HAPO研究——挑战妊娠糖尿病理念

近年来,随着人们生活水平的不断提高和生活方式的改变,越来越多的女性在妊娠期间发生血糖升高。目前在临床上,对于妊娠糖尿病的诊断通常沿用WHO建议的根据空腹血糖及OGTT试验制定的诊断标准。但是,2008年第68届ADA科学年会上来自美国西北大学Feinberg医学院的Metzger教授关于高血糖与不良妊娠预后（HAPO）研究结果的学术报告对此经典诊断标准提出了质疑和挑战，立即成为参会学者追逐的研究热点之一。

HAPO蛋白的可溶性表达、纯化及生物学活性测定

目的:为了得到可溶性表达的人促血液血管细胞生成素(HAPO)蛋白,构建含HAPO基因片段的pET22b(+)表达载体,获得纯化的HAPO蛋白并检测其生物学活性。方法:利用RT-PCR技术从人胎肝中获得HAPO cDNA片段,并克隆至表达载体pET22b(+)中,利用基因工程菌BL21(DE3)进行表达,产物利用Ni2+-螯合亲和层析及SP Sepharose FF柱层析分离纯化。采用黏附实验检测HAPO对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)黏附性的影响。结果:从人胎肝中克隆出长为897 bp HAPO目的片段,成功构建重组质粒pET22b(+)-HA-PO,其表达的融合蛋白以可溶状态存在,表达量占菌体总蛋白的10%,经分离纯化融合蛋白的纯度可达80%。活性测定结果表明HAPO以剂量依赖性方式增加HUVEC的总黏附性。结论:可溶性表达了HAPO蛋白,并用体外实验证实HAPO对造血干/祖细胞归巢有一定促进作用。

hApoE7转基因小鼠纯合子的培育和鉴定

目的 载脂蛋白E (apoE)是血浆中参与脂质代谢的重要蛋白质 ,并且与迟发型早老性痴呆 (AD)相关。为从整体水平研究人突变ApoE基因剂量与效应的关系 ,我们拟培育C57BL 6 hApoE7纯合子转基因小鼠。方法 将经Southern杂交鉴定为阳性的F1代小鼠进行互配 ,仔代经PCR初筛 ,再行Southern杂交鉴定 ,杂交结果经扫描定量分析以确定hApoE7基因整合的拷贝数 ,纯合子小鼠的拷贝数为杂合子的两倍。经此法鉴定的纯合子小鼠与正常C57BL 6小鼠进行侧交以进行进一步的鉴定。结果 Southern杂交鉴定出F1代转基因小鼠 6只 ,F2代转基因小鼠 7只 ,其中纯合子 3只。将所得到的纯合子小鼠与正常的C57BL 6小鼠交配 ,仔代鼠经PCR鉴定结果全部为阳性。结论 通过培育C57BL 6 hApoE7纯合子转基因小鼠 ,发现人ApoE7基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传 ,转基因的遗传特征符合常染色体单位点整合。

HAPO促进放射损伤小鼠的造血重建

目的:明确研究人促血液血管细胞生成素(HAPO)的促造血作用。方法:研究HAPO,G-CSF对放射损伤小鼠的促造血作用,观察小鼠的造血恢复情况。测定HAPO,G-CSF体外对骨髓细胞活力的影响。结果:HAPO,G-CSF均可明显提高放射损伤小鼠的生存率,使内源性的脾集落增加。外周血检测HAPO组白细胞恢复快于PBS组,也可高于G-CSF组。14天时G-CSF组小鼠骨髓细胞数最多,32天时HAPO组骨髓细胞数超过G-CSF组,至42天时基本恢复正常,而G-CSF组在32天、42天时骨髓细胞数仍低于正常值。在7天、14天、32天时小鼠骨髓细胞高增殖潜能试验,HAPO组生成的GEMM-CFU数均最多。HAPO,G-CSF预孵育的骨髓细胞放射后,HAPO组活细胞数量明显高于对照组及G-CSF组。不同剂量HAPO,G-CSF均能促进放射后骨髓细胞的增殖。骨髓细胞照射后3周,HAPO组存在造血岛生成,而PBS组没有。结论:体内、外实验证明,人促血液血管细胞生成素HAPO对放射损伤的Balb/c小鼠有明显的促造血重建作用。

基于嵌入式Linux的HAPO200高端掌上电脑

提起掌上电脑或者PDA，大家很容易想到Palm、WinCE。不错，这两种操作系统正是目前PDA行业内最重要的嵌入式手持设备OS。市场上主流的掌上电脑，如HP、索尼、华硕等品牌，都是采用这两种OS之一。但是，大家只要稍作留意就会发现，除这两种操作平台外，还有另外一个平台不容忽视，那就是嵌入式Linux。国外的Zaurus系列、国内的HAPO系列，都是嵌入式Linux在掌上电脑上的优秀应用。

从HAPO研究到HAPO随访研究的启示

一直以来,全球缺乏统一的妊娠期糖尿病(GDM)诊断标准,一直到2008年高血糖与妊娠不良结局(HAPO)研究公布,2010年国际妊娠合并糖尿病共识小组(IADPSG)诊断标准诞生,并被越来越多的国家及学术机构采纳,才基本结束了这一局面。2019年,随着HAPO随访研究(HAPO FUS)陆续发表,业界对GDM产后转归、孕期轻度高血糖对母婴两代人的深远影响,均产生了更加深入的认识。本文将从HAPO研究到HAPO FUS进行阐述,以了解这些里程碑意义的研究带给我们的启示。