期刊文献+
共找到124篇文章
< 1 2 7 >
每页显示 20 50 100
H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白在水稻胚乳中的表达及其纯化
1
作者 屈小天 王雅楠 +4 位作者 许倩茹 李雪洋 张申立 张二芹 张改平 《河南农业科学》 北大核心 2024年第3期125-132,共8页
为制备H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白并评估其免疫原性,利用水稻表达系统表达H5N1亚型禽流感病毒重组HA蛋白。首先构建了重组植物表达载体pCAMBIA1300-HA,该载体具有GT13特有启动子、信号肽SP和终止子,有利于外源基因在水稻中表达。之后将... 为制备H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白并评估其免疫原性,利用水稻表达系统表达H5N1亚型禽流感病毒重组HA蛋白。首先构建了重组植物表达载体pCAMBIA1300-HA,该载体具有GT13特有启动子、信号肽SP和终止子,有利于外源基因在水稻中表达。之后将重组质粒pCAMBIA1300-HA通过电转化法导入根癌农杆菌EHA105中,筛选出阳性菌落并侵染水稻愈伤组织。经过暗培养、潮霉素筛选、分化、生根、成苗,采用CTAB法提取水稻叶片DNA,PCR鉴定结果显示,HA基因已插入到水稻基因组中,重组HA基因大小为4660 bp。将阳性植株移植到大田中,4个月后收获水稻种子,提取水稻胚乳蛋白,Western blot鉴定结果表明,HA蛋白在水稻胚乳中成功表达。重组HA蛋白通过Q阴离子层析、疏水层析和凝胶过滤层析三步分离纯化,其纯度达到90%以上。最后将纯化后的重组HA蛋白与ISA 50V佐剂混合并乳化制成疫苗,免疫小鼠,小鼠血清具有较高的特异性抗体水平,表明重组HA蛋白免疫原性较好。综上,成功构建了H5N1亚型禽流感病毒HA重组蛋白的水稻表达系统,并分离纯化获得了高纯度和免疫原性良好的重组HA蛋白。 展开更多
关键词 H5N1亚型禽流感病毒 ha蛋白 水稻胚乳表达 蛋白质纯化
下载PDF
共表达膜结合型与可溶性H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒的构建及免疫效果评价
2
作者 吕亚迪 杨洁 +2 位作者 谢文婷 徐婷 陈瑞爱 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2123-2134,共12页
旨在构建能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒,有望开发抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗,为控制H9N2 AIV和NDV提供新的防御思路,对NDV疫苗载体的构建和优化有重要的参考意义。利用反向遗传技术,以rDHN3-mF... 旨在构建能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒,有望开发抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗,为控制H9N2 AIV和NDV提供新的防御思路,对NDV疫苗载体的构建和优化有重要的参考意义。利用反向遗传技术,以rDHN3-mF为骨架,在病毒基因组的P和M之间的非编码区插入全长膜结合HA和另外一个带有截短跨膜结构域的可溶性HA蛋白,获得了能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的基因Ⅶ型NDV减毒株重组病毒rDHN3mF-HA和rDHN3mF-2HA。通过鸡胚接种、Western blot、血凝效价(HA)及平均鸡胚致死时间(MDT)等试验来检测重组病毒的稳定性以及生物学特性,将重组病毒以10~6 EID_(50·)只^(-1)剂量免疫7日龄SPF鸡并测定血凝抑制(HI)抗体,在免疫后28 d对各组进行攻毒保护试验。结果显示:重组病毒在鸡胚中连续传至十五代后HA基因无突变发生;Western blot证明重组病毒可稳定高效地表达特异性的HA蛋白;重组病毒的生长曲线说明了重组病毒与亲本毒株具有相似的复制特性和低毒力特征;重组病毒免疫组的SPF鸡均能产生针对NDV或者H9N2 AIV的特异性HI抗体;攻毒保护试验结果:重组病毒均能对攻毒后的鸡产生100%保护效果;喉、肛拭子检测结果说明重组病毒可显著减少NDV与H9N2 AIV的体外排毒;气管与肺qPCR检测结果显示攻毒后3 d, rDHN3mF-2HA较rDHN3mF-HA更显著地降低了脏器中H9N2 AIV含量。本研究成功构建了共表达膜结合型与可溶性H9N2亚型禽流感HA蛋白的基因Ⅶ型重组NDV,为H9N2 AIV和NDV的一种新型重组基因工程二联活载体疫苗的研制与应用奠定了基础。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 ha蛋白 新城疫病毒 免疫原性 载体疫苗 免疫保护效率
下载PDF
缺氧状态下has-miR-215-5p通过抑制BLCAP的表达调控子宫内膜腺上皮细胞增殖和迁移
3
作者 张婉玉 王含必 邓成艳 《生殖医学杂志》 CAS 2024年第4期494-500,共7页
目的探究缺氧状态下的子宫内膜腺上皮细胞(EEC)增殖和迁移的可能机制。方法分别提取缺氧(1%氧浓度,缺氧组)和常氧(21%氧浓度,常氧组)条件下EEC的RNA进行高通量测序(RNA-sequence),分析两组细胞中微小RNA(microRNA,miRNA)的差异表达。利... 目的探究缺氧状态下的子宫内膜腺上皮细胞(EEC)增殖和迁移的可能机制。方法分别提取缺氧(1%氧浓度,缺氧组)和常氧(21%氧浓度,常氧组)条件下EEC的RNA进行高通量测序(RNA-sequence),分析两组细胞中微小RNA(microRNA,miRNA)的差异表达。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)的方法对差异表达的miRNA即has-miR-215-5p进行鉴定,通过miRNA靶基因数据库网站(Target Scan)分析has-miR-215-5p的靶基因。Western Blot检测两组细胞中靶基因膀胱癌相关蛋白(BLCAP)的蛋白表达水平,细胞计数实验检测两组EEC的增殖情况,划痕实验检测两组EEC的迁移能力。结果测序结果显示,缺氧组EEC中has-miR-215-5p表达显著上升(P<0.001),RT-qPCR验证结果与测序结果一致。miRNA Target Scan数据库检索结果显示,BLCAP是has-miR-215-5p的下游靶基因,双荧光素酶报告基因实验结果显示has-miR-215-5p与BLCAP-3’-UTR结合,结合位点突变后结合活性消失。Western Blot结果显示,与常氧组相比,缺氧组EEC中的BLCAP蛋白表达显著下降(P<0.001)。CCK-8及划痕实验分别提示与常氧组相比,缺氧组的EEC增殖能力显著降低、迁移能力显著增强(P<0.001)。结论缺氧条件下EEC中has-miR-215-5p可能通过与BLCAP-3’-UTR结合,抑制BLCAP的表达活性,导致EEC的增殖降低与迁移增强。 展开更多
关键词 子宫内膜腺上皮细胞 缺氧 has-miR-215-5p 膀胱癌相关蛋白 细胞增殖 细胞迁移
下载PDF
Structure modeling and spatial epitope analysis for HA protein of the novel H1N1 influenza virus 被引量:2
4
作者 WU Di XU TianLei +29 位作者 SUN Jing DAI JianXin DING GuoHui HE YunGang ZHOU ZhengFeng XIONG Hui DONG Hui JIN WeiRong BIAN Chao JIN Li WANG HongYan WANG XiaoNing YANG Zhong ZHONG Yang WANG Hao CHE XiaoYan HUANG Zhong LAN Ke SUN Bing WU Fan YUAN ZhenAn ZHANG Xi ZHOU XiaoNong ZHOU JiaHai MA ZhiYong TONG GuangZhi GUO YaJun ZHAO GuoPing LI YiXue CAO ZhiWei 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2009年第13期2171-2173,共3页
In recent months,a novel influenza virus H1N1 broke out around the world.With bioinformatics technology,the 3D structure of HA protein was obtained,and the epitope residues were predicted with the method developed in ... In recent months,a novel influenza virus H1N1 broke out around the world.With bioinformatics technology,the 3D structure of HA protein was obtained,and the epitope residues were predicted with the method developed in our group for this novel flu virus.58 amino acids were identified as potential epitope residues,the majority of which clustered at the surface of the globular head of HA protein.Although it is located at the similar position,the epitope of HA protein for the novel H1N1 flu virus has obvious differences in the electrostatic potential compared to that of HA proteins from previous flu viruses. 展开更多
关键词 禽流感病毒 抗原表位 A蛋白 结构建模 和空间 生物信息学技术 三维结构 残留物
原文传递
Study on Acute Toxicity of Purified Protein HAS1 Expression in KM Mice 被引量:1
5
作者 Guoru XIONG Gengfeng ZHAO +2 位作者 Jungang WANG Guilan XING Shuzhen ZHANG 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2019年第4期69-71,共3页
[Objectives]The antifungal protein HAS1 newly obtained was evaluated for acute toxicity safety in KM mice according to relevant national regulations,so as to eliminate people s concerns about the safety of transgenic ... [Objectives]The antifungal protein HAS1 newly obtained was evaluated for acute toxicity safety in KM mice according to relevant national regulations,so as to eliminate people s concerns about the safety of transgenic plants.[Methods]The acute toxicity of the purified protein HAS1 was observed by intragastric administration of mice,and the poisoning symptoms,poisoning degree,recovery and death were observed.[Results]No abnormal toxicity symptoms were observed in the test group,the vehicle control group and the blank control group.The main tissues and organs were not abnormal in gross anatomy.The average body weight of each group showed an increasing trend compared with before administration at 1,3,7,11 and 14 d after administration.It was found that after giving the purified protein HAS1 to KM mice at a cumulative dose of 64 mg/kg a day,no obvious toxicity was observed in the acute toxicity test,indicating that the test substance was non-toxic by oral administration.[Conclusions]This study provides a basis for further use of the protein and its coding genes. 展开更多
关键词 BACILLUS SUBTILIS haS Purified protein haS1 KM mice TOXIC reaction
下载PDF
稳定表达H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白的293T细胞株构建及应用 被引量:2
6
作者 曹永忠 邓婧 +2 位作者 黄雅 薄宗义 胡增垒 《中国家禽》 北大核心 2023年第10期59-64,共6页
为获得用于评价H7N9亚型禽流感疫苗诱导的抗体Fc免疫效应的靶细胞,研究采用慢病毒包装与感染技术构建一株稳定表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)HA蛋白的细胞株,并以该细胞株为靶细胞建立H7N9亚型禽流感疫苗免疫血清补体介导的细胞毒(AD... 为获得用于评价H7N9亚型禽流感疫苗诱导的抗体Fc免疫效应的靶细胞,研究采用慢病毒包装与感染技术构建一株稳定表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)HA蛋白的细胞株,并以该细胞株为靶细胞建立H7N9亚型禽流感疫苗免疫血清补体介导的细胞毒(ADCML)活性的检测方法。结果显示成功包装了一株重组慢病毒,滴度可达108 FU/mL;构建了稳定表达H7N9 AIV HA蛋白的293T细胞株,HA蛋白主要在细胞膜上表达。基于新城疫病毒(NDV)载体的H7N9亚型禽流感疫苗免疫鸡后,诱导产生的HA结合性IgG抗体滴度为2180。以稳定细胞株为靶细胞,载体疫苗血清诱导的细胞死亡水平显著高于空载体与未免疫鸡血清(P<0.001);补体灭活后,载体疫苗血清诱导的细胞死亡水平显著降低(P<0.001)。研究表明,基于NDV载体的H7N9亚型禽流感疫苗免疫鸡血清具有较强的ADCML活性,稳定表达H7N9 AIV HA蛋白的细胞株可作为评价H7N9亚型禽流感疫苗免疫血清Fc免疫效应的靶细胞。 展开更多
关键词 H7N9亚型禽流感 ha蛋白 稳定细胞株 疫苗 Fc免疫效应 补体 抗体保护
下载PDF
H5亚型禽流感病毒HA蛋白在杆状病毒-昆虫细胞系统中的表达与纯化
7
作者 刘郁夫 陈晓洁 +3 位作者 区炳明 容芳 郝文茜 陈瑞爱 《动物医学进展》 北大核心 2023年第10期19-24,共6页
为表达H5亚型禽流感病毒HA蛋白研制亚单位疫苗,构建了pFastBAC-HA重组质粒,转化至DH10Bac感受态细胞,获得重组HA基因的杆状病毒质粒,再将重组杆状病毒质粒转染至Sf9细胞,拯救重组病毒,通过间接免疫荧光和Western blot试验对Sf9细胞中表... 为表达H5亚型禽流感病毒HA蛋白研制亚单位疫苗,构建了pFastBAC-HA重组质粒,转化至DH10Bac感受态细胞,获得重组HA基因的杆状病毒质粒,再将重组杆状病毒质粒转染至Sf9细胞,拯救重组病毒,通过间接免疫荧光和Western blot试验对Sf9细胞中表达的HA蛋白进行鉴定。结果表明表达的重组HA蛋白均能与抗Strep标签抗体、H5亚型禽流感病毒阳性血清(Re-11株)特异性结合,且HA重组蛋白在昆虫细胞中以细胞分泌上清的形式表达,红细胞凝集效价为1∶64,利用链霉素亲和层析的方法,纯化重组HA蛋白,纯化后HA蛋白浓度为0.364 mg/mL。试验结果可为禽流感病毒亚单位疫苗研制、HA蛋白单克隆抗体制备提供前期基础。 展开更多
关键词 H5亚型禽流感病毒 ha蛋白 杆状病毒 蛋白表达
下载PDF
Identification of In-intro Antagonistic Activity of HAS1 Protein against Sporisorium scitanminea 被引量:2
8
作者 Huiqing LIU Yuantao HUANG +3 位作者 Mengyu DAI Yimin QIU Gengfeng ZHAO Guoru XIONG 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2018年第6期9-11,15,共4页
Sugarcane smut greatly influences yield and quality of sugarcane.HAS1 gene in biocontrol strain HAS antagonistic to Sporisorium scitanminea was selected for prokaryotic expression vector construction and inducible exp... Sugarcane smut greatly influences yield and quality of sugarcane.HAS1 gene in biocontrol strain HAS antagonistic to Sporisorium scitanminea was selected for prokaryotic expression vector construction and inducible expression,and the antagonistic effect of HAS1 protein was detected in vitro.The results showed that the expression product of antifungal HAS1 gene obtained through prokaryotic expression vector construction and inducible expression had better antagonistic effect against S.scitanminea.This study provides an experimental basis for further utilization of this protein. 展开更多
关键词 BACILLUS SUBTILIS haS Sporisorium scitanminea PROKARYOTIC expression ANTIFUNGAL protein
下载PDF
Skin Anaphylaxis Test of Purified Protein HAS1 in Cavies
9
作者 Guoru XIONG Gengfeng ZHAO +2 位作者 Jungang WANG Guilan XING Shuzhen ZHANG 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2019年第5期73-75,共3页
The antifungal protein HAS1 is a new antifungal protein isolated from the genome of Bacillus subtilis HAS,which has a good inhibitory effect on various pathogenic fungi in sugarcane.This study aimed at evaluating the ... The antifungal protein HAS1 is a new antifungal protein isolated from the genome of Bacillus subtilis HAS,which has a good inhibitory effect on various pathogenic fungi in sugarcane.This study aimed at evaluating the immunological transfer reaction of the test sample through repeated skin contact by observing whether the cavy skin repeatedly exposed to purified protein HAS1 suffers from allergic reaction and how strong is the allergic reaction.The results showed that the test group and the vehicle control group exhibited no allergic reaction in the skin immediately and at 24,48 and 72 h and had an mean reaction score and a sensitization rate both of 0,so the results of the naked eye observation were both nonallergenic to cavy skin;and in the positive control group,the cavies were observed to be highly sensitized immediately after removing the drug,mildly sensitized at 24 h,and not sensitized at 48 and 72 h,which meant the skin allergy was alleviated with the observation time.It is suggested that the purified protein HAS1 is negative for cavy skin anaphylaxis test (nonallergenic to cavy skin),which provides an experimental basis for further utilization of the protein and its coding gene. 展开更多
关键词 SACChaRUM officinarum L. BACILLUS SUBTILIS haS Purified protein haS1 Cavies ANAPHYLAXIS
下载PDF
H7亚型禽流感病毒HA蛋白在Sf9中的表达与纯化
10
作者 刘郁夫 郝文茜 +2 位作者 冯美莹 欧阳征亮 陈瑞爱 《广东农业科学》 CAS 2023年第10期149-156,共8页
【目的】真核表达H7亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)HA蛋白,为进一步制备H7亚型HIV亚单位疫苗,评价其免疫原性提供基础。【方法】首先根据草地贪夜蛾卵巢细胞(Spodoptera frugiperda clone 9,Sf9)的密码子偏嗜性,优化并合成H... 【目的】真核表达H7亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)HA蛋白,为进一步制备H7亚型HIV亚单位疫苗,评价其免疫原性提供基础。【方法】首先根据草地贪夜蛾卵巢细胞(Spodoptera frugiperda clone 9,Sf9)的密码子偏嗜性,优化并合成H7亚型AIV的HA序列,将其克隆至穿梭质粒pFastBac1中;接着将重组HA基因的杆状病毒质粒转染至Sf9中,通过间接免疫荧光和Westernblots试验鉴定重组病毒是否拯救成功;再通过SYBRgreen染料法荧光定量PCR试验,建立基于gp64基因的杆状病毒qPCR定量方法,筛选出在Sf9中表达HA重组蛋白的最佳感染复数和孵育时间;最后通过His镍株亲和纯化HA重组蛋白。【结果】表达H7亚型AIV HA蛋白的重组杆状病毒在Sf9盲传3代后,Sf9开始出现肿胀、脱落、死亡等细胞病变,表明重组杆状病毒拯救成功;通过间接免疫荧光和Western blots试验发现,Sf9内出现可与HA重组蛋白特异性结合的绿色荧光信号,特异性结合的HA重组蛋白条带大小约70 kD左右,与预期相符,且HA重组蛋白可与H7亚型AIV阳性血清反应,表明HA重组蛋白表达成功;以构建的pUC19-gp64质粒为标准,建立基于gp64基因的杆状病毒qPCR检测方法,该方法在1×103~1×108 copy/μL间呈现良好的线性关系,标准曲线的相关系数R2=0.993;利用qPCR检测方法对杆状病毒液滴度进行定量,并通过Western blots试验筛选HA蛋白表达的最佳感染复数和孵育时间,结果显示以10MOI的比例接种Sf9,孵育72h,蛋白表达效果最好;通过His镍株亲和纯化HA重组蛋白,蛋白浓度为0.268mg/mL,鸡红细胞凝集效价为4log2。【结论】本试验在Sf9中成功表达并纯化H7亚型AIVHA蛋白,并建立与之相应的杆状病毒荧光定量PCR检测方法,可为进一步评价H7亚单位疫苗的免疫原性提供参考。 展开更多
关键词 H7亚型禽流感病毒 血凝素蛋白(ha) 昆虫细胞 杆状病毒 基因表达 蛋白纯化
下载PDF
表达H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白重组新城疫病毒的构建以及密码子优化的HA免疫增强作用 被引量:3
11
作者 陈曦 于桂梅 +4 位作者 刘景利 王金良 姜永萍 葛金英 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期585-589,共5页
为构建表达H5N1亚型禽流感病毒(AIV)HA蛋白重组新城疫病毒(NDV)及比较密码子优化的HA免疫增强作用,本研究利用NDV LaSota弱毒疫苗株的反向遗传操作系统,分别构建了表达野毒型H5N1亚型AIV HA蛋白和密码子优化的HA蛋白的重组NDV,并分别命... 为构建表达H5N1亚型禽流感病毒(AIV)HA蛋白重组新城疫病毒(NDV)及比较密码子优化的HA免疫增强作用,本研究利用NDV LaSota弱毒疫苗株的反向遗传操作系统,分别构建了表达野毒型H5N1亚型AIV HA蛋白和密码子优化的HA蛋白的重组NDV,并分别命名为rL-H5HA和rL-optiH5HA。对拯救的重组病毒进行RT-PCR、间接免疫荧光和western blot鉴定,结果表明,两种重组病毒均可以在BHK-21细胞中以及鸡胚成纤维细胞稳定地表达HA蛋白。此外,rL-optiH5HA在体外增殖能力及在体内刺激产生抗体均显著高于rL-H5HA。本研究表明,密码子优化的HA重组NDV具有明显的免疫增强作用。本研究为研制安全、有效的新型禽流感疫苗提供了实验依据。 展开更多
关键词 禽流感病毒 ha蛋白 重组新城疫病毒 密码子优化
下载PDF
不同致病性H7N9亚型流感病毒HA蛋白的比较分析 被引量:3
12
作者 张莹 刘琳 +4 位作者 徐海峰 曾显营 施建忠 王秀荣 陈化兰 《中国家禽》 北大核心 2018年第7期14-17,共4页
为明确高致病性和低致病性H7N9亚型流感病毒血凝素(HA)蛋白的血清学特性是否有差异,通过体外表达两种H7N9亚型流感病毒HA蛋白并进行分析。利用RT-PCR方法扩增出高、低致病性H7N9亚型流感病毒HA基因,测序,并克隆于真核表达载体pCAGGS-Fla... 为明确高致病性和低致病性H7N9亚型流感病毒血凝素(HA)蛋白的血清学特性是否有差异,通过体外表达两种H7N9亚型流感病毒HA蛋白并进行分析。利用RT-PCR方法扩增出高、低致病性H7N9亚型流感病毒HA基因,测序,并克隆于真核表达载体pCAGGS-Flag中,构建两个重组表达质粒,命名为pCAF-H7HPHA和pCAF-H7LPHA,分别转染293T细胞,用间接免疫荧光试验和Western blot试验观察HA蛋白的表达情况。结果显示:与低致病H7N9亚型流感病毒比较,高致病性H7N9亚型流感病毒HA基因裂解位点有连续的碱性氨基酸插入,糖基化位点和受体结合位点没有差异。不同致病性毒株的HA蛋白均能表达良好,表达蛋白分子量约为70 ku;高致病性H7N9亚型流感病毒HA蛋白(或血清)可以与低致病H7N9流感血清(或蛋白)发生反应。结果表明:不同致病性H7N9亚型流感病毒HA蛋白在血清学上没有差异性,为H7N9亚型流感病毒HA蛋白的研究奠定基础。 展开更多
关键词 H7N9亚型流感 ha蛋白 血清学
下载PDF
同时表达麻疹病毒L4株HA和F蛋白及人白细胞介素2(IL2)的重组痘苗病毒疫苗株的构建 被引量:7
13
作者 杨克俭 阮力 +4 位作者 朱诚 孙朝辉 陆柔剑 徐水婵 朱既明 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期299-306,共8页
构建了同时表达麻疹病毒LA株HA和F基因及人白细胞介素2(IL2)的重组痘苗病毒疫苗株RVJMLHAFKIL2。Westemblot结果显示,HA、F和人IL2基因均在痘苗病毒中稳定有效表达,且产物与天然蛋白相近。H... 构建了同时表达麻疹病毒LA株HA和F基因及人白细胞介素2(IL2)的重组痘苗病毒疫苗株RVJMLHAFKIL2。Westemblot结果显示,HA、F和人IL2基因均在痘苗病毒中稳定有效表达,且产物与天然蛋白相近。HA分子有糖化的79kD和非糖化的田kD两种形式;F分子以60kD的前体F0、43kD的F1和18kD的F2三种形式存在。表达产物的血凝效价为1:8,血溶活性OD540的测定结果是O37。该重组病毒免疫新西兰白兔及C57小鼠,可以产生抗麻诊病毒HA和F蛋白的特异性ELISA(1:644~1600)、血凝抑制(1:256~512)、血溶抑制(1:80~160)和NT(1:640)抗体。接种兔及裸鼠后的毒力反应,明显低于只表达IL2的重组痘苗病毒疫苗株RVJ123,表现为兔皮肤红肿范围小,持续时间短,皮肤无坏死;裸鼠毒力的结果,表现出RVJMLHAFKIL2病毒只存留于接种局部,而且滴度大大降低,未发现该病毒向其它脏器播散和增殖。麻疹重组痘苗病毒疫苗株的构建为该疫苗株的人体免疫观察奠定了基础。 展开更多
关键词 麻疹病毒 融合蛋白 白细胞介素 重组痘苗病毒
下载PDF
H9N2亚型AIVHA基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达 被引量:2
14
作者 詹爱军 王新卫 +4 位作者 谭婉明 马静云 毕英佐 于康振 曹永长 《中国农学通报》 CSCD 2008年第1期18-22,共5页
【研究目的】利用杆状病毒表达系统表达AIVH9N2亚型HA基因以获得可以利用的HA蛋白;【方法】应用DNAStar软件,参照Genbank中注册的AIVH9N2亚型HA基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR方法成功地扩增出带双酶切位点的H9亚型AIV的HA基因,通过B... 【研究目的】利用杆状病毒表达系统表达AIVH9N2亚型HA基因以获得可以利用的HA蛋白;【方法】应用DNAStar软件,参照Genbank中注册的AIVH9N2亚型HA基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR方法成功地扩增出带双酶切位点的H9亚型AIV的HA基因,通过BamHⅠ和XhoⅠ双酶切位点将H9HA基因插入转移质粒载体pFastbacHTa中,获得重组转移载体pFastbacHTa-H9HA并将其转化DH10Bac细胞,与Bacmid发生位点特异性转座作用,得到重组穿梭载体Bacmid-H9HA,再将其转染昆虫细胞HighFive,进行PCR鉴定、SDS-PAGE和WesternBlot检测;【结果】HA基因正确地插入到病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下游,HA基因在HighFive细胞中得到了表达,H9HA大小约为67KD,而且表达的产物具有特异免疫学反应性;【结论】HA基因在昆虫细胞获得表达,为进一步生产检测H9N2亚型流感病毒的检测试剂或者构建亚单位疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 血凝素蛋白 杆状病毒表达 克隆
下载PDF
H5亚型AIV HA基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达 被引量:1
15
作者 詹爱军 王新卫 +4 位作者 王敬师 周庆丰 马静云 毕英佐 于康震 《中国家禽》 北大核心 2007年第15期20-23,共4页
应用DNAStar软件,参照GenBank中注册的AIV H5亚型毒株HA基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR方法成功地扩增出带双酶切位点的H5亚型AIV的HA基因,通过BamHⅠ和XhoⅠ双酶切位点将H5 HA基因插入转移质粒载体pFastBacHTa中,获得重组转移载体pF... 应用DNAStar软件,参照GenBank中注册的AIV H5亚型毒株HA基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR方法成功地扩增出带双酶切位点的H5亚型AIV的HA基因,通过BamHⅠ和XhoⅠ双酶切位点将H5 HA基因插入转移质粒载体pFastBacHTa中,获得重组转移载体pFastBacHTa-H5HA并将其转化DH10Bac细胞,与Bacmid发生位点特异性转座作用,得到重组穿梭载体Bacmid-H5HA,再将其转染昆虫细胞High Five,PCR鉴定证实该基因正确地插入到病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下游,经SDS-PAGE和Western blotting检测,HA基因在High Five细胞中得到了表达,表达产物大小约为67ku,而且具有特异的免疫反应性。 展开更多
关键词 禽流感病毒 血凝素蛋白 昆虫细胞 克隆
下载PDF
甲型流感病毒HA蛋白质序列的预测 被引量:1
16
作者 张玲 高洁 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期828-831,共4页
基于CGR-游走模型和分数阶差分,用ARFIMA模型预测甲型流感病毒HA蛋白质序列。对所选取1943~2013年同源性相对较高的71条蛋白质序列,用ARFIMA(p,d,q)模型对前20个位置去拟合并且预测,除极个别外由预报区域图显示原始数据都在预报区域内... 基于CGR-游走模型和分数阶差分,用ARFIMA模型预测甲型流感病毒HA蛋白质序列。对所选取1943~2013年同源性相对较高的71条蛋白质序列,用ARFIMA(p,d,q)模型对前20个位置去拟合并且预测,除极个别外由预报区域图显示原始数据都在预报区域内,表明模型建立的比较合理,预报效果很好。这对流感病毒的研究和预测有着重要的意义。 展开更多
关键词 甲流 ha蛋白质序列 预测 CGR游走模型 ARFIMA(p d q)
下载PDF
膀胱癌Ha-ras基因突变、P^(21)蛋白表达及其意义 被引量:3
17
作者 王振国 郭和清 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2003年第8期59-60,63,共3页
目的 :为探讨ras基因突变及P2 1蛋白表达与膀胱癌发生发展关系。方法 :采用聚合酶链反应 -单链DNA构象多态性分析和免疫组化链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化物酶法 ,对 30例膀胱癌组织Ha -ras基因ExonⅠ突变及P2 1蛋白表达情况进行了检测。... 目的 :为探讨ras基因突变及P2 1蛋白表达与膀胱癌发生发展关系。方法 :采用聚合酶链反应 -单链DNA构象多态性分析和免疫组化链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化物酶法 ,对 30例膀胱癌组织Ha -ras基因ExonⅠ突变及P2 1蛋白表达情况进行了检测。结果 :膀胱癌组织Ha -ras基因ExonⅠ突变率为 4 6 .7% ,高于其周边组织的 16 .7% ,经 χ2 检验 ,差异有显著性 (P <0 .0 2 5 ) ,其 p2 1蛋白表达率前者为 6 0 .0 % ,也明显高于其周边组织 2 6 .7% (P <0 .0 1)。结论 :Ha -rasExonⅠ点突变及其P2 1蛋白的过度表达在膀胱癌的发生发展中起着重要作用。 展开更多
关键词 膀胱癌 基因突变 P21蛋白
下载PDF
HA/BMP充填根尖术后骨缺损的疗效观察 被引量:1
18
作者 刘士有 邢晓艳 +2 位作者 王曦 张青松 谢晓铁 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 1998年第4期277-278,共2页
作者用致密多晶羟基磷灰石HA加骨形成蛋白(BMP)和少量碘仿的复合材料作为根尖切除术后骨缺损的填充物,同时分别用HA加少量碘仿和用搔刮骨面使新鲜血液充盈骨缺损部为对照,进行一年临床观察发现复合材料填充骨缺损,术后3个月填充物与骨... 作者用致密多晶羟基磷灰石HA加骨形成蛋白(BMP)和少量碘仿的复合材料作为根尖切除术后骨缺损的填充物,同时分别用HA加少量碘仿和用搔刮骨面使新鲜血液充盈骨缺损部为对照,进行一年临床观察发现复合材料填充骨缺损,术后3个月填充物与骨边缘有明显骨小梁形成,6个月骨腔内密度和周围骨组织均匀一致。而对照组6~12个月才开始见填充物边缘有骨小梁形成。说明BMP与HA复合材料具有很强的骨引导作用,利于骨的重建,是一种良好的颌骨腔性骨缺损的填充材料。 展开更多
关键词 骨形成蛋白 羟基磷灰石 根尖切除术 骨缺损
下载PDF
枯草芽孢杆菌HAS中TasA基因的克隆与分析 被引量:3
19
作者 熊国如 赵更峰 +3 位作者 蔡文伟 伍苏然 杨本鹏 张树珍 《贵州农业科学》 CAS 2016年第12期53-57,共5页
为弄清枯草芽孢杆菌HAS对甘蔗黑穗病菌的抑制作用机理,选取可对多种植物病原真菌有抑制作用的抗菌蛋白TasA基因进行克隆与分析。结果表明:在HAS菌株中含有TasA基因,克隆编码抗菌蛋白TasA的基因全长,序列分析其有786个碱基组成,该序列与G... 为弄清枯草芽孢杆菌HAS对甘蔗黑穗病菌的抑制作用机理,选取可对多种植物病原真菌有抑制作用的抗菌蛋白TasA基因进行克隆与分析。结果表明:在HAS菌株中含有TasA基因,克隆编码抗菌蛋白TasA的基因全长,序列分析其有786个碱基组成,该序列与GenBank上登录的TasA(AJ871386.1)序列同源性达99%,推测蛋白分子量大小大约28KD,其中第104、164、169、250、399、623、627位等7个碱基发生碱基转换或颠换,而且这些变异分别发生在密码子的第2、2、3、1、3、2、3位碱基上,引起多肽链氨基酸的错义突变。经氨基酸序列比对,同Bacillus subtilis subsp.subtilis str.168编码的TasA蛋白(NP_390342.1)在第150位和第209位上的氨基酸发生变化,由苏氨酸、天冬酰胺分别代替丙氨酸和谷氨酸。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌haS 黑穗病菌 抗菌蛋白 TasA基因
下载PDF
枯草芽孢杆菌HAS中几丁质酶基因的克隆分析 被引量:1
20
作者 熊国如 赵更峰 +3 位作者 张树珍 蔡文伟 伍苏然 杨本鹏 《贵州农业科学》 CAS 2017年第2期1-4,共4页
为揭示枯草芽孢杆菌菌株HAS对甘蔗黑穗病菌抑制作用的机理,选取对多种病原真菌有抑制作用的几丁质酶进行克隆与分析。结果表明:菌株HAS基因组中含有1个ORF全长834bp的几丁质酶编码序列,其具有编码278个氨基酸的几丁质酶蛋白,该序列同Gen... 为揭示枯草芽孢杆菌菌株HAS对甘蔗黑穗病菌抑制作用的机理,选取对多种病原真菌有抑制作用的几丁质酶进行克隆与分析。结果表明:菌株HAS基因组中含有1个ORF全长834bp的几丁质酶编码序列,其具有编码278个氨基酸的几丁质酶蛋白,该序列同GenBank上登录的几丁质酶蛋白(Bacillus subtilis subsp.subtilis str.168)(ref|NP_390566.1)的同源性最高,达98%。推测该几丁质酶在菌株HAS抑制甘蔗黑穗病菌过程中可能起关键作用。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌haS 黑穗病菌 抗菌蛋白 几丁质酶基因
下载PDF
上一页 1 2 7 下一页 到第
使用帮助 返回顶部