长抑制率分别为43.21%、49.38%、69.13%和61.72%;其各OD值与给药前对照组OD值相比,差异均有统计学意义(P均<0.01)。流式细胞仪检测发现,在对H4细胞给予低、中、高浓度苍耳子药物血清后,H4细胞的凋亡率随给药浓度的增加而升高,分别为15.1%、22.6%和25.4%。结论苍耳子药物血清对H4细胞分裂增殖具有明显的毒性和抑制作用。

血清可溶性髓样细胞触发受体-1、组蛋白H4与脓毒症患者病情严重程度的相关性及其对预后的评估价值

目的探究血清可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)、组蛋白H4与脓毒症患者病情严重程度的相关性及其对预后的评估价值。方法选取2020年3月至2022年9月福州市第一总医院重症医学科收治的96例脓毒症患者作为研究对象,按照病情严重程度分为脓毒症组(32例)、严重脓毒症组(45例)、脓毒症休克组(19例),入院24 h内行sTREM-1、组蛋白H4、降钙素原(PCT)检测,并进行急性生理和慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分评分及序贯器官衰竭评估(SOFA)评分评价,分析sTREM-1、组蛋白H4与病情严重程度的相关性。根据28 d生存情况分为存活组(n=71)和死亡组(n=25),比较存活组与死亡组的sTREM-1、组蛋白H4、PCT、APACHEⅡ评分、SOFA评分差异,并绘制受试者工作特征曲线(ROC)评价sTREM-1、组蛋白H4预测脓毒症患者预后的价值。结果脓毒症组、严重脓毒症组及脓毒症休克组的sTREM-1、组蛋白H4、PCT、APACHEⅡ评分、SOFA评分及28 d病死率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。血清sTREM-1、组蛋白H4与APACHEⅡ评分、PCT水平、SOFA评分均呈正相关(P<0.05)。死亡组的血清sTREM-1、组蛋白H4、APACHEⅡ评分、PCT、SOFA评分均高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。sTREM-1、组蛋白H4诊断脓毒症患者预后的AUC分别为0.792、0.837。结论脓毒症患者入院24 h内的血清sTREM-1、组蛋白H4水平与病情严重程度呈正相关性,可用于早期评估脓毒症患者的病情及预后,指导临床治疗。

青钱柳多糖对H4IIE肝细胞胰岛素信号传递的影响

目的:观察青钱柳多糖对肝细胞胰岛素信号传导通路关键靶点基因、蛋白表达的影响。方法:以H4IIE大鼠肝细胞为模型,培养72 h后,采用Neutral Red法检测青钱柳多糖(50、100、200、400μg·m L-1)对细胞活性的影响;根据细胞活性检测结果分为正常对照组(Control组)、胰岛素组(Insulin组)、青钱柳多糖低剂量组(LCP组)和高剂量组(HCP组);药物干预2 h后RT-PCR检测肝细胞相应基因表达,药物干预30 min后,利用Western blot法检测肝细胞相应蛋白磷酸化水平。结果:与Control组比较,100、200、400μg·m L-1青钱柳多糖干预后肝细胞活性显著升高(P<0.01);干预2 h后,LCP组Ins R、IRS-2基因表达显著升高(P<0.05),Insulin组和HCP组Ins R、IRS-2基因表达极显著升高(P<0.01);干预30 min后,Insulin组、HCP组Ins Rβ、IRS-2、Akt蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.01)。结论:青钱柳多糖具有增加肝细胞活性作用,其上调肝细胞胰岛素信号通路关键靶点Ins R、IRS-2基因表达,以及Ins Rβ、IRS-2、Akt蛋白磷酸化水平可能是其发挥降糖作用的机制。

重庆市主城区长江和嘉陵江水中有机污染物对H4IIE细胞CYP1A1表达的诱导

目的以重庆市主城区大溪沟(嘉陵江)和寸滩(长江)两个点为代表,研究2004～2005年度重庆市水源水中有机污染物对H4IIE细胞细胞色素P4501A1(CYP1A1)表达的诱导。方法固相萃取法萃取水中有机污染物,将萃取的有机污染物溶于二甲基亚砜(DMSO)中,对H4IIE细胞进行染毒,用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增CYP1A1mRNA,比较不同水样诱导H4IIE细胞CYP1A1mRNA表达的差异,用电泳迁移率实验(EMSA)检测CYP1A1启动子的激活情况。结果CYP1A1引物则可以将4个水样12h和24h处理组细胞的cDNA扩增出条带,48h处理组只有2005年1月寸滩样和2005年1月大溪沟样处理的细胞能扩增出CYP1A1基因的条带,所有样品的72h处理组细胞都没有CYP1A1基因的扩增;4个水样处理H4IIE细胞24h后,均可在细胞核内形成可与标记的XRE探针结合的芳烃受体-芳烃受体核转移蛋白(AHR-ARNT)二聚体,从而在AHR-ARNT二聚体蛋白处呈现发光条带。结论各水样均可激活CYP1A1基因的启动子XRE,也均可诱导H4IIE细胞CYP1A1mRNA的表达,CYP1A1mRNA的表达量随处理时间的差异有所不同。

尖叶假龙胆不同提取部位对胰岛素抵抗H4ⅡE细胞葡萄糖消耗的影响

目的:研究尖叶假龙胆不同提取部位对胰岛素抵抗H4ⅡE细胞糖消耗的影响。方法:采用CCK-8法评价H4ⅡE细胞活性;高浓度胰岛素(10-6mol/L)诱导培养H4ⅡE细胞36 h,建立新的胰岛素抵抗细胞模型。葡萄糖氧化酶法检测尖叶假龙胆不同提取部位对胰岛素抵抗H4ⅡE细胞糖消耗的影响。结果:尖叶假龙胆不同提取部位浓度大于150μg/m L时,对H4ⅡE细胞活性均有明显的抑制作用。尖叶假龙胆不同提取部位中乙酸乙酯提取部位对胰岛素抵抗H4ⅡE细胞葡萄糖消耗影响显著,大孔树脂95%提取部位与大孔树脂70%提取部位也不同程度地影响胰岛素抵抗H4ⅡE细胞葡萄糖消耗,大孔树脂30%提取部位效果不明显。结论:尖叶假龙胆乙酸乙酯提取部位改善胰岛素抵抗效果最佳,大孔树脂95%提取部位与大孔树脂70%提取部位也可不同程度地改善胰岛素抵抗作用。

柴胡皂苷-d对大鼠肝癌细胞H4-ⅡE细胞内Ca^(2+)的影响研究

目的探讨柴胡皂苷-d(saikosaponin-D,SS-D)诱导大鼠肝癌细胞H4-ⅡE细胞内钙离子浓度([Ca2+]cyt)变化的影响研究。方法通过噻唑蓝(MTT)比色实验选择合适的药物浓度、荧光指示剂Fluo-3/AM检测[Ca2+]cyt及钙库中Ca2+的变化。结果 MTT比色结果显示,10、30、50、70、100μmol/L SS-D对细胞的存活率都在90%以上。第一大组中阴性对照组可引起细胞内钙离子浓度升高,其平均荧光强度(MFI)为35.76±1.37;阳性对照组可使其大幅度升高,其MFI值为74.74±1.26。不同浓度的SS-D也可使其不同程度升高,并且与SS-D呈浓度依赖性,其平均荧光强度(MFI)分别为59.95±1.02、73.89±1.35、80.30±0.04、93.30±0.83。阳性对照组及处理组的MFI值明显高于阴性对照组(P<0.05);处理组1、处理组3及处理组4 MFI值与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);石胆酸(LCA)及SS-D、熊脱氧胆酸(UDCA)都能诱导细胞钙库中Ca2+释放。结论 SS-D能诱导细胞内Ca2+内流,增加[Ca2+]cyt,调控细胞内Ca2+的生理活动。

TRAIL诱发人脑H4神经胶质瘤细胞凋亡的研究

目的研究TRAIL对H4神经胶质瘤细胞的凋亡诱导作用,并探讨其可能机制。方法利用显微镜、透射电镜、流式细胞仪,观察和检测TRAIL对传代培养的肿瘤细胞的凋亡诱导作用,用MTT法检测caspase-8抑制剂zIETD—fmk对TRAIL凋亡诱导作用的抑制情况。结果TRAIL作用后镜下可见到H4细胞凋亡的典型表现;在流式细胞仪检测PI荧光直方图上,出现典型的亚二倍体峰,随着作用时间的延长,H4细胞凋亡率明显增加;zIETD—fmk能显著抑制TRAIL对H4细胞的凋亡诱导作用。结论TRAIL可有效的诱导H4神经胶质瘤细胞凋亡;caspase-8在H4瘤细胞的凋亡过程发挥着重要作用,TRAIL可能是通过激活caspase系统而诱发H4瘤细胞凋亡的。

溴氰菊酯诱导H4神经胶质瘤细胞凋亡机制研究

目的研究溴氰菊酯(deltamethrin,DM)诱导H4神经胶质瘤细胞凋亡的神经毒作用机制。方法将H4神经胶质瘤细胞分为对照组(给予1/1000体积的DMSO)、DM组(给予10-5mol/L的DM)、Ac-DEVD-CHO+DM组(给予2.0μmol/L的Caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO和10-5mol/L的DM)。应用FACS420型流式细胞分析仪测定细胞凋亡率,以四肽化合物Ac-DEVD-pNa为底物检测Caspase-3活力,以免疫组织化学法检测Caspase-3蛋白的表达。结果对照组凋亡及坏死细胞极少;DM组细胞凋亡率为(14.3±4.51)%,明显升高(P<0.01);Ac-DEVD-CHO+DM组的细胞凋亡率[(8.8±2.13)%]高于对照组而低于DM组(均P<0.05)。与对照组比较,DM组Caspase-3活力为0.304±0.025,蛋白表达为0.151±0.035,均明显增强(均P<0.01);而Ac-DEVD-CHO+DM组未见改变(P>0.05)。结论DM对H4神经胶质瘤细胞具有细胞毒作用,使H4神经胶质瘤细胞Caspase-3活力增加,蛋白表达增加,促进细胞凋亡。

发酵人参对H4IIE大鼠肝癌细胞三酰甘油蓄积的抑制作用机制

[目的]探讨发酵人参对H4IIE大鼠肝癌细胞三酰甘油蓄积的抑制作用机制.[方法]用0、25、50、100、200 mg/L的发酵人参处理H4IIE大鼠肝癌细胞24 h,采用MTS法测定发酵人参对H4IIE细胞生存率的影响,并测定三酰甘油(TG)水平,采用Western blot法检测发酵人参对AMPK、ACC、p-AMPK及p-ACC蛋白表达的影响.[结果]发酵人参在0~200 mg/L质量浓度范围内对H4IIE大鼠肝癌细胞生长率未见产生影响,在0~100 mg/L质量浓度范围内剂量依赖性地降低细胞中的三酰甘油水平(P<0.001).发酵人参显著增加AMP依赖的蛋白激酶及其下游激酶ACC的磷酸化.[结论]发酵人参可能通过AMPK信号通路调控H4IIE大鼠肝癌细胞三酰甘油的蓄积.

大鼠肝癌细胞系H4-Ⅱ E钙内流的检测方法

目的 利用大鼠肝癌细胞系Ｈ４－ⅡＥ建立一种适用于贴壁生长的细胞检测细胞内游离钙离子（［Ｃａ２＋ ］ｉ）浓度的方法。 原理 用荧光染料ｆｌｕｏ－３ 在细胞内能与游离Ｃａ２＋ 结合。在一定波长的光激发下，可发出荧光，根据荧光的强度来检测细胞内游离Ｃａ２＋ 浓度及钙内流的方法。 方法 以Ｈ４－ⅡＥ细胞系为材料，通过Ｃａ２＋ 回加技术、荧光显微镜技术和ＵＭＡＮＳ计算机软件或Ａｘｏｎ 计算机成像系统来记录图像和处理数据。 结果 可检测、定量细胞内游离Ｃａ２＋ 的浓度，并可用以研究细胞钙信号的传递和传导机制。 结论 该方法较为简便、易行，相对费用较低，适用于国内实验室。

低氧诱导因子-1α mRNA在克唑替尼诱导H2228细胞凋亡中的作用

目的探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在克唑替尼诱导EML4-ALK阳性肺腺癌细胞株H2228凋亡中的作用。方法 (1)用10、30、90、270、810 nmol/L浓度梯度的克唑替尼处理H2228细胞48 h,MTT比色法测定细胞增殖能力。(2)用100、200、300 nmol/L克唑替尼处理H2228细胞48 h,Annexin V流式细胞仪检测凋亡细胞。(3)RT-PCR实验:1采用50、100、200、400、800μmol/L浓度的低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)作用H2228细胞24 h,观察HIF-1α的mRNA表达水平变化。2常氧对照组(0.5%DMSO培养基48 h)、常氧+克唑替尼组(0.5%DMSO培养基24 h+500 nmol/L克唑替尼24 h)、低氧对照组(200μm/L CoCl224 h+0.5%DMSO培养基24 h)、低氧+克唑替尼组(200μm/L CoCl224 h+500 nmol/L克唑替尼24 h),采用RT-PCR方法检测各组细胞HIF-1α、Akt、VEGF mRNA的表达水平。结果 (1)MTT实验结果示:随着克唑替尼药物浓度升高,H2228细胞增殖抑制率逐渐升高,呈剂量依赖性,半增殖抑制浓度(IC50)为335 nmol/L。(2)凋亡实验结果示:H2228细胞凋亡率随克唑替尼浓度增加而升高,呈剂量依赖性。(3)RT-PCR实验结果示:1随着CoCl2浓度的增加,HIF-1α的mRNA表达水平逐渐下降,呈剂量及时间依赖性,于200μm/L浓度时下降最明显。2与对照组相比,无论是在常氧还是低氧,克唑替尼组H2228细胞HIF-1α、Akt的mRNA表达均上调,VEGF的表达下调。与常氧+克唑替尼组比较,低氧+克唑替尼组HIF-1αmRNA上调更明显(P<0.05)。结论克唑替尼对肺腺癌细胞株H2228的增殖抑制和诱导凋亡作用呈剂量依赖性,HIF-1αmRNA的上调在克唑替尼诱导肺癌细胞凋亡过程中发挥重要作用。

重庆市江水中有机污染物细胞毒性分析

目的了解重庆市主城区嘉陵江和长江水中有机物污染状况,评价水中有机污染物对人群健康的影响。方法固相萃取法萃取水中有机污染物,将萃取的有机污染物溶于二甲基亚砜(DMSO)中,对H4IIE细胞进行染毒,用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)检测水中有机污染物对H4IIE细胞增殖的抑制作用,并用荧光比色法检测水中有机污染物对H4IIE细胞7-乙氧基-3-异吩嗯唑酮.脱乙基酶(EROD)的诱导作用。结果各水样处理H4IIE细胞后,H4IIE细胞的增殖随染毒时间和剂量的增加而呈下降趋势。48和72h处理组200和250倍浓缩的水样对细胞增殖有显著抑制作用(P<0.05,与溶剂对照组比较);2,3,7,8-四氯二苯并-对-二恶英(TCDD)对EROD诱导的半数有效剂量(EC50)值为4.4pg/ml,各水样相对于2,3,7,8-TCDD的毒性当量值分别为(2004.08)大溪沟:2.2×10-4pg/L;(2004.08)寸滩:0.9×10-4pg/L;(2005.01)大溪沟:13.3×10-4pg/L;(2005.01)寸滩:3.7×10-4pg/L。结论污染物对H4IIE细胞的毒性呈现出时间和剂量依赖性;各水样均可诱导H4IIE细胞EROD活性;同一采样点中,枯水期水样毒性大于丰水期水样。

小鼠脂联素重组腺相关病毒载体转染对H4IIE细胞葡萄糖生成的影响

成功构建小鼠脂联素重组腺相关病毒载体(rAAV-Ad)。rAAV-Ad转染增强低浓度胰岛素对H4IIE细胞葡萄糖生成的抑制,提示对肝细胞葡萄糖生成的抑制是脂联素降低血糖的主要机制之一。

利多卡因减轻异氟醚对H4神经胶质瘤细胞线粒体的损伤

目的 观察利多卡因在异氟醚对H4神经胶质瘤细胞线粒体损伤中的保护作用.方法 将H4细胞分成6组：对照组、3％异氟醚（ISO）组及3％ ISO ＋40、60、80、100 mg/L利多卡因组.通过流式细胞仪检测细胞凋亡,电镜观察H4细胞线粒体形态,线粒体呼吸链复合酶活性的检测及线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）检测线粒体膜电位变化.结果 3％异氟醚使H4细胞的凋亡率由对照组的（1.6±0.1）％增加至（33.5±3.3）％（P＜0.05）,分别加入40、60、80及100 mg/L利多卡因,H4细胞凋亡率分别为（24.4±4.3）％、（17.4±0.6）％、（16.0±0.4）％及（13.3±0.7）％.3％ ISO组可见线粒体出现肿胀,甚至不同程度的基质密度减少和嵴断裂以及空泡样改变;加入100 mg/L利多卡因,H4细胞线粒体形态接近对照组.复合酶Ⅳ的活性在3％异氟醚处理后明显降低（P＜0.05）,加入100 mg/L利多卡因后活性明显升高（P＜0.05）.3％异氟醚使H4细胞线粒体膜电位由对照组的（8.3±1.9）％降低至（2.3±0.2）％（P＜0.05）,分别加入40、60、80及100 mg/L利多卡因,H4细胞凋亡率分别为（2.6±0.1）％、（3.2±0.6）％、（4.5±0.4）％及（5.6±0.3）％.100 mg/L利多卡因组H4细胞膜电位显著升高（P＜0.05）.结论 异氟醚可以引起线粒体损伤导致H4细胞凋亡,而足够浓度的利多卡因能够通过减轻线粒体损伤而减少H4细胞凋亡.

hsa_circ_0076931可能通过hsa-miR-181a-5p影响胶质瘤发生发展

目的:探讨hsa_circ_0076931在胶质瘤中的表达及其潜在分子机制。方法:通过生物信息学分析,筛选出目的基因hsa_circ_0076931,在H4细胞系中过表达hsa_circ_0076931后进行转录组测序、生物信息学分析和验证。结果:基因本体(GO)和基因组百科全书(KEGG)结果显示:差异环状RNA(circRNAs)母基因及差异信使核糖核酸(m RNA)主要参与细胞周期、细胞分裂等生物学功能以及代谢、癌症相关和MAPK等信号通路。此外,与hsa_circ_0076931互相作用的基因主要参与细胞增殖、细胞凋亡和细胞迁移等生物功能以及MAPK、PI3K-Akt、Rap1等信号通路。hsa_circ_0076931可以下调靶基因hsa-miR-26a-5p、hsa-miR-181a-5p和hsa-miR-34a-5p表达,上调双特异性磷酸酶5(DUSP5)、血小板衍生生长因子受体(PDGFRB)和钙通道β3亚基(CACNB3)的表达,并抑制磷酸化ERK(p-ERK)蛋白的表达。结论:hsa_circ_0076931可能通过吸附hsa-miR-181a-5p结合上调DUSP5的表达,从而抑制MAPK信号通路参与胶质瘤的发生发展过程。