家兔心肌不同缺血时间与再灌注的形态学变化研究

目的探讨家兔心肌不同缺血时间点和再灌注后的形态学变化规律。方法采用结扎家兔心脏冠状动脉左室支建立急性缺血再灌注模型,应用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法、苏木素-碱性品红-苦味酸(hematoxylin-basic fuchsin-picric,HBFP)染色法,以观察不同缺血时间与再灌注后心肌细胞的形态学变化。结果HE染色,心肌缺血10 min未见明显变化,缺血6 h后见核碎裂、核溶解,缺血12 h后见大片坏死;HBFP染色,心肌缺血10 min见点状红色阳性着色,随着缺血时间增加阳性着色范围及形态显示更清晰。急性心肌缺血20 min出现收缩带坏死,缺血6 h内收缩带坏死分级逐渐加重,6 h后收缩带呈小灶状出现在大片坏死周边,分级减轻。心肌缺血再灌注后,心肌损伤加重,缺血时间越长,再灌注心肌的损伤越重。结论HBFP染色在急性心肌缺血早期可显示细胞形态的变化且更易于观察,心肌细胞收缩带坏死的分级和分型可反映心肌缺血的程度,缺血时间和再灌注时间决定了心肌的损伤程度,其中缺血时间更为重要。

经冠状动脉内注射月桂酸钠构建大鼠冠状动脉微栓塞模型

目的建立新的在体大鼠冠状动脉微栓塞模型。方法成年SD大鼠随机分为正常对照组(n=6)、月桂酸钠组(n=54)及微球组(n=27),微球组依所注射微球的数量进一步分为500、1000和3000个次3个亚组(n=9);大鼠麻醉后开胸,夹闭主动脉后经左心室内注射200μg月桂酸钠或42μm的微球达冠状动脉,以注射生理盐水为对照;分别采用病理切片、超声心动图和彩色微粒子测量技术,观察各组大鼠心肌内微血栓和微梗死形成,以及心功能和心肌局部血流量的变化。结果经左心室内注射200μg月桂酸钠后1h,大鼠心肌微小动脉内即有微血栓形成,3h以后达高峰,血栓形成率高达66.4%±18.8%,在此后的12～72h逐渐降低。与微球组相比,所形成的微血栓中不但有血小板及纤维蛋白的聚集,而且还伴有内皮损伤及较严重的炎细胞浸润;二者所形成的微梗死灶皆为锲形呈局灶性分布,但月桂酸钠组梗死部位炎症反应较重。月桂酸钠组所形成的微梗死面积、心功能和心肌局部血流量的下降程度与单次注射1000个微球相似。结论经冠状动脉内注射月桂酸钠可成功构建大鼠冠状动脉微栓塞模型,其最佳剂量和时间点分别为200μg和3h,与机械性的塑料微球栓塞相比,在病理发病机制上比较贴近于临床,可作为冠状动脉微栓塞微循环研究的理想的动物模型。

力竭性运动对大鼠心肌缺血缺氧的影响

目的观察力竭性运动对大鼠心肌缺血缺氧性损伤形态的影响。方法健康雄性SD大鼠45只,随机分为3组,每组15只。安静对照组常规饲养2周,不游泳;力竭性运动后即刻组及力竭性运动后48 h组每天均进行一次负重性力竭性游泳,连续2周。力竭性运动后即刻组在最后一次运动后即刻,力竭性运动后48 h组在运动后48 h处死大鼠取材并进行HBFP染色。结果力竭性运动的两组均出现明显的心肌缺血缺氧区域;心肌纤维着色均不均匀,细胞质内有较多斑点状或者片状的大红色缺血缺氧区域;力竭性运动后48 h组缺血缺氧面积及光密度值(MOD)均大于力竭性运动后即刻组(P<0.05),而安静对照组缺血缺氧面积和MOD均为0。结论力竭性运动可以诱发心肌损伤,心肌损伤可以出现延迟性加重。