甲型肝炎病毒编码区cDNA在减毒伤寒杆菌中的高效表达

使甲型肝炎病毒基因组ｃＤＮＡ能够在减毒伤寒杆菌中表达，从而通过口服此种减毒伤寒杆菌达到对甲肝免疫的作用。将甲肝病毒编码区ｃＤＮＡ插入高效表达质粒ＰＢＶ２２１，转化大肠杆菌ＤＨ５α，筛选并鉴定阳性克隆。将阳性克隆用电转移法转化减毒的伤寒杆菌ＢＲＤ５０９。用温度诱导法诱导目的基因在伤寒杆菌中表达。通过Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ和ＥＬＩＳＡ检测表明，表达蛋白可与人抗甲肝ＩｇＧ发生特异性反应。用此伤寒杆菌口服或腹腔注射免疫小鼠，小鼠血清检测到抗甲型肝炎病毒的抗体。结论：甲肝病毒ｃＤＮＡ可以在减毒伤寒杆菌中表达，且表达的蛋白质在体内、外有免疫原性。

应用核酸探针检测甲型肝炎疫苗的滴度

应用甲型肝炎病毒(HAV)cDNA 片段作为探针,分别以同位素、异羟基洋地黄毒苷配基和生物素标记该探针,对甲肝疫苗病毒培养过程中不同时期、不同接种量的病毒浓度进行了滴定,并以 ELISA 作对照。结果表明,各种标记探针检测的灵敏度均高于 ELISA。而不同标记的探针检测的结果无显著差异。