目的研究鱼藤素致人支气管上皮细胞(16HBE)毒性与线粒体损伤和凋亡的相关性,为研究鱼藤素毒性提供参考。方法将1.56~100μmol·L^(-1)鱼藤素与16HBE细胞共孵育,培养24~72 h,CCK-8法测定细胞抑制率,得到半数抑制浓度(IC 50),确定鱼...目的研究鱼藤素致人支气管上皮细胞(16HBE)毒性与线粒体损伤和凋亡的相关性,为研究鱼藤素毒性提供参考。方法将1.56~100μmol·L^(-1)鱼藤素与16HBE细胞共孵育,培养24~72 h,CCK-8法测定细胞抑制率,得到半数抑制浓度(IC 50),确定鱼藤素中剂量。将16HBE细胞分为对照组(正常培养),鱼藤素小剂量组(15μmol·L^(-1)鱼藤素),鱼藤素中剂量组(30μmol·L^(-1)鱼藤素)及鱼藤素大剂量组(60μmol·L^(-1)鱼藤素),培养24 h,倒置荧光显微镜和透射电镜观察线粒体和细胞核超微结构形态,比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和超氧化物歧化酶(SOD)活力,流式细胞术检测线粒体膜电位(MMP)和细胞凋亡率。结果鱼藤素对16HBE增殖具有抑制作用,且抑制率呈浓度和时间依赖关系(P<0.05),24,48和72 h IC 50分别为(32.95±2.39),(21.07±2.21)和(15.46±0.93)μmol·L^(-1)。与对照组比较,鱼藤素作用后细胞核凋亡,线粒体明显肿胀、空泡化和嵴脱落,GPx与SOD活力显著下降,MMP急剧下降;对照组荧光强度(57682±719.1),鱼藤素小剂量组、中剂量组、大剂量组分别为(51593±1525.4),(29427±578.4)和(23575±1366.8);鱼藤素各剂量组细胞凋亡率明显上升,且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论鱼藤素致16HBE细胞毒性可能与线粒体损伤和细胞凋亡相关。展开更多
文摘目的研究鱼藤素致人支气管上皮细胞(16HBE)毒性与线粒体损伤和凋亡的相关性,为研究鱼藤素毒性提供参考。方法将1.56~100μmol·L^(-1)鱼藤素与16HBE细胞共孵育,培养24~72 h,CCK-8法测定细胞抑制率,得到半数抑制浓度(IC 50),确定鱼藤素中剂量。将16HBE细胞分为对照组(正常培养),鱼藤素小剂量组(15μmol·L^(-1)鱼藤素),鱼藤素中剂量组(30μmol·L^(-1)鱼藤素)及鱼藤素大剂量组(60μmol·L^(-1)鱼藤素),培养24 h,倒置荧光显微镜和透射电镜观察线粒体和细胞核超微结构形态,比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和超氧化物歧化酶(SOD)活力,流式细胞术检测线粒体膜电位(MMP)和细胞凋亡率。结果鱼藤素对16HBE增殖具有抑制作用,且抑制率呈浓度和时间依赖关系(P<0.05),24,48和72 h IC 50分别为(32.95±2.39),(21.07±2.21)和(15.46±0.93)μmol·L^(-1)。与对照组比较,鱼藤素作用后细胞核凋亡,线粒体明显肿胀、空泡化和嵴脱落,GPx与SOD活力显著下降,MMP急剧下降;对照组荧光强度(57682±719.1),鱼藤素小剂量组、中剂量组、大剂量组分别为(51593±1525.4),(29427±578.4)和(23575±1366.8);鱼藤素各剂量组细胞凋亡率明显上升,且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论鱼藤素致16HBE细胞毒性可能与线粒体损伤和细胞凋亡相关。