慢性乙型肝炎患者长期核苷酸类似物抗病毒治疗后血清HBV pgRNA检出率及与血清学抗原状态的相关性

目的 分析慢性乙型肝炎患者长期核苷酸类似物抗病毒治疗后血清乙型肝炎病毒前基因组RNA(HBV pgRNA)的检出率及与血清学抗原状态的相关性。方法 选取2020年7月—2022年7月在海南西部中心医院接受长期核苷酸类似物抗病毒治疗的150例慢性乙型肝炎患者,根据乙型肝炎e抗原(HBeAg)状态将其分为HBeAg阳性组(32例)、HBeAg阴性组(118例),再根据乙型肝炎表面抗原(HBsAg)水平高低将HBeAg阴性组患者分为4组,其中HBsAg> 1 500 IU/mL患者32例(A组),HBsAg>100~1 500 IU/mL患者32例(B组),HBsAg≤100 IU/mL患者32例(C组),HBsAg阴性患者22例(D组)。比较不同抗原状态下HBV pgRNA的检出率,分析HBV pgRNA与血清学抗原状态的相关性。结果 HBeAg阳性组血清HBV pgRNA检出率(93.8%)高于HBeAg阴性组(43.2%)(P <0.05)。A、B组血清HBV pgRNA检出率(78.1%和65.6%)均高于C、D组(15.6%和0.00%)(P <0.05)。结论 慢性乙型肝炎患者长期核苷酸类似物抗病毒治疗后血清HBV pgRNA检出率与血清学抗原(HBsAg、HBeAg)状态有相关性,HBV pgRNA可作为判断慢性乙型肝炎患者长期核苷酸类似物抗病毒治疗后肝内HBV cccDNA转录活性及复制状态的生物标志物。

慢性乙肝合并肺结核患者外周血单个核细胞HBV pgRNA的表达与免疫功能的相关性

目的研究慢性乙肝(CHB)合并肺结核患者外周血单个核细胞(PBMCs)HBV前基因组RNA(pgRNA)的表达及其与免疫功能的相关性。方法将2018年3月-2019年3月我院结核门诊新确诊的40例CHB合并肺结核患者随机分为两组,对照组(n=20)采用2HRZE/4HR方案进行常规抗结核治疗,治疗组(n=20)在此基础上采用拉米夫定预防性抗病毒,连续治疗6个月。比较两组患者PBMCs中HBV DNA、HBV RNA表达水平,以及CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞水平,分析HBV DNA、HBV RNA与CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞相关性。结果治疗后2个月,两组PBMCs中HBV DNA、HBV RNA水平较治疗前显著升高,治疗组治疗后6个月PBMCs中HBV DNA、HBV RNA水平较治疗后2个月显著下降,与治疗前比较均差异无显著性(P>0.05),且均显著低于对照组(P<0.05)。治疗后2个月,两组免疫功能指标均较治疗前有不同程度下降,治疗后6个月,免疫功能指标均较治疗前、治疗后2个月显著下降(P<0.05);治疗组治疗后2、6个月CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T、IFN-γ均显著高于对照组(P<0.05)。PBMCs中HBV DNA、HBV RNA与CD3^(+)、IFN-γ呈显著负相关(P<0.05)。结论预防性抗病毒治疗可有效降低PBMCs中HBV pgRNA表达,抑制抗结核治疗过程中CHB再激活,改善机体免疫功能。

HBV cccDNA、HBsAg、HBV pgRNA联合检测对恩替卡韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎效果的预测价值

目的研究血清HBV共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)、HBsAg、HBV前基因组RNA(HBV pgRNA)联合检测对恩替卡韦(ETV)治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者的效果预测价值。方法将2015年5月-2017年5月经苏州大学附属第二医院确诊为HBeAg阳性的87例CHB患者纳入研究。根据患者ETV治疗48周后是否获得完全应答,分为获得组(n=38)和未获得组(n=49)。均采取ETV治疗,疗程48周,观测患者基线及治疗12、24、48周时血清HBV cccDNA、HBsAg、HBV pgRNA的水平。正态分布的计量资料组间比较采用t检验,非正态分布的采用Mann-Whitney U检验。计数资料组间比较采用χ2检验;等级资料组间比较采用Mann-Whitney U检验。采用Pearson相关分析探讨肝组织HBV cccDNA与血清HBsAg、HBV pgRNA的相关性。采用多因素logistic回归分析完全应答的预测因素,并采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价血清HBV cccDNA、HBsAg、HBV pgRNA单独或联合检测对完全应答的预测价值。结果相较于未获得组,完全应答获得组患者基线,治疗24、48周时的HBV cccDNA水平明显下降(Z值分别为-2.452、-2.518、-2.266,P值均<0.001);基线,治疗12、24及48周时的HBsAg水平明显下降(Z值分别为-2.431、-2.750、2.386、2.536,P值均<0.001);治疗12、24、48周时的HBV pgRNA水平明显下降(Z值分别为-2.674、-2.503、-2.528,P值均<0.001)。完全应答获得组患者HBV cccDNA在治疗24周时、HBsAg在治疗12周时、HBV pgRNA在治疗12周时的下降水平均明显高于未获得组(Z值分别为-2.352、-2.566、-2.389,P值分别为0.006、0.001、0.004)。血清HBsAg、HBV pgRNA与肝组织HBV cccDNA均呈正相关(r值分别为0.553、0.757,P值均<0.001)。治疗24周时HBV cccDNA、治疗12周时HBsAg、治疗12周时HBV pgRNA的水平可作为预测完全应答的独立影响因素(OR分别为6.248、5.452、5.670,95%CI分别为1.574~14.262、2.048~16.888、1.201~16.183,P值均<0.05)。HBV cccDNA、HBsAg、HBV pgRNA的ROC曲线下面积值分别为0.845、0.741、0.773,均明显小于三者联合检测的0.913(Z值分别为-2.411、-2.712、-2.673,P值均<0.001),其临界值小于9.7时患者治疗48周时可获得完全应答。结论血清HBV cccDNA、HBsAg、HBV pgRNA联合检测对HBeAg阳性CHB患者的ETV疗效具有较好的预测价值。

HBV pgRNA定量指导安全停用核苷(酸)类似物的研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)是导致肝硬化及肝细胞癌的主要病因,积极的抗病毒治疗能明显延缓疾病的进展,减少终末期肝病的发生。核苷(酸)类似物(NA)的使用大大提高了慢性乙型肝炎(CHB)的治疗效果。然而,NA治疗无法完全消除HBV,并且很难终止治疗。HBV前基因组RNA(pgRNA)是一种反映肝内HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)转录活性的新型血清学标志物,能预测HBeAg血清学转换及耐药和复发,在指导NA安全停用方面具有重要的临床意义。该文就HBV pgRNA定量指导安全停用核苷(酸)类似物的研究进展作一综述。

血清HBV pgRNA在慢性乙型肝炎患者聚乙二醇化干扰素抗病毒过程中的临床价值

目的通过动态观察慢性乙型肝炎患者抗病毒过程中HBV pgRNA、HBVDNA、血清学及生化学指标,探索HBVpgRNA在慢性乙型肝炎抗病毒过程中的临床意义,进一步探寻HBV pgRNA在抗病毒治疗终点的预测价值。方法纳入聚乙二醇化干扰素(Peg-IFN)抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者18例,疗程48周,分别在0、12、24、36和48周治疗节点上检测HBV pgRNA水平、HBVDNA水平、血清学和生化学指标,统计分析以上指标间的相关性。结果在Peg-IFN治疗过程中,无论ALT是否升高,患者HBVDNA和HBV pgRNA水平均呈下降趋势;在相关性分析中,HBVpgRNA水平与HBeAg有相关性(P<0.001),与HBsAg无相关性(P>0.05)。HBVDNA阳性患者,HBVDNA与HBV pgRNA呈显著正相关(P<0.01)。治疗时间是影响HBVpgRNA水平的独立影响因素,其他指标与HBVpgRNA无显著相关性(P>0.05);4.22%的患者在治疗的第24周时HBV pgRNA接近最低检测限时,HBsAg开始出现下降,并且在后24周的治疗过程中,HBsAg仍继续下降;而在治疗第24周时,如果HBVpgRNA≥103copies/ml,HBsAg基本无明显下降;而如果在治疗第24周时HBV pgRNA低于最低检测限,在后24周的治疗中,HBV pgRNA水平将持续在检测值以下。结论HBVpgRNA可能更好地反映干扰素抑制病毒复制的情况,同时对免疫学应答有预测作用,有助于治疗效果的判断,对指导个体化治疗具有一定的临床价值。但本研究的样本量少,仍需大样本进一步验证。

恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎患者血清HBV cccDNA和HBV pgRNA水平变化

目的探讨血清HBV共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)和HBV前基因组RNA(HBV pgRNA)水平预测血清HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者接受恩替卡韦治疗后疗效的临床价值。方法2018年1月~2020年1月我院收治的HBeAg阳性CHB患者89例,均口服恩替卡韦分散片治疗48 w。使用COOBAS TAQMAN和COBAS Amliprep系统和采用荧光定量PCR法检测血清HBV cccDNA和HBV pgRNA水平,采用化学发光法定量检测血清HBsAg和HBeAg水平。应用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清各指标预测恩替卡韦治疗的CHB患者疗效的价值。结果89例HBeAg阳性CHB患者经恩替卡韦治疗48 w后,获得病毒学应答85例(95.5%),生化学应答80例(89.9%),血清学应答9例(10.1%);获得完全应答75例(84.3%);完全应答组血清ALT、HBsAg、HBeAg、HBV DNA,HBV cccDNA和HBV pgRNA水平分别为(228.3±34.9)U/L、(2.5±0.4)lg IU/mL、(18.6±1.9)S/CO、(6.1±0.6)lg IU/mL、(2.2±0.2)cps/mL和(4.5±0.6)cps/mL,与非完全应答组【分别为(69.5±17.1)U/L、(3.7±0.7)lg IU/mL、(163.2±16.3)S/CO、(6.8±0.7)lg IU/mL、(3.9±0.4)cps/mL和(7.0±0.7)cps/mL】比,差异显著(P<0.05);应用血清HBV cccDNA与HBV pgRNA水平联合预测CHB患者接受恩替卡韦治疗疗效的ROC曲线下面积为0.892,其敏感性为81.6%,特异性为89.5%。结论在抗病毒治疗前,检测HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者血清HBV cccDNA和HBV pgRNA水平预测疗效有一定的应用价值,值得进一步研究。

HBV pgRNA在HBV相关疾病中的表达及其临床意义

目的 探讨血清HBV 前基因组RNA(pgRNA)在HBV相关疾病中的表达及其临床意义。方法 收集90例慢性乙型肝炎、54例乙肝肝硬化和44例HBsAg阳性原发性肝癌患者血清样本,进行HBsAg、HBeAg、HBV DNA和HBV pgRNA检测。结果 血清HBV pgRNA水平在慢性乙型肝炎组、肝硬化组、肝癌组患者中的中位数分别为7.08、5.16 和4.08 log copies/mL ,差异有统计学意义(χ^2=24.743, P <0.001)。在HBeAg阳性患者中,HBV pgRNA水平在慢性乙型肝炎组、肝硬化组、肝癌组患者中逐渐降低,差异有统计学意义(χ^2=14.864, P <0.001);且血清HBV pgRNA水平与血清HBV DNA、HBsAg水平及HBeAg滴度呈正相关。而在HBeAg阴性患者中,血清HBV pgRNA水平与血清HBV DNA、HBsAg水平及HBeAg滴度无相关性。结论 血清HBV pgRNA水平在慢性乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者中逐渐降低,且与HBV DNA、HBsAg水平及HBeAg滴度呈正相关。

聚乙二醇干扰素α-2b对慢性乙型肝炎患者血清标志物HBsAg、HBV-pgRNA、HBV-RNA的影响

目的观察聚乙二醇干扰素α-2b(Peg-IFNα-2b)对慢性乙型肝炎(CHB)患者血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)表达水平的影响,并探究其与新型血清标志物乙型肝炎病毒前基因组(HBV-pgRNA)、HBV-RNA的关系。方法收集该院2018年2月至2021年12月初次确诊的36例接受Peg-IFNα-2b治疗6个月的CHB患者血清;使用化学发光法HBsAg测定试剂盒检测血清HBsAg水平;聚合酶链式反应(PCR)荧光探针法检测血清HBV-DNA、HBV-pgRNA、HBV-RNA水平;使用Pearson相关性分析HBV-pgRNA、HBV-RNA与HBsAg之间的相关性。结果与治疗前相比,治疗后CHB患者血清HBsAg、HBV-DNA发生明显降低,HBV-pgRNA、HBV-RNA也明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前血清HBV-pgRNA、HBV-RNA均与HBsAg呈显著的正相关(r=0.751、0.702,均P<0.05);治疗后血清HBV-pgRNA、HBV-RNA与HBsAg也呈正相关(r=0.420、0.625,均P<0.05)。与治疗前相比,治疗后HBV-pgRNA、HBV-RNA与HBsAg的相关系数均明显的降低。结论Peg-IFNα-2b可抑制CHB患者血清HBV-HBsAg,且HBV-pgRNA、HBV-RNA与HBV-HBsAg表达水平呈正相关。

联检反应性鉴别非反应性献血者血浆标本乙型肝炎病毒感染情况的研究

目的 分析常规血筛中核酸单检系统联检结果反应性而初次鉴别结果非反应(NRR)献血者标本中HBV的感染情况,以期为NRR标本后续相关研究提供建议及数据支持。方法 对60份常规血筛中酶免结果阴性,核酸单检系统检测结果为NRR的献血者血浆标本进行HCV RNA和HIV RNA重复鉴别检测、HBV DNA病毒载量检测、HBV pgRNA病毒拷贝量检测,并对HBV DNA病毒载量和HBV pgRNA病毒拷贝量检测结果为阳性的NRR标本进行HBsAg、HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb的血清学检测,分析其中血清学感染状态和隐匿性乙型肝炎(OBI)的感染情况。结果 60份NRR标本HCV RNA及HIV RNA重复鉴别结果均为阴性。60份NRR标本中HBV DNA定量检测结果为阳性的有9份(15%),HBV DNA浓度均<10 IU/mL;HBV pgRNA定量检测结果为阳性的有9份(15%),其病毒拷贝量X±SD为289±58.25(copies/mL);HBV DNA阳性且HBV pgRNA阳性NRR标本有2份(3.33%)。9份HBV DNA阳性标本中HBcAb阳性率最高为66.67%,其中有7份(77.78%)并确认为血清学阳性OBI。9份HBV pgRNA阳性标本中HBcAb阳性标本的pgRNA拷贝量略高于其阴性标本,而HBsAb和HBeAb阳性标本的pgRNA拷贝量均低于其对应阴性样。近6年中心单检核酸系统中NRR标本比例波动范围0.09%~0.13%。结论 HBV DNA及HBV pgRNA存在于NRR标本中,HBV DNA和/或HBV pgRNA阳性标本中可检出相关血清学感染性标志物,NRR标本具有一定OBI感染的潜在风险,HBV DNA和HBV pgRNA联合检测,可以更好地确认NRR中的病毒感染状态,提高输血安全性。

乙型肝炎病毒pgRNA在慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗停药抉择中的临床意义

目的探索乙型肝炎前基因组RNA(pgRNA)在慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒治疗停药抉择中的临床意义。方法收集2019年1月至2019年12月在四川大学华西医院感染性疾病中心就诊的长期抗病毒治疗的CHB患者资料,经高敏HBV DNA及HBV pgRNA评估后停药(HBV DNA≤20 IU/ml且HBV pgRNA<150拷贝/ml),对纳入的91例HBeAg阴性CHB患者进行前瞻性观察性研究,随访停药后3个月、6个月、12个月的临床情况,分析HBV pgRNA等因素与停药后复发的关系。组间比较应用χ2检验。停药后累积复发率以Kaplan-Meier分析计算。结果观察至停药后12个月,共有34例(37.4%)患者出现复发并恢复抗病毒治疗,停药12个月累积复发率为46.8%。复发患者中,有14例(41.2%)患者伴随出现了生物化学突破,恢复抗病毒治疗后均实现良好的生物化学及病毒学应答。运用Cox多因素比例风险回归分析发现停药前HBV pgRNA水平及服用的抗病毒药物种类与停药后复发有关。HBV pgRNA≤50拷贝/ml组停药后出现复发的风险是HBV pgRNA阴性组的2.316倍(HR=2.316,95%CI:1.047~5.126,P=0.038)。而HBV pgRNA>50拷贝/ml组停药后出现复发的风险是HBV pgRNA阴性组的3.45倍(HR=3.450,95%CI:1.338~8.892,P=0.010)。结论HBV pgRNA可以用于预测CHB患者抗病毒治疗停药后的复发风险。停药前血清中HBV pgRNA阴性的患者停药后复发风险相对较低,对于HBV pgRNA>50拷贝/ml的患者不建议停药。

血清HBV RNA在抗病毒治疗中的应用进展

肝内共价闭合环状DNA(cccDNA)的持续存在是导致乙型肝炎病毒(HBV)感染慢性化的主要原因。血清HBV RNA是包含前基因组RNA(pgRNA)及其剪切变异体的病毒样颗粒或衣壳抗体复合物,在一定程度上可反映肝内cccDNA的存在及活性,因而在反映抗病毒治疗应答、预测停药后复发方面具有重要意义。该文综述了血清HBV RNA在抗病毒治疗中的应用进展。

抗乙肝病毒治疗新策略:阻断P-ε相互作用

目前,临床上治疗乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)导致的慢性乙肝药物存在应答率低、副作用大和耐药性等缺点,急需寻找抗病毒治疗的新靶点。HBV反转录过程中,反转录酶(P蛋白)和位于病毒前基因组RNA(Pregenome RNA,pgRNA)5′邻近的RNA包装信号(ε)的相互作用(又称P-ε相互作用)非常关键,该相互作用有宿主蛋白如热激蛋白的参与。P-ε复合物形成后,一方面引发反转录的启动,另一方面启动核衣壳的包装。目前封闭P-ε相互作用的策略主要有热激蛋白抑制剂、ε适配子和阻断P蛋白的化合物三个方面,其机制为针对性靶向P蛋白或者宿主蛋白,从而直接或间接地阻断P-ε相互作用。前期,我们首次体外筛选到干扰P-ε相互作用的适配子,体外实验及动物实验均证实,该类适配子强烈抑制HBV复制。总之,P-ε相互作用为抗乙肝研究的临床治疗提供了一个极具吸引力和应用前景的药物靶点,上述三种策略绕过或克服了目前临床上HBV对化疗药的耐药问题,具有较高的应用前景。