生地提取物对雏鸡免疫器官指数和H9疫苗免疫效果的影响

本试验旨在研究生地提取物对雏鸡免疫器官发育和H9疫苗效果的影响,采用单因素分组设计,选用1 200只1日龄雏鸡,随机分为6组,生地提取物添加组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组)分别在基础日粮中添加1‰、2‰、3‰生地提取物,黄芪多糖组(Ⅳ组)在基础日粮中添加0.4‰黄芪多糖,免疫不给药组(Ⅴ组)免疫H9疫苗并饲喂基础日粮,空白组(Ⅵ组)不免疫H9疫苗并饲喂基础日粮,药物添加期为7d,分别在雏鸡14、21、28、35、42、49、56日龄进行采样,测定鸡群的H9抗体水平,计算法氏囊和脾脏的脏器指数。结果显示:1与Ⅵ组相比,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组均能显著提高雏鸡脾脏和法氏囊指数(P<0.05),促进雏鸡的脾脏和法氏囊的生长发育,其中,Ⅱ组(2‰生地提取物)的脾脏指数和法氏囊指数较Ⅰ、Ⅲ组显著提高(P<0.05),且Ⅱ组与Ⅳ组无显著差异(P>0.05)。2黄芪多糖和生地提取物的添加可提高雏鸡血清禽流感疫苗抗体效价并且使H9抗体维持在较高水平(log2),从42日龄起,Ⅱ组的抗体滴度显著高于Ⅰ、Ⅲ组(P<0.05),同时与Ⅳ组无显著差异(P>0.05)。综上所述,生地提取物具有促进雏鸡的脾脏和法氏囊发育的作用,配合H9疫苗使用,可以维持抗体处于较高滴度,建议生地提取物在雏鸡日粮中的添加剂量以2‰为宜。

无针皮内注射免疫甲型H7N9流感裂解疫苗的免疫效果评价

目的开展无针皮内注射免疫甲型H7N9裂解流感疫苗的安全性及有效性评价,为无针注射免疫疫苗提供实验依据。方法采用无针皮内注射H7N9裂解流感疫苗免疫小鼠和大鼠,并用有针肌肉注射免疫做对照,通过活体成像技术观察疫苗的分布情况,并采用血疑抑制试验测定疫苗免疫后的血清中和抗体效价、滴鼻攻毒评价免疫保护及DRAIZE评分与病理检测注射损伤情况。结果无针皮内注射免疫疫苗在真皮内呈池状分布,且疫苗驻留时间明显长于在肌肉层的驻留时间。无针皮内免疫3μg抗原的甲型H7N9流感裂解疫苗可起到肌肉免疫15μg抗原的同样血清学保护水平及免疫保护效果。结论无针皮内注射免疫甲型H7N9裂解流感疫苗安全、有效,且抗原用量是有针肌肉注射免疫抗原用量的1/5量,将为流感疫苗免疫防控提供新的技术策略。

囊素肽对禽流感(H9N2)油乳剂灭活疫苗免疫效果的影响

为研究囊素肽对禽流感(H9N2)油乳剂灭活疫苗免疫效果的影响,将200只鸡分为疫苗组、疫苗+囊素组、囊素组和对照组,每组50只。从13日龄起每7 d测定其法氏囊指数、禽流感(H9)HI抗体水平。结果表明:囊素肽能提高禽流感(H9N2)油乳剂灭活疫苗免疫后的抗体水平,并延长高水平抗体的维持期,能显著地促进法氏囊的生长发育。

左旋咪唑影响流感灭活疫苗(H9N2)抗体滴度

为了研究不同剂量的左旋咪唑对鸡流感病疫苗免疫效果的影响,将20只17日龄雏鸡,随机分成A、B、C、D四组,每组5只。分别皮下注射H9N2灭活疫苗0.5ml/羽,同时给试验组A(0.6mg)、B(0.3mg)、C(0.15mg)剂量的左旋咪唑,D组注射生理盐水作为对照。免疫后0、7、14、21和28天,翅下静脉采血检测抗H9N2亚型禽流感病毒抗体滴度。结果表明,给药组的抗体水平都明显高于对照组;不同给药剂量的组别的抗体水平也存在差别,0.6mg、0.3mg剂量组鸡只平均抗体水平基本一致,却明显低于0.15mg的低剂量组。这表明左旋咪唑影响H9N2流感病毒疫苗抗体滴度,低剂量(0.15mg)添加左旋咪唑,可提高疫苗的抗体水平。

生地提取物对接种H9亚型禽流感疫苗雏鸡非特异性免疫功能的影响

本试验旨在研究生地提取物对雏鸡非特异性免疫功能的影响,采用单因素分组设计,选用1日龄雏鸡随机分为6组饲喂基础日粮,于14日龄接种H9亚型禽流感疫苗,每组分别给予以下处理：生地提取物添加组（Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组）,分别在基础日粮中添加1、2、3g/L生地提取物;黄芪多糖组（Ⅳ组）,在基础日粮中添加0.4mL/L黄芪多糖;免疫不给药组（Ⅴ组）,接种H9亚型禽流感疫苗并饲喂基础日粮,空白组（Ⅵ组）,不免疫H9亚型禽流感疫苗只饲喂基础日粮。药物添加期为7d,对鸡群在14、21、28、35、42、49、56日龄进行心脏采血,进行白细胞计数、溶菌酶以及IFN-α、TNF-α含量测定。结果表明,在7周采样周期内,与空白组相比,黄芪多糖和生地提取物的添加能不同程度的促进雏鸡白细胞的增殖,提高溶菌酶和IFN-α、TNF-α的含量（P〈0.05）。其中,中药添加组（Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组）较空白组（Ⅵ组）的白细胞数目有显著增加（P〈0.05）,而中剂量组（Ⅱ组）与黄芪组（Ⅳ组）无显著差异（P〉0.05）,35日龄时中剂量组和黄芪组较高、低剂量组（Ⅰ组）能显著增加雏鸡溶菌酶和TNF-α的含量（P〈0.05）,14日龄~28日龄,生地提取物中剂量组和高剂量组与黄芪组的IFN-α含量无显著差异（P〉0.05）,与空白组（Ⅵ组）差异显著（P〈0.05）。综上所述,生地提取物具有增强雏鸡非特异性免疫功能的作用,可以作为一种新型的免疫增强剂,建议生地提取物在雏鸡日粮中的添加剂量以2g/L为宜。

不同攻毒剂量对评估H9亚型禽流感疫苗免疫效果的影响

为了解不同攻毒剂量对评估H9亚型禽流感疫苗免疫效果的影响,本研究选取禽流感病毒(AIV)CK/Hu N/174/08和CK/Hu B/S4196/09株制备成灭活疫苗免疫21日龄SPF鸡,免疫后采血检测血凝抑制(HI)抗体,免疫后3周时分别采用这两株亲本病毒经鼻腔途径攻毒。HI抗体测定结果显示:两株疫苗免疫21 d时,平均HI抗体滴度均可达10 log2以上,表明这两株病毒均具有良好的免疫原性。测定每0.1 mL CK/Hu N/174/08株病毒EID_(50)和CID_(50)分别为10^(-9.25)和10^(-3.88),CK/Hu B/S4196/09株为10^(-8.68)和10^(-5.38)。分别以10~6 EID_(50)、10 CID_(50)及10~2 CID_(50)剂量攻毒,CK/Hu N/174/08株和CK/Hu B/S4196/09株疫苗对亲本病毒株攻击的保护率分别为100%和0、100%和80%与60%和0,表明依据EID_(50)和CID_(50)攻毒,CK/Hu N/174/08株疫苗可以得出免疫保护效果一致的结论,而CK/Hu B/S4196/09株疫苗免疫保护效果不一致。本研究表明,EID_(50)和CID_(50)均可以作为H9亚型禽流感疫苗攻毒剂量的参考依据,但以CID_(50)为依据更可靠;10 CID_(50)是最佳的攻毒剂量。本研究为科学评价H9亚型禽流感疫苗的攻毒保护效果提供了依据,对于研制疫苗时选择种毒株以及临床上选用有效疫苗均具有指导意义。

禽流感病毒H9亚型灭活油乳剂疫苗的免疫试验

以低致病性禽流感病毒 (AIV)H9N2亚型株的鸡胚适应毒经尿囊腔接种 1 0日龄鸡胚 ,从2 4h后死亡胚及 96h后 4℃致冷死亡胚收集尿囊液。尿囊液的血凝价约 7log2 ,每毫升约含 1 0 8 6个ELD50 的病毒。将尿囊液经 0 1 %福马林灭活后 ,用超滤器将尿囊液浓缩 5倍后分别制成双联灭活疫苗。对 4周龄SPF鸡肌肉注射 0 5ml或 0 3ml单联H9亚型AIV灭活苗 ,在接种后 2、3、4、5周后 ,血清中对H9亚型AIV的血凝抑制 (HI)抗体效价分别是 5 1、7 2、8 3、1 0log2 或 3 8、6 5、6 3、8 3log2 。注射 0 5ml的H9亚型AIV和NDV二联油乳苗的鸡 ,在接种后 2、3、4、5周对H9亚型AIV及Lasota株NDV的HI滴度分别是 4 6、5 6、6 7、8log2 及 7、7 6、6 7、7log2 。显然 。

禽流感H9灭活疫苗免疫蛋鸡试验研究

为了研究禽流感H9油乳剂灭活疫苗对蛋鸡的免疫效果,从而更好地预防禽流感,本试验对接种2次禽流感H9油乳剂灭活疫苗鸡群与未接种疫苗的鸡群进行抗体效价对比,结果显示接种2次的鸡群高抗体的水平可持续多天,未接种的鸡群抗体效价上升和下降的幅度不大,甚至到后期趋于下降。因此禽流感H9油乳剂灭活疫苗对预防蛋鸡禽流感有显著效果。

禽流感H_9亚型油乳剂灭活疫苗的改进

用新引进的 6株禽流感病毒 (AIV )H9亚型和现制苗用的AIV H9毒株分别制备AIV H9、AIV H5、NDV二联三价油乳剂灭活疫苗 ,免疫 5日龄和 10日龄雏鸡 ,于免疫当日直至 80日龄鸡出栏期间定期采血 ,用HI法检测相应的AIV H9、AIV H5和NDV抗体。结果表明 ,10日龄免疫鸡的AIV H9抗体效价最高 ,5日龄和 10日龄免疫鸡的AIV H5抗体效价差别不明显 ;用引进的 3号AIV H9毒株制备的联苗对 10日龄雏鸡免疫后 2 0d产生AIV H9保护性抗体 ,一直持续到 80日龄以上 ,期间的抗体平均效价为 6 .72 (lb) ,而现制苗用的AIV H9毒株制备的联苗免疫力较差 ;现制苗用的AIV H5毒株制备的联苗免疫效力仍较好 ;分别接种 0 .2 5、0 .30mL/只联苗的雏鸡AIV H5抗体效价没有明显差别 ,而AIV H9抗体效价以接种 0 .30mL/只剂量的为高 ;不同日龄、不同免疫剂量的试验鸡NDV抗体效价没有明显差异。

人用H7N9疫苗的研究进展

2013年3月,在中国首次出现低致病性H7N9病毒感染者并致死的病例。迄今为止,中国共出现5次H7N9病毒流行的疫情。其间,H7N9病毒不断发生变异,新的基因型以及高致病性H7N9病毒相继出现。变异的H7N9病毒对禽类养殖业和人类的公共卫生造成了严重的威胁,疫苗是预防H7N9病毒流行的有效措施。目前,全世界尚无临床可用的人用H7N9疫苗,但各类备选H7N9疫苗都在研究中,如灭活疫苗、减毒疫苗、亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗、核酸疫苗和病毒载体疫苗等。其中,一些H7N9疫苗已进入临床研究阶段。现对各类人用H7N9疫苗的研究进展作一概述。

肉鸽使用H_9亚型禽流感疫苗免疫效果和生产性能变化分析

为了解肉鸽使用H_9亚型禽流感疫苗前后免疫效果和生产性能的变化,随机采集600份未免血样和2600份免疫血样,开展H_9亚型禽流感疫苗免疫前后抗体检测,并对种鸽免疫前后生产性能进行调查比较。结果:未免鸽群H_9亚型禽流感抗体阳性率16.6%,H_9亚型禽流感疫苗免疫抗体群体合格率95.2%,免后的鸽群健康状况和生产性能都比免前好。

重组鸡白细胞介素2对H9亚型禽流感灭活疫苗的免疫增效作用研究

为研究重组鸡白细胞介素2对体液免疫的影响,将600只7日龄海兰褐蛋鸡随机分为2组,试验组在H9亚型禽流感灭活疫苗免疫同时使用重组鸡白细胞介素2注射液,对照组只进行H9亚型禽流感灭活疫苗的免疫。试验组与对照组鸡群分别于免疫后0、7、14、21、28、35 d进行鸡H9亚型禽流感病毒HI抗体的检测,并统计分析各组抗体效价的差异性。结果表明:试验组HI抗体效价均高于对照组,且在免疫后7 d试验组与对照组HI抗体效价差异极显著(P<0.01),免疫后14 d、21 d试验组与对照组HI抗体效价差异显著(P<0.05),试验组保护性抗体提前一周产生且抗体高峰提前一周到达。

皖西白鹅免疫H9亚型禽流感疫苗的效果及生产性能分析

为了解皖西白鹅使用H9亚型禽流感疫苗免疫效果和生产性能的变化,随机采集1 200份血样,开展H9亚型禽流感疫苗免疫抗体检测,并对种鹅生产性能进行调查。结果显示,H9亚型禽流感疫苗免疫抗体群体合格率94.3%,免疫后的鹅群健康状况和生产性能都比免疫前好。

H5N1Re-5株和H9亚型SS株对土三黄鸡的免疫效果对比

[目的]探究H5N1Re-5株和H9亚型SS株对土三黄鸡不同的免疫效果。[方法]选用广西桂林市某种鸡场土三黄鸡180只,试验组注射禽流感H5和H9疫苗,对照组不注射疫苗,检测145日龄注射H5和H9疫苗后的抗体水平。[结果]禽流感H5疫苗145日龄注射后第170日龄抗体检测:试验1、2组分别比各自对照组的平均抗体值比较差异达0.01极显著水平;禽流感H9疫苗145日龄注射后第170日龄抗体检测:试验1、2组分别比各自对照组的平均抗体值比较差异不显著。[结论]禽流感H5疫苗145日龄注射后能显著地提高抗体水平;禽流感H9疫苗145日龄注射后不能显著地提高抗体水平。

肉鸽免疫禽流感灭活疫苗(H9亚型SS株)的效果观察

随机选取一月龄以上肉鸽,进行分组隔离试验,按0.2、0.3、0.4、0.5、1.0、1.5、2.0mL不同免疫剂量,采用一次免疫和二次免疫的方式,注射禽流感灭活疫苗(H9亚型SS株)。第一次免后14d开始采血,以后每周采血一次,连续采血2个月,检测H9亚型禽流感抗体效价。结果显示:肉鸽免疫H9疫苗后,一次免疫0.3mL、二次免疫0.2mL就有较好的免疫效果。

H7N9亚型禽流感免疫程序研究初报

研究采用H7N9亚型禽流感油乳剂灭活疫苗,对番鸭、鸭、麻鸭、水鸭、鹅等5种小水禽和小鸡开展首免日龄、免疫时间、免疫次数等免疫程序主要要素的研究,以HI抗体水平、CD4/CD8细胞变化情况,以及白细胞介素1、白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素6及肿瘤坏死因子变化情况的检测数值作为评价指标。研究结果表明,所用疫苗和程序能够诱导番鸭、鸭、麻鸭、水鸭、鹅等水禽和鸡产生明显的免疫应答反应,试验家禽在2周龄左右作首次接种,剂量为0.3m L/只,3周龄加强免疫一次,剂量为0.6 m L/只,二次免疫1-2周后,相应HI抗体可以达到4-5 log2以上,其他免疫指标也可达到较为理想的水平。现将研究基本情况初步报告如下,谨供参考。

肉鸡与蛋鸡H5、H7、H9亚型禽流感病毒抗体水平调查

为了解养殖场家禽中H5、H7、H9亚型禽流感病毒抗体水平,通过血清学调查,应用血凝抑制试验(HI)的方法,对四川内江、山东济南、河南鹤壁、江苏扬州4个定点实验观测站负责的养殖场的鸡血液样本进行禽流感病毒抗体分析,其中包含2个肉鸡场和3个蛋鸡场。研究发现蛋鸡场通常免疫了H5、H7、H9(或H5与H9)亚型禽流感疫苗,而肉鸡场只免疫了H9亚型禽流感疫苗;蛋鸡场和肉鸡场都存在免疫禽流感疫苗后抗体水平低和无抗体产生的情况,从而导致免疫不合格或免疫失败。以上结果表明,应加强家禽养殖场对不同亚型禽流感疫苗的免疫以及免疫后的禽流感病毒抗体水平监测,以防免疫失败,从而预防禽流感的发生和流行。

免疫增强剂提高禽流感疫苗效力的研究

为评价免疫增强剂（VA5）对鸡的免疫效力,将不同剂量免疫增强剂与H9禽流感抗原混合后制备疫苗,评价对SPF鸡的免疫效力.根据筛选结果,将最适剂量的免疫增强剂与H9禽流感抗原以共同混合的形式配制疫苗,并将免疫增强剂以伴侣形式与H5或H9禽流感疫苗混匀免疫商品鸡,评价免疫增强效果.结果表明,免疫增强剂与H9疫苗共同混匀,或将免疫增强剂制备成疫苗伴侣形式与H5或H9商品疫苗共同混合免疫商品鸡,均能使H5或H9疫苗免疫后抗体提前1周达到7lg2,免疫后2～3周抗体效价显著高于不含免疫增强剂的常规疫苗组.该免疫增强剂能提高H5和H9亚型禽流感疫苗对鸡的免疫效力,具有较好的应用前景.

H7N9亚型流感疫苗诱导的神经氨酸酶抑制抗体检测方法的建立

目的建立酶联凝集素测定法(enzyme-linked lectin assay,ELLA)检测接种流感疫苗志愿者血清中神经氨酸酶抑制(neuraminidase inhibition,NI)抗体。方法对神经氨酸酶切底物、酶标抗体孵育浓度和时间、最适病毒量以及病毒稀释液pH值等反应条件进行优化,确定合适的反应体系,采用建立的方法检测对接种H7N9大流行流感疫苗34名志愿者血清样本进行检测。结果胎球蛋白作为酶切底物最佳包被浓度为7.5μg/ml;酶标抗体最佳稀释度为1∶500,H7N9疫苗株作为抗原使用pH6.5的稀释液稀释至浓度4.5lgCCID50/ml。疫苗接种后血清样本抗N9型NI抗体滴度较接种前均有显著增高(P<0.001),在34名志愿者中,47%的人NI抗体接种后呈阳性反应(NI抗体滴度≥40),低于HI抗体反应阳转率(P<0.05)。结论建立的基于天然底物检测NI抗体的ELLA法简单实用,为流感疫苗和血清流行病学NI抗体免疫评价体系的建立提供实验资料。

流感病毒H7N9型裂解疫苗动物安全性评价

目的对流感病毒H7N9型裂解疫苗进行动物局部安全性评价。方法家兔肌肉刺激试验:家兔后肢股四头肌im 0.5m L流感病毒H7N9型裂解疫苗,每天给药1次,连续给药2 d,末次给药后48 h和第25天对注射部位进行肉眼和病理组织学检查。豚鼠全身主动过敏试验:豚鼠后肢隔日im 0.5 m L流感病毒H7N9型裂解疫苗,连续注射3次,于末次致敏后第14天iv给予1.0 m L的流感病毒H7N9型裂解疫苗进行激发,观察豚鼠30 min内是否出现过敏反应。急性毒性试验:小鼠后肢im 0.2 m L流感病毒H7N9型裂解疫苗,给药1次后观察小鼠的不良反应情况。结果流感病毒H7N9型裂解疫苗可导致注射部位肌肉出现局灶性炎细胞浸润,肌间质细胞增生,条索状化脓灶,停药25 d后,上述病变消失。流感病毒H7N9型裂解疫苗豚鼠过敏反应发生率为67%,25 min内恢复正常,过敏反应评价为弱阳性到阳性;小鼠急性毒性试验未见异常。结论流感病毒H7N9型裂解疫苗安全性良好,不影响其临床使用。