小檗碱衍生物HB-13抗单纯疱疹病毒-2作用机制的研究

目的探讨小檗碱衍生物HB-13抗单纯疱疹病毒-2(HSV-2)的作用机制。方法采用细胞病变法检测HB-13是否对HSV-2有直接作用;空斑法检测HB-13是否抑制HSV-2的吸附和释放;荧光定量PCR检测HB-13是否影响HSV-2 DNA复制以及蛋白免疫印迹方法检测HB-13是否影响HSV-2蛋白质合成。结果HB-13在细胞外无直接杀灭HSV-2作用;对HSV-2的吸附和释放亦无影响;不抑制HSV-2 DNA复制;但HB-13浓度依赖性地抑制HSV-2蛋白质合成。结论HB-13可抑制HSV-2蛋白质合成,其抗HSV-2作用机制与ACV等核苷类药物不同。

小檗碱衍生物HB-13对角质形成细胞分泌IL-10的影响

目的:评价小檗碱衍生物HB-13对HaCaT细胞分泌IL-10的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法筛选HB-13的细胞安全浓度;以P物质刺激HaCaT细胞,加入不同浓度的HB-13分别孵育12、24、48 h后,ELISA法及荧光定量PCR法检测培养上清液中IL-10水平及细胞内IL-10mRNA的表达。结果:HB-13浓度为2.5、5、10μg/mL时对HaCaT细胞的毒性作用不显著,但可促进P物质诱导IL-10的分泌,促进作用随时间的延长而增强(P<0.05)。结论:HB-13的抗炎作用部分可能是通过促进细胞因子IL-10的分泌而实现的。

小檗碱衍生物HB-13抗单纯疱疹病毒1型豚鼠皮肤感染的疗效

目的:评价小檗碱衍生物HB-13凝胶治疗单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus,HSV-1)豚鼠皮肤感染的疗效。方法:用HSV-1在豚鼠皮肤造模,感染后1小时开始局部给药,每日2次,连续7天。同时以阿昔洛韦凝胶和喷昔洛韦乳膏阳性对照,及凝胶基质和空白对照。结果:与空白对照相比,0.5%HB-13凝胶可减轻皮损评分,促进结痂,但不能缩短病程。结论:0.5%HB-13凝胶对HSV-1感染有明显减轻临床症状的作用。

小檗碱衍生物HB-13对角质形成细胞分泌IFN-γ的影响

目的研究小檗碱衍生物HB-13对人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)分泌γ干扰素(IFN-γ)的影响,探讨HB-13的抗炎机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝法确定HB-13作用于HaCaT细胞的安全浓度;细胞经P物质刺激后,加入不同浓度的HB-13分别孵育12、24、48h,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液中IFN-γ的含量,应用实时荧光定量PCR法检测细胞内IFN-γmRNA表达情况。结果 HB-13浓度为2.5、5、10μg/ml对HaCaT细胞毒性作用不显著,并可促进P物质诱导的IFN-γ的分泌。结论促进表皮细胞分泌IFN-γ可能是HB-13在皮肤局部发挥抗炎作用的机制之一。

小檗碱衍生物HB-13体外抗单纯疱疹病毒的研究

目的探讨小檗碱衍生物HB-13及其前体小檗碱体外抗HSV-1和HSV-2的活性。方法利用Vero细胞体外培养模型,以阿昔洛韦(ACV)为对照药,通过观察细胞病变效应,检测HB-13和小檗碱的细胞毒性、HSV-1和HSV-2液的病毒滴度及药物抑制病毒致细胞病变效应。结果HB-13、小檗碱和阿昔洛韦的半数中毒质量浓度(TC_(50))分别为31.99,380和>800μg/mL;对HSV-1的半数抑制质量浓度(IC_(50))分别为1.328,>100和0.443μg/mL,治疗指数分别为24.09,<3.80和>1805.87;对HSV-2的IC_(50)分别为1.344,>100和0.679μg/mL;治疗指数分别为23.80,<3.80和>1178.20。结论HB-13具有明显的抗HSV作用,而小檗碱无实用抗HSV活性。