一种草药氯仿萃取水相提取物止血作用的实验研究

目的:观察一种促凝血草药氯仿萃取水相提取物HB的止血作用。方法:实验于2003-12/2004-12在解放军第三军医大学西南医院全军烧伤研究所国家重点实验室完成。健康家兔18只,体质量2.5～3.0kg;健康雄性Wistar大鼠70只,体质量(250±10)g;雄性昆明种小鼠78只,体质量(25±5)g。制备HB氯仿萃取-水相提取物后给动物腹腔注射。①将70只大鼠随机分为空白对照组(n=10,30mg/kg腹腔注射生理盐水)、阳性对照组(n=10,云南白药按2mg/(kg·d)灌胃)、HB高剂量给药组(n=30,分别选取10只动物按5,10,20mg/kg剂量腹腔注射)、HB低剂量给药组(n=20,分别选取10只动物按0.5,1mg/kg剂量腹腔注射)。观察给药10d后实验动物的血生化指标(凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原含量、凝血酶时间)及血小板计数;②将39只小鼠随机分为空白对照组、云南白药对照组(云南白药0.5mg/(kg·d)灌胃)和用药组(HB0.5mg/kg),每组13只。观察给药10d后小鼠的出血时间、同样的分组和干预方法观察小鼠的凝血时间。③将待试药设氯仿萃取水相提取物用药组、云南白药阳性对照组、生理盐水阴性对照组。18只家兔各取6只分别用于观察体表、肝脏及股动脉创面的止血实验,观察局部创面(皮肤、肝脏、股动脉)止血时间。结果:纳入健康家兔18只、健康雄性Wistar大鼠70只、雄性昆明种小鼠78只,均进入结果分析。①氯仿萃取水相提取物对大鼠血凝四项及血小板计数的影响:与空白对照组相比,HB氯仿萃取水相提取物腹腔注射可显著提高大鼠的血小板计数;HB高剂量给药组大鼠的凝血酶原时间明显缩短。②对小鼠出血时间及凝血时间的影响:与云南白药对照组及空白对照组相比,HB氯仿萃取水相提取物可显著缩短小鼠的出血时间[(250.2±53.3),(234.5±61.3),(100.2±27.9)s,P<0.01]及凝血时间[(202.5±50.2),(255.5±27.8),(141.8±37.6)s,P<0.01]。③对家兔局部创面的止血作用:家兔创面止血时间显著短于生理盐水阴性对照组及云南白药阳性对照组[皮肤:(41.20±6.21),(84.10±5.32),(74.80±4.73)s;肝脏:(50.20±3.39),(87.60±6.24),(74.50±5.19)s;股动脉:(62.60±4.50),(103.60±4.35),(98.20±6.07)s;P<0.01)。结论:HB氯仿萃取水相提取物具有良好的体内、外促凝血及创面止血作用。

HB提取条件的优选及其凝血实验研究

目的:探讨HB(一种促凝血草药的简称)提取条件的优选,及其氯仿萃取纯化后水相提取物的体内、外促凝血作用。方法:以家兔、大鼠为研究对象,分为空白组、云南白药对照组和HB氯仿萃取水相提取物组。观察家兔体外凝血时间;及给药10d后大鼠的血生化指标,如凝血酶原(PT)时间、活化部分凝血活酶(APTT)时间、纤维蛋白原(FIB)含量、凝血酶(TT)时间、血小板计数(PLT)。结果:HB水提最优工艺条件是:提取水量10倍,提取温度90℃。提取时间1.5h。体外促凝效果的观察:家兔的四种方法体外凝血时间明显短于空白及云南白药对照组(P<0.01),且凝血时间缩短70%以上。体内促凝作用观察:各用药组血小板计数均显著高于空白及云南白药组(p<0.01);高(5,10,20mg/kg)剂量组PT时间均显著短于空白组(p<0.01),与云南白药组相比无显著性差异(p>0.05);各剂量组APTT、FIB、TT较空白及云南白药组无显著性差异。结论:HB氯仿萃取纯化后水相提取物具有良好的体内、外促凝血作用,而其能使血小板计数显著升高是其主要止血机理之一。

部分中草药促凝作用筛选的实验研究

目的 从药典已有记载或文献报道凝血效果较好的 2 0多种促凝中草药 ,筛选出凝血时间最短 ,促凝效果最好的中草药。方法 用家兔体外凝血实验 ,对 2 0余种具有止血作用的中药和民间草药初提物及有机溶剂萃取提取物的对比研究 ,观察了凝血时间 (CT) (凝血板法 ,试管法 )、凝血酶原时间 (PT)、血浆复钙时间 (RT)等指标。结果 发现采自云贵高原的一种多年生草本植物 (简称HB)初提物及其氯仿萃取纯化后的水相提取物的凝血时间、凝血酶原时间、血浆复钙时间与空白对照组比较显著缩短 (P <0 0 1) ,并且凝血时间比研究中的其它中草药初提物和对比物明显缩短 (P <0 .0 1)。结论 HB及氯仿萃取纯化后的水相提取物有明显的体外促凝血作用 。