H5N1型禽流感病毒感染非人灵长类动物的观察

目的观察H5N1型禽流感病毒对中国非人灵长类动物的易感性并建立动物模型。方法将病毒通过滴鼻接种实验猴,观察感染后动物的临床症状,采血、咽拭子及各器官组织进行血清学、病原学及病理学检查,记录抗体变化、病毒分离情况及病理学改变。结果感染后动物表现轻度食欲下降、一过性体温升高及外周血白细胞减少,肺组织病毒分离及RT-PCR阳性,病理检查感染急性期动物肺组织表现为间质性肺炎,肺泡间隔增宽,充血出血明显,肺泡受压变形,间质及肺泡内有大量炎细胞浸润,符合病毒性肺炎的改变,感染后14 d动物血清IgG抗体水平较感染前升高4倍。结论H5N1病毒可感染非人灵长类动物,可以作为感染模型进行H5N1病毒的发病机制、疫苗评价、药物筛选等研究。

H5N1型禽流感病毒广谱中和单克隆抗体的筛选及其中和机制初步研究

利用杆状病毒-昆虫细胞表达H5N1型禽流感病毒的血凝素蛋白(HA),纯化后的重组蛋白HA免疫小鼠并制备杂交瘤单克隆抗体,用H5N1型禽流感病毒的全病毒进行筛选,成功地获得了抗H5N1型禽流感病毒血凝素蛋白HA的单抗.MDCK细胞微量中和试验表明,单抗8G10D7可对clade2和clade9的H5N1型禽流感病毒起中和作用.Western-blot及血凝抑制实验进一步证明了该单抗的结合位点位于HA蛋白的HA1亚基上.鸡胚感染病毒预防试验结果表明,8G10D7对禽来源的和人来源的H5N1型禽流感病毒均可达到100%的保护率;在治疗试验组中,8G10D7对禽来源的病毒感染具有较高的保护率,可达100%,对人来源的H5N1型禽流感病毒最高也可达87.5%的保护率.该抗体的获得不仅为H5N1型高致病性禽流感病毒的预防和治疗带来了希望,同时其中和位点的发现也为以后亚单位疫苗的研制提供新的思路.

疫区夏秋季鸡鸭H5N1亚型禽流感病毒隐性感染调查

目的调查H5N1亚型禽流感疫区夏秋季鸡鸭H5N1亚型禽流感病毒的流行情况。方法以2005年12月出现过因H5N1亚型禽流感感染死亡病例的烟竹村及周围3 km范围为疫区,10 km外未发生过禽流感疫情的塘洞村为非疫区,于2008年11月(秋季)和2009年7月(夏季)采集疫区与非疫区健康散养鸡鸭血,采用酶联免疫吸附法检测H5N1亚型禽流感病毒隐性感染情况。结果总感染率为44%。疫区和非疫区隐性感染率分别为49.12%和42.11%,两者相比P>0.05。2008年11月鸡鸭H5N1亚型病毒隐性感染阳性率为63.6%,明显高于2009年7月的29.0%,P<0.05。烟竹村鸡隐性感染总阳性率为59.34%,明显高于鸭的11.02%,P<0.05。结论 H5N1亚型禽流感疫区健康散养鸡鸭对H5N1病毒普遍易感,有可能成为H5N1亚型禽流感主要传染源,其中鸡作为传染源的可能性更大。秋季隐性感染率偏高,对禽流感的防控重点应放在秋季。

禽流感H5N1型病毒对沙鼠致病性的初步研究

目的观察禽流感H5N1型病毒对沙鼠的致病性。方法在生物安全三级实验室,将禽流感H5N1型病毒通过滴鼻接种乙醚麻醉后沙鼠,观察14 d,记录沙鼠的体温、体重、临床体征、病理学变化、病毒分离情况及抗体变化。结果沙鼠感染后发病主要表现在第2～6天,攻毒组沙鼠出现反应迟钝、皱毛、弓背、食欲下降、呼吸急促、打堆等体征,攻毒组沙鼠的体温降低和体重减轻,死亡率为44％,在攻毒后8 d检出抗体,主要病理学变化表现为肺出现严重淤血、水肿、出血,镜下可见肺间质充血,血管周围炎性细胞浸润,肝和胸腺淤血,肾出血,肾小管变形。结论禽流感H5N1型病毒对沙鼠有较强致病性。

禽流感H5N1型病毒对沙鼠致病性的初步研究

[目的]观察禽流感H5N1型病毒对沙鼠的致病性;[方法]在生物安全三级实验室,将禽流感H5N1型病毒通过滴鼻接种乙醚麻醉后沙鼠,观察14天,记录沙鼠的体温体重、临床症状、病理变化、病毒分离及抗体变化;[结果]沙鼠感染后发病主要表现在第2天至第6天,攻毒组沙鼠出现反应迟钝、皱毛、弓背、食欲下降、呼吸急促、打堆等症状,攻毒组沙鼠的体温降低和体重减轻,死亡率为44%,在第8天检出抗体,主要病理变化表现为肺出现严重淤血、水肿、出血,镜下可见肺间质充血,血管周围炎性细胞浸润,肝和胸腺淤血,肾出血,肾小管变形。

H5N1高致病性禽流感病毒HA基因在昆虫细胞中的表达

目的:扩增高致病性禽流感H5N1亚型病毒血凝素(hemagglutinin,HA)基因,并进行真核表达。方法:抽提毒株A/Jiangsu/08-6基因组RNA,反转录为cDNA,用特异性引物扩增HA基因。HA经BamHⅠ/XhoⅠ双酶切后克隆到pFastBac-GP67B载体上,筛选出阳性重组转座质粒pFastBac-GP67B-HA,并将其进一步转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选和PCR鉴定后,获得重组穿梭载体(rBacmid-HA),再通过CellfectinⅡ试剂转染rBacmid-HA至对数生长期的sf9昆虫细胞,进行目的蛋白的真核表达。分别用SDS-PAGE、Western blot、血凝试验以及质谱分析对其进行鉴定。结果:HA基因在sf9细胞表达的蛋白分子量约70 000。血凝试验表明重组HA蛋白可使鸡红细胞发生凝集。质谱分析鉴定该重组蛋白为HA蛋白。结论:重组HA蛋白具有天然HA蛋白的活性,为亚单位疫苗的研制及中和抗体的筛选奠定了基础。

RIG-I样受体在H_5N_1型禽流感病毒和LPS介导的急性肺损伤机制中的意义

目的:急性肺损伤(ALI)是呼吸重症监护病房的主要死亡原因,也是SARS和人禽流感的重要临床表现形式。RIG-I样受体(RLR)能够识别细胞质中的病毒RNA,但其在ALI致病机制中的作用还不清楚。方法:我们复制急性感染(H5N1型禽流感病毒和内毒素)引起ALI的大鼠模型和相应的体外细胞培养(人肺上皮细胞株A549)实验,用实时荧光RT-PCR法观察RLR基因表达变化,留取培养细胞上清用ELESA法检测细胞因子干扰素-β(IFN-β)的变化。结果:发现H5N1型禽流感病毒能诱导RLR的大量表达,且能增加A549培养液上清IFN-β的大量生成。结论:RLR参与了H5N1型禽流感病毒诱发的急性肺损伤过程,并可能起到抗病毒的保护效应。

美批准使用H5N1型禽流感病毒快速检测技术

美国食品和药物管理局2009—04—07批准使用一种H5N1型禽流感病毒快速检测技术，用这种技术可以在40min内检测出人是否感染了H5N1型禽流感病毒。

美批准使用H5N1型禽流感病毒快速检测技术

美国食品和药物管理局2009年4月7日批准使用一种H5N1型禽流感病毒快速检测技术，用这种技术可以在40min内检测出人是否感染了H5N1型禽流感病毒。美药管局当天发表新闻公报说，这一技术由加利福尼亚州一家公司开发，其原理是通过判断被检测者体内是否存在NS1蛋白质来确认其是否感染H5N1型禽流感病毒。美药管局医疗设备和放射卫生管理中心主任丹尼尔·舒茨在公报中说，这种技术有助于保护广大公众免受禽流感威胁。

美批准使用H5N1型禽流感病毒快速检测技术

美国食品和药物管理局（FDA）4月7日批准使用一种H5N1型禽流感病毒快速检测技术，用这种技术可以在40min内检测出入是否感染了H5N1型禽流感病毒。FDA当天发表新闻公报说，这一技术由加利福尼亚州一家公司开发，其原理是通过判断被检测者体内是否存在NS1蛋白质来确认其是否感染H5N1型禽流感病毒。FDA医疗设备和放射卫生管理中心主任丹尼尔·舒茨在公报中说，这种技术有助于保护广大公众免受禽流感威胁。

美批准使用H5N1型禽流感病毒快速检测技术

新华网华盛顿4月7日电美国食品和药物管理局7日批准使用一种H5N1型禽流感病毒快速检测技术，用这种技术可以在40分钟内检测出人是否感染了H5N1型禽流感病毒。

美国批准使用H_5N_1型禽流感病毒快检技术

美国食品和药物管理局日前批准使用一种H5N1型禽流感病毒快速检测技术，用这种技术可以在40分钟内检测出人是否感染了H5N1型禽流感病毒。

香港H5N1型禽流感病毒的由来

H5N1原是感染鸟类的流感病毒,但1997年在香港直接感染人类,造成18人感染6人死亡,病死率超过30％,超出想象。流行性感冒大都发生在冬季,但此型病毒感染却发生在流感的非流行期,引起大众的恐慌,担心此型流感的发展会大流行,造成人类的浩劫。幸好香港特区政府处理得宜,随即实施鸡只扑杀政策,终于成功遏制了H5N1流感病毒的流行。1999年香港有2位儿童感染H9N2型流感病毒,这种病毒在国内大陆、欧洲、中东、南非及美国的家禽间也曾经造成流行,香港的H5N1型禽流感病毒流行期间,从鹌鹑中分离到的H9N2非常接近从人类分离到的H9N2型流感病毒。

美批准H5N1型禽流感病毒快速检测技术

美国食品和药品管理局日前批准使用一种H5N1型禽流感病毒快速检测技术，用这种技术可以在40分钟内检测出入是否感染了H5N1型禽流感病毒。

沙特发现H5N1型禽流感病毒

沙特农业部11日14日宣布，沙特境内一座家禽养殖场检验出H5N1型禽流感病毒，当局已扑杀5万家禽。

禽流感H_5、H_7、H_9亚型多重实时荧光RT-PCR检测方法的建立

禽流感病毒抗原变异性强,血清亚型多,涉及的范围广。所以,需要进一步实行保护,才能避免交叉感染。但在禽流感病毒检测时,每种检测方法每次只能检测禽流感单个亚型,耗时长。本研究的目标是采用多重实时荧光RT-PCR技术,同时检测禽流感H、H、H亚型,并研制相应的快速检测试剂盒。

匈牙利又证实两只天鹅死于H5N1型禽流感病毒

匈牙利媒体3月8日报道，经证实，3月6日在匈南部纳吉包劳奇考地区发现的两只死天鹅携带H5N1型禽流感病毒。据报道，纳吉包劳奇考地区是匈牙利最先发现禽流感疫情的地区，匈牙利有关方面已于2月中旬把该地区设为隔离保护区和疫情观察区。上周，随着疫情的发展，这一保护和观察区的范围再次被扩大。