广东省食品中O157:H7大肠杆菌分离株的生化特征、毒力因子与耐药性的探讨

目的:了解广东省食品中O157:H7大肠杆菌分离株中生化特征、毒力因子的携带与耐药情况。方法:采用免疫磁珠富集法进行O157:H7大肠杆菌分离,对O157:H7大肠杆菌分离株进行生化、噬菌体、血清学鉴定后,应用PCR技术检测其毒力因子,应用纸片法(K-B法)进行药敏试验。结果:从277份样品中分离出2株O157:H7大肠杆菌,总检出率为0.72%;对这2株O157:H7大肠杆菌分离株进行PCR毒力因子的测定,其中1株为携带eaeA、H ly和SLT2毒力因子的强毒株,而另1株分离株未检出毒力因子。药敏试验结果显示,这两个O157:H7大肠杆菌分离株对青霉素类、四环素类、磺胺类、喹诺酮类、大环内酯类5大类的部分抗生素有多重耐药性。结论:广东省食品中存在O157:H7大肠杆菌强毒株的污染。O157:H7大肠杆菌多重耐药株的出现,提示应关注我国畜牧养殖业抗生素的使用情况。

温岭市首例O157:H7大肠杆菌感染性腹泻的调查

目的 :了解温岭市 O15 7:H 7大肠杆菌感染性腹泻而引起的死亡病例的流行病学状况及病原学特性 ,为预防和控制提供科学依据。方法 :采用 SMAC选择性培养基、 ATB全自动细菌生化鉴定仪、血清学试验、毒力试验 ,对人、鸡、鸭、羊粪便标本进行了病原学检测和鉴定。结果 :从羊粪中检出一株 O15 7:H 7大肠杆菌 ,检出率为 1.5 1%。结论

O157:H7大肠杆菌实验室诊断

快速和准确从病人或环境标本中检测O15 7:H7大肠杆菌 ,对预防和治疗O15 7:H7大肠杆菌所致疾病具有重要意义。本文从常规分离鉴定方法、免疫学检测方法、分子生物学检测三个方面 ,对O15 7:H7大肠杆菌的检测。

用免疫胶体金快速诊断卡初筛粪便中的O157∶H7大肠杆菌

我们用O15 7∶H7大肠杆菌免疫胶体金快速诊断卡 ,对腹泻患者粪便标本中的E .coliO15 7∶H7进行初筛 ,然后再用免疫磁珠捕获集菌及病原菌的分离和鉴定。结果发现 ,该诊断卡可检测到每卡 70个菌细胞。诊断卡强阳性的粪便标本 ,91 18%可以分离到O15 7∶H7大肠杆菌 (31/34 ) ;诊断卡弱阳性的粪便标本 ,5 47% (7/12 8)可以分离到O15 7∶H7大肠杆菌 ;诊断卡阴性的粪便标本 ,没有分离到病原菌。O15 7∶H7大肠杆菌免疫胶体金快速诊断卡是一种快速、灵敏、简便的技术 ,可用于对疑似病例的早期诊断和对粪便标本进行初筛 ,减少了工作量 ,值得推广。

用O157：H7大肠杆菌经不同免疫途径免疫后的免疫应答特性及其保护力

目的用灭活的O157：H7大肠杆菌以粘膜与系统免疫途径免疫小鼠，研究不同免疫途径免疫后免疫应答特性，及其IgA与IgG抗体与抗感染的关系。方法用灭活的O157：H7大肠杆菌经鼻腔、口腔与腹腔免疫途径免疫BALB／C小鼠。加强免疫两次后的第三周收集血液，气管与肠道粘膜中的分泌物，以ELISA法检测样品中的IgA与IgG抗体。结果研究发现用O157：H7大肠杆菌经鼻腔与口腔途径免疫后能有效地诱导IgA粘膜免疫应答，IgG体液免疫应答；但经腹腔免疫途径免疫后仅能诱导IgG体液免疫应答。在最后一次免疫后的第三周，用致死剂量的O157：H7大肠杆菌经鼻腔感染小鼠，结果发现小鼠经鼻腔与口腔免疫后能抵抗O157：H7大肠杆菌的局部感染，但经腹腔免疫后不但不能保护小鼠抵抗感染，而且比对照组小鼠死亡更快，死亡率更高。结论我们的研究结果提示粘膜免疫途径不但能有效地诱导粘膜免疫应答，而且能保护小鼠抵抗致死剂量的O157：H7大肠杆菌的感染。

快速检验食品中沙门氏菌和 O1 5 7∶H7大肠杆菌(英文)

利用沙门氏菌快速检验装置 (Oxoid公司出品 )和可视免疫沉淀物 (VIP)试剂盒 (Bio Control Systems公司出品 )对广西桂林市的七星区某农贸市场的 2 0种食品进行了沙门氏菌和 O1 5 7∶ H7大肠杆菌的快速抽样检验 .结果发现 ,其中的 1 1种食品的沙门氏菌呈阳性反应 ,4种食品的 O1 5 7∶H7大肠杆菌也呈阳性反应 .与目前国内普遍使用的传统检验方法相比 ,该方法具有快速、简便、高效、准确的特点 .

厦门市水产品中首次检出O157∶H7大肠杆菌

目的 :调查我市水产品中 O15 7大肠杆菌的污染情况 ,为防治工作提供依据。方法 :用 VIDAS (E.coliO15 7)试条及 E.coli O15 7检测卡对样品进行初筛 ,初筛阳性的样品再进行分离培养鉴定。结果 :2 6份水产品中检出 2株 O15 7∶ H7大肠杆菌 ,检出率 7.6 9%。结论 :我市部分水产品中存在 O15 7∶ H7大肠杆菌的污染 。

福州家畜O_(157)∶H7大肠杆菌调查分析

目的 了解福州市家畜中O157∶H 7大肠杆菌的带菌情况 ,为防制提供依据。 方法 采集本市家畜中的牛、猪粪便标本 ,直接划种于SMAC培养基 ,经血清学试验、生化试验鉴定确诊的菌株做志贺样毒素测定和药物敏感性测定。 结果 首次在福州地区 195头牛和 2 45头猪中各检出 2株O157∶H7大肠杆菌。 结论 本市牛、猪等家畜中存在O157∶H7大肠杆菌 ,要加强监测。

济源市三例O157:H7大肠杆菌感染的追踪调查

目的 探讨腹泻病人携带大肠杆菌O15 7:H7的机率 ,观察带菌时间及预后 ,方法 采用流行病学监测方法发现病人 ,通过病人粪便mEC肉汤增菌 14个小时 ,用胶体金免疫标记卡筛选 ,免疫磁珠法集菌 ,CHROMAGAR -O15 7:H7显色培养基分离 ,rfbO157、rfbo111、hlyA、stx1、stx2 、exeA引物PCR扩增等方法进行病源菌分离 ,毒力因子鉴定。结果 从 30例腹泻病人中分离出的 4株O15 7:H7菌株 ,PCRrfbO157扩增均为阳性。其中二株具有stx2 、hlyA、eaeA毒力基因 ,二株为O15 7:H7不产毒株 ,结论O15

1999年三明市O157:H7大肠杆菌监测报告

0157:H7大肠杆菌是引起人类肠出血性肠炎的主要菌种,此菌于1982年在美国首先被确认为一种新型致泻菌。我国于1987年从江苏腹泻病人中分离出0157:H7大肠杆菌,现已有10多个省市从人、动物或食品中检出该菌。最近国内局部地区已有发生出血性大肠杆菌肠炎的流行,并出现死亡病例,严重危害人民健康。根据1999年福建省0157:H7大肠杆菌监测方案,我市于1999年8～10月对人群、动物中该菌分布及食物、食品的污染情况进行了监测,现将监测情况报告如下:

基于紫胶红素的靶标有色化免疫层析试纸条联检大肠杆菌O157∶H7和沙门氏菌

为摆脱免疫层析试纸条对配对抗体的依赖,文章设计了一种新型靶标有色化免疫层析试纸条,使用紫胶红素和十二合水硫酸铝钾媒染剂,通过先媒后染的方法,实现了免疫层析试纸条的“可视化”。验证结果显示,该试纸条对大肠杆菌O157∶H7和沙门氏菌的检测限均达到了106 CFU/mL;同时,与常见食源性致病菌间不存在交叉反应,在鸡胸肉、鸡蛋、牛奶等食品基质中能够在增菌9 h内检出。文章成功设计了一种操作简单、检测成本低,更易国产化的快速检测免疫层析试纸条,为后续免疫层析试纸条的设计提供了新思路。

食品中肠出血性大肠杆菌O157∶H7的检测技术研究进展

近年来,因食源性致病菌造成的食品中毒正在不断增加,严重威胁了人类的健康,大肠杆菌(E.coli)O157∶H7由于其低感染剂量和高致病性等特点引起了研究人员和世界卫生组织的高度重视。因此精准快速的检测食品中的E.coli O157∶H7对食品安全问题有着重要的意义,是预防和控制食源性疾病传播的重要技术,为此本文对E.coli O157∶H7的常规检测方法、免疫学法、分子生物学法和其他方法进行论述,介绍了这些方法的优缺点,对各种方法进行了整体比较,以期为有关工作者在选择检测方法或研发新方法提供参考。

大肠杆菌O157:H7烈性噬菌体SF08的分离、表征及在食品中的应用

本研究通过双层平板法从湖水中分离、纯化出一株大肠杆菌O157:H7烈性噬菌体,并命名为SF08。对其生物学特性、基因组序列及在即食鸡爪中的抑菌效果进行分析。结果表明,SF08由长约124 nm的可收缩尾巴和直径约76 nm的多面体头部组成。最佳感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)为0.01;潜伏期为20 min,裂解期为20~110 min,爆发量为66 PFU/cell;在pH 3~12和30~70℃条件下能保持较高的活性。基因组全长59704 bp,G+C含量为56.52%,共有72个开放阅读框(ORF)。SF08在4℃下可以极显著地抑制即食鸡爪中模拟污染的大肠杆菌O157:H7(P<0.01)。本研究表明SF08具有较好的生物学特性及安全性,为后续研发和制备天然杀菌剂提供理论基础和参考。

一种可快速检测大肠杆菌O157:H7的纸基传感器的制备与应用

大肠杆菌O157:H7是一种致病性较强的食源性细菌,通常在生制食品中被检出,一旦被人体摄入会引发肠道疾病,严重危害公众健康。本研究制备了功能化的长余辉探针,并结合适配体的特异性识别功能构建了能快速检测大肠杆菌O157:H7的纸基传感器,检出限达7.5×10^(3) CFU·mL^(-1)。该传感器可同时检测3个样品,具有特异性好、操作简便和环境友好的特点,可应用于大量样品中大肠杆菌O157:H7的快速筛查。

纳米金与纳米金花标记的免疫层析法的建立及快速检测大肠杆菌O157∶H7的比较研究

为实现大肠杆菌O157∶H7早期现场的快速检测,该试验通过化学还原法与介导生长法制备了AuNPs与AuNFs作为标记探针,建立2种用于大肠杆菌O157∶H7现场快速检测的免疫层析试纸条,并对2种试纸条的的灵敏度、特异性和准确性进行检测。结果显示,所建立的2种免疫层析方法均可在15 min内检出食品中的大肠杆菌O157∶H7,其中AuNP试纸条最低检出限为3.2×10^(5)CFU/mL,AuNFs试纸条最低检出限为3.2×10^(4)CFU/mL,与单增李斯特菌、沙门氏菌、坂崎肠杆菌等常见食源性致病菌没有交叉反应。对人工污染果冻、牛奶和牛肉等样品AuNPs试纸条分别在前增菌5、6、5 h时检出,AuNFs试纸条分别在前增菌5、5、4 h时检出,且不受食品复杂机制的影响。结果表明,所建立的2种免疫层析试纸条灵敏度高、特异性强、操作简便,适用于大肠杆菌O157∶H7现场快速检测。

基于抗体-适配体夹心生物传感器检测大肠杆菌O157:H7

大肠杆菌O157:H7(Escherichia coli O157:H7)是一种重要的与公共卫生相关的食源性病原体。抗体分子是体液免疫应答中最重要的效应分子,具有多种生物学活性,最主要的生物学功能是与相应抗原特异性结合。适配体是体外合成的较短DNA序列,可通过识别特定区域和靶标特异性结合。利用抗体和适配体的特异性识别功能及免疫磁珠的捕获作用和磁分离,并通过多克隆抗体和裁剪得到的适配体搭建生物传感器,使用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)可以实现对靶标在(8×10^(3))-(8×10^(6))CFU/mL范围内的定量检测,检测限为800 CFU/mL。

大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制

本文采用柠檬酸三钠还原法制备的胶体金溶液标记大肠杆菌O157:H7抗体(6C1E5),然后将其包被于金标垫上,再将大肠杆菌O157:H7抗体(10G1A2)和兔抗鼠IgG分别包被于硝酸纤维素膜作为检测线和质控线,研制出的大肠杆菌O157:H7胶体金免疫层析快速检测试纸检测灵敏度达104 CFU/mL,并与鼠寒沙门氏菌、蜡样芽孢杆菌等8种菌株无交叉反应,显示出较强的特异性。