长链非编码RNA HAGLROS调控miR-26b/JAK2/STAT3通路对肝癌细胞上皮间质转化的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)HAGLR互补链lncRNA(HAGLROS)能否通过微小RNA-26b(miR-26b)/Janus激酶2(JAK2)/转录激活因子3(STAT3)轴来调控肝癌增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)。方法通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测正常肝细胞系LO2和肝癌细胞(Hep3B、MHCC-LM3、Huh7、SMMC-7721)的HAGLROS和miR-26b水平。用双荧光素酶报告实验鉴定HAGLROS与miR-26b的相互作用。分别转染HAGLROS干扰序列si-HAGLROS和miR-26b抑制剂(inhibitor)至SMMC-7721细胞。挽救实验通过转染miR-26b inhibitor同时干扰HAGLROS表达。将SMMC-7721细胞分为si-NC组、si-HAGLROS组、miR-26b inhibitor组和si-HAGLROS+miR-26b inhibitor组。分别利用MTT法、划痕实验和Transwell实验检测SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭情况。通过检测E-钙黏蛋白(E-cad)、N-钙黏蛋白(N-cad)和纤维粘连蛋白(FN)水平以评估EMT过程。qPCR和Western blotting检测B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、磷酸化JAK2(p-JAK2)和磷酸化STAT3(p-STAT3)的水平。结果与LO2细胞相比,肝癌细胞的HAGLROS水平升高,而miR-26b水平降低(P<0.05);在线生物信息学预测和荧光素酶报告分析证实miR-26b能够与HAGLROS靶向结合。细胞功能丧失实验表明,与si-NC组相比,SMMC-7721细胞的增殖、迁移和侵袭能力及N-cad、FN、Bcl-2、p-JAK2和p-STAT3水平在si-HAGLROS组中降低而在miR-26b inhibitor组中增加,E-cad水平则在si-HAGLROS组中升高而在miR-26b inhibitor组中降低,上述差异均有统计学意义(P<0.05);挽救实验表明,与si-HAGLROS组相比,si-HAGLROS+miR-26b inhibitor组SMMC-7721细胞的增殖、迁移和侵袭能力及N-cad、FN、Bcl-2、p-JAK2和p-STAT3水平增加,而E-cad水平降低,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。结论HAGLROS通过靶向miR-26b促进肝癌细胞迁移、侵袭和EMT过程并调控JAK2/STAT3信号通路活性,为HAGLROS作为肝癌的干预治疗的新靶点提供新思路。