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表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析
被引量:
1
1
作者
李嘉琦
吴娟
+1 位作者
孙茂盛
戴长柏
《动物医学进展》
CSCD
2003年第2期68-71,共4页
利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3+vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染...
利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3+vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒。以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0TCID50/mL。
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关键词
重组腺病毒
hav结构基因
鉴定
细胞病变
甲型肝炎病毒
基因
工程病毒疫苗
转移载体
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职称材料
题名
表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析
被引量:
1
1
作者
李嘉琦
吴娟
孙茂盛
戴长柏
机构
中国医学科学院协和医科大学医学生物学研究所
出处
《动物医学进展》
CSCD
2003年第2期68-71,共4页
文摘
利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3+vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上。采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞。在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒。以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0TCID50/mL。
关键词
重组腺病毒
hav结构基因
鉴定
细胞病变
甲型肝炎病毒
基因
工程病毒疫苗
转移载体
Keywords
recombinant adenovirus
structural gene of
hav
identification
cytopathic effect (CPE)
分类号
R512.61 [医药卫生—内科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析
李嘉琦
吴娟
孙茂盛
戴长柏
《动物医学进展》
CSCD
2003
1
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