乙肝病毒大蛋白检测及其与HBV-DNA复制的相关性

目的:探讨慢性乙肝感染患者血清乙肝病毒大蛋白(HBV large envelope protein,HBV-LP)对于判断乙肝病毒复制的临床意义。方法:选择540例慢性乙肝(chronic hepatitis B,CHB)患者和100例健康体检人群,通过Elisa方法检测HBV-LP和HBe Ag的含量,采用实时荧光定量PCR方法检测HBV-DNA的含量。结果:HBe Ag阳性标本中,HBVDNA和HBV-LP的阳性率分别为97.6%和91.6%,差异有统计学意义(P<0.05);HBe Ag阴性标本中,HBV-DNA和HBV-LP的阳性率分别为67.7%和70.8%,差异无统计学意义(P>0.05);所有患者中,HBV-DNA和HBV-LP的阳性率分别为81.5%和80.4%,差异无统计学意义(P>0.05)。DNA拷贝数与HBV-LP的阳性率呈正相关(r=0.865,P<0.05);DNA的拷贝数与HBV-LP的吸光度(A值)呈正相关(r=0.897,P<0.05)。结论:慢性乙肝患者,血清HBV-LP的含量与HBV-DNA的含量密切相关,可以作为判断HBV-DNA复制的指标之一。

乙肝病毒外膜大蛋白含量与HBV-DNA载量的相关性

目的:探讨乙型肝炎患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)与HBV-DNA水平的相关性,以及HBV-LP对HBeAg阴性乙肝患者的临床应用价值。方法:分别采用ELISA法和实时荧光定量PCR法检测405例HBV感染者血清的HBV-LP、HBeAg和HBV-DNA。结果:(1)405例HBV感染者血清中,HBV-LP和HBV-DNA的阳性率分别为75.06%和70.12%,两者的检出一致率为71.85%,两者间差异无统计学意义(P>0.05);(2)HBV-LP含量与HBV-DNA拷贝数之间呈正相关(r=0.944,P<0.05)。(3)HBeAg阳性158例中,HBV-LP和HBV-DNA的阳性检出率分别是93.67%和88.61%;HBeAg阴性247例中HBV-LP和HBV-DNA阳性检出率分别是63.16%和58.30%,两者间差异均无统计学意义(P>0.05);(4)HBV-DNA阳性284例中,HBV-LP的阳性率明显高于HBeAg的阳性率,分别是83.45%和49.30%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:乙肝病毒外膜大蛋白与HBV-DNA两者间有很好的相关性,可以作为判断HBV复制的血清学指标。

乙型肝炎病毒外膜大蛋白与HBV DNA的关系研究

目的:探讨乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)与HBV DNA的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR法,检测320例乙型肝炎患者血清中的HBV-LP水平及HBV DNA载量。结果:HBV-LP水平与HBV DNA拷贝数变化相一致,两者呈正相关(r=0.949);不同模式的HBeAg血清中HBV-LP与HBV DNA阳性率,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:血清HBV-LP水平能反映乙型肝炎患者体内HBV复制程度,是判断HBV复制的血清学指标。

乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测与HBV—DNA及血清标志物的相关性分析

目的探讨乙型肝炎病毒外膜大蛋白（LHBs）与乙肝病毒血清标志物及HBV—DNA之间的相关性及临床意义。方法采用酶联免疫吸咐试验（ELISA）和实时荧光定量PCR法分别检测396例慢性乙型肝炎患者血清中LHBs，HBv-M和HBV—DNA并进行相关性分析。结果在HBeAg阳性的143例患者中HBV—DNA和LHBs的检出率分别为93．0％和96．5％；抗HBe阳性的191倒中，分别为63．9％和59．2％；在HBsAg阳性、抗HBc阳性的62例中分别为50．9％和38．6％；慢性乙型肝炎轻度193例，中度119例，重度84例，其乙肝病毒包膜大蛋白阳性率分别为57．2％，63．9％和59．5％，三组之间比较差异无统计学显著性意义（P〉0．05）。结论血清LHBs水平能够反映HBV感染者体内HBV—DNA复制程度，其灵敏度高于HBV—DNA，可作为病毒复制观察的新的血清学指标。

乙肝病毒外膜大蛋白检测及其对判定HBV DNA复制的意义

目的探讨血清乙肝病毒外膜大蛋白(LHBs)检测对于判定HBV DNA复制的临床意义。方法采用酶联免疫方法检测LHBs、Pre-SI和HBV M,采用实时荧光定量PCR法检测HBV DNA。结果 (1)在HBeAg阳性血清中,HBV DNA与LHBs、Pre-S1之间的阳性率差异均无统计学意义(P>0.05);(2)在HBeAg阴性血清中,HBV DNA与LHBs的阳性率差异无统计学意义(P>0.05),HBV DNA与Pre-S1之间的阳性率差异有统计学意义(P<0.05);(3)90份乙肝患者血清中LHBs水平与HBV DNA拷贝数呈良好相关性(r=0.918),Pre-S1水平与HBV DNA拷贝数的相关系数为0.765结论血清LHBs水平能反映HBV DNA复制程度,其与HBV DNA的相关性优于Pre-S1,可作为评判HBV DNA复制新的血清学指标。

HBeAg阴性乙型肝炎患者HBV-LP及HBV-DNA检测分析

目的分析HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清HBV-LP及HBV-DNA检测的价值。方法收集64份HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清标本,分别采用实时荧光定量PCR检测HBV-DNA、ELISA法检测HBV-LP。结果 64例HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清中,HBV-DNA阳性36例,总检出率为56.3%;HBV-LP阳性44例,总检出率为68.8%;HBV-DNA与PreSl抗原具有较好的相关性,HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清HBV-DNA、HBV-LP阳性率差异无统计学意义,HBV-DNA复制拷贝数为<103、103-5、106-7、>107拷贝/ml,HBV-LP检出率分别为60.7%、82.6%、60.0%、66.7%。结论 HBeAg阴性的乙型肝炎患者血清中HBV-LP检测可以作为HBV-DNA检测的有效补充。

药物治疗过程中乙型肝炎患者血清病毒外膜大蛋白与病毒核酸的检测分析

目的探讨阿德福韦酯(ADV)抗病毒治疗慢性乙型肝炎(CHB)过程中,患者血清中乙型肝炎病毒大蛋白(LHBs)和乙型肝炎病毒(HBV)DNA载量的相关性及临床意义,评价LHBs在ADV抗病毒治疗中的应用价值。方法将117例CHB患者分为HBeAg阳性组49例,HBeAg阴性组68例,分别给予ADV 10 mg,口服,每日1次,治疗96周。采用ELISA法检测LHBs和HBV免疫标志物(HBV-M);采用实时荧光定量PCR法检测HBV DNA。结果抗病毒治疗24、48、72、96周后HBV DNA和LHBs转阴率无明显差别(P>0.05),LHBs水平与HBV DNA拷贝数对数呈正相关(r=0.827);LHBs A值和HBV DNA拷贝数随抗病毒治疗时间的延长同步下降;在HBeAg阳性组46例中HBV DNA、LHBs转阳率分别为58.7%(27/46)、54.3%(25/46),两者差异无统计学意义(P>0.05);在HBeAg阴性组68例中HBV DNA、LHBs转阳率分别为48.5%(32/66)、65.2%(43/66),两者差异有统计学意义(P<0.01)。结论 LHBs是判断HBV体内复制的可靠指标,尤其对判断HBeAg阴性患者体内病毒复制及预后评价具有重要价值。

乙肝病毒大包膜蛋白基因植物表达载体的构建及鉴定

构建包含编码乙肝病毒大包膜蛋白(L蛋白)基因的植物表达载体,并转化根癌农杆菌,为进一步制备转基因植物口服乙肝疫苗奠定基础。通过聚合酶链反应(PCR),以质粒pVAX1-L为模板扩增出L基因片段,插入到含有玉米特异性启动子的pCR2.1载体上;再用PCR技术扩增globulin-1-L融合片段,定向克隆到经过加工修饰的含有抗除草剂基因bar的双元表达载体pCAMBIA1300上,将重组质粒转化至农杆菌LBA4404中。HindⅢ和XbaⅠ双酶切证实,globulin-1-L融合片段已经插入到pCAMBIA1300上,测序结果说明克隆的靶基因序列与GenBank上公布的序列完全吻合。

乙型肝炎病毒S基因(包括PreS)和C基因在重组痘苗病毒中同时表达

用重组痘苗病毒作载体,在11k、7.5k启动子控制下表达乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)大蛋白、核心抗原(HBcAg)和e抗原(HBeAg)。S和C基因的同时表达与单独表达其表达水平基本接近。大蛋白不分泌,存在于细胞浆内,SDS-PAGE检测未发现中蛋白和主蛋白。核心抗原亦不分泌,但e抗原可分泌,并且表达量大大高于核心抗原。家兔一次性接种重组病毒后,50％以上能产生有关抗体。

甲基阿魏酸对乙型肝炎病毒转基因小鼠的抗病毒作用研究

目的:研究甲基阿魏酸(MFA)对乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠的抗病毒作用。方法:将SPF级HBV转基因BALB/c小鼠随机分为模型对照组、阳性药物组(拉米夫定100 mg/kg)、MFA组(100 mg/kg),每组8只;另取同种同龄非转基因BALB/c小鼠为正常对照组。除模型对照组和正常对照组小鼠ig等剂量蒸馏水外其余各组ig相应药物,每日1次。观察各组小鼠体质量,分别于给药前和给药后7、14、21 d,以及停药3 d采集全血约0.25 ml;检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活性,实时荧光定量-聚合酶链式反应检测血清中HBV-DNA的拷贝数,酶联免疫吸附法检测血清中HBV外膜大蛋白(HBV-LP)的相对含量。结果:各组小鼠体质量及ALT、AST活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。与模型对照组比较,MFA组小鼠给药后各时间点及停药后血清中HBV-DNA和HBV-LP水平均降低(P<0.05或P<0.01);拉米夫定组小鼠给药后各时间点血清中HBV-DNA的拷贝数降低(P<0.05或P<0.01),而HBV-LP的相对含量仅在药后21 d时降低(P<0.05),停药则立即回升。结论:MFA可有效抑制HBV转基因小鼠血清中HBV-DNA和HBV-LP水平,未见明显反跳现象;对小鼠血清转氨酶和体质量未见明显影响。

乙型肝炎病毒外膜大蛋白含量与核酸载量的相关性研究

目的探讨乙型肝炎患者外膜大蛋白(HBV-LP)含量与HBV-DNA的相关性及临床意义。方法对270例HBV感染者采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清的HBV-LP、HBeAg,实时荧光定量PCR法定量检测HBV DNA,并进行相关性分析。结果 270例HBV感染者血清中HBV-LP含量与HBV DNA拷贝数变化相一致,两者呈正相关;在152份HBeAg阳性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为95.142%和93.189%,两者差异无显著性;在118份HBeAg阴性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为46.102%和56.125%,两者差异无显著性。结论血清HBV–LP含量能反映HBV感染者体内HBV复制程度,其灵敏度高于HBeAg,可作为判断HBV复制新的血清学指标。

乙肝患者病毒核酸载量与乙肝病毒外膜大蛋白含量相关性的研究

目的:探讨乙型肝炎患者病毒核酸载量与血清乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)含量的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR法分别检测307例乙型肝炎患者血清的HBV-LP、HBV-M和HBV DNA,并进行相关性分析。结果:307例乙型肝炎患者血清中HBV-LP含量与HBV DNA拷贝数变化相一致,两者呈正相关(r=0.943);在131份HBeAg阳性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为95.42%和93.89%,两者差异无显著性(P>0.05);在176份HBeAg阴性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为46.02%和56.25%,两者差异无显著性(P>0.05)。结论:血清HBV-LP水平能反映HBV感染者体内HBV复制程度,其灵敏度高于HBeAg,可作为判断HBV复制新的血清学指标。

乙型肝炎患者病毒核酸载量与乙型肝炎病毒外膜大蛋白含量相关性的研究

目的:探讨乙型肝炎患者病毒核酸载量与血清乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)含量的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR法分别检测307例乙型肝炎患者血清的HBV-LP、HBV-M和HBVDNA,并进行相关性分析。结果:307例乙型肝炎患者血清中HBV-LP含量与HBV DNA拷贝数变化相一致,两者呈正相关(r=0.943);在131份HBeAg阳性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为95.42%和93.89%,两者差异无显著性(P>0.05);在176份HBeAg阴性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为46.02%和56.25%,两者差异无显著性(P>0.05)。结论:血清HBV-LP水平能反映HBV感染者体内HBV复制程度,其灵敏度高于HBeAg,可作为判断HBV复制新的血清学指标。

乙肝患者血清大蛋白检测的临床意义

目的:通过检测乙型肝炎患者血清中HBV-DNA、乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)、乙型肝炎病毒前S1抗原(Pre-S1)和乙肝病毒标志物,比较HBV-LP与Pre-S1的差异,探讨HBV-LP与乙肝病毒复制的关系。方法:对202例乙型肝炎患者和80例正常对照血清采用酶联免疫方法检测HBV-LP、Pre-S1以及HBV标志物,采用实时荧光定量PCR检测血清中HBV-DNA含量。结果:202例乙肝患者血清中HBV-LP阳性率为84.65%,与HBV-DNA阳性率为82.67%无显著性差异,明显高于Pre-S1的阳性率58.41%。同时在HBV-DNA阳性乙肝患者中,HBV-LP阳性率为94.61%,显著高于HBeAg的阳性率。HBV-DNA拷贝数的对数与HBV-LP含量具有相关性(r=0.928)。结论:HBV-LP与HBV-DNA相关性好,是能反映乙肝病毒复制的血清学指标。